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  생화학실험 | pH에 따른 Lipase의 분해도 측정 TIP 효소인 Lipase는 pH, 온도등에 요인에 따라 활성도의 차이가 있다. 그중 pH에 따른 Lipase의 활성도를 측정하고, 그중 가장 optimal한 pH를 알아본다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) Phosphate buffer의 pH에 따라 Phosphate buffer 9500㎕, p-NPB 300㎕, Lipase bead 1ea를 넣어 3개의 sample을 만든다. buffer P-NPB Lipase bead pH6 9500㎕ 300㎕ 1ea pH7 9500㎕ 300㎕ 1ea pH8 9500㎕ 300㎕ 1ea 2) 위의 3개의 sample을 incubator 25°C에서 반응시킨다. 3) 각각의 sample을 10분, 20분, 30분, 40분 에 500㎕씩 취한 후 각각의 pH에 맞는 p.. Biology/생화학 2020. 3. 23.

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  분자생물학실험 | Western blotting TIP 1. PTM(post-translational modifications)의 의미와 N-linked 와 O-linked glycosylation의 차이를 알 수 있다. 2. 균주 Hansenula polymorpha를 YPM배지에서 배양한 후, TCA down을 통해 세포외 단백질을 농축하여 얻고 cell lysis를 통해 세포내 GOD 단백질을 얻고 OD값 측정으로 단백질 정량을 할 수 있다. 3. SDS-PAGE의 방법과 원리를 이해하고 만들어 Western blotting을 통해 GOD 단백질의 발현 여부와 그 크기를 알 수 있다. SDS-Page Acrylamide를 가교제 (cross-linker)로 중합한 polyacrylamide gel은 acrylamide와 가교제의 농도 및 비율에 .. Biology/분자생물학 2020. 1. 31.