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  일반생물학실험 | Macromolecules - Protein Quantification(ver.2) TIP BSA를 이용하여 단백질 농도의 표준 곡선을 그리고 분광광도계를 이용하여 우유의 희석률에 따른 흡광도를 측정한 다음 BSA 표준 곡선을 이용하여 우유를 희석시킨 용액에 포함된 단백질 농도를 알아낸다. 분광광도계 광원에서의 빛을 모노크로미터에 의해 단색화 하여 시료 용액에 투과시켜 투과광의 강도를 전기신호로 변환하여 시료의 흡광도를 측정하는 장치로 일반적으로 단색광을 얻는 장치와 이 단색광의 세기를 정량적으로 측정하는 장치로 이루어져 있다. Bradford Assay 단백정량을 위한 대표적인 방법 중 하나로 여러 가지 농도의 BSA를 만들어 발색시약을 넣은 후 반응시켜 595㎚에서 흡광도 측정을 한다. 그런 다음 표준 곡선을 그리고 미지 시료의 흡광도를 측정하여 그 값을 BSA와 비교하여 시료의 농.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 3. 27.

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  일반생물학실험 | Macromolecules – Protein Quantification(Ver. 1) 거대 분자는 단량체가 모여 중합체가 되어 이루어진다. 생물체에서 거대 분자는 단백질, 핵산, 지질 사슬, 탄수화물 등이 있다. 본 실험은 단백질에 대한 것이다. 아미노산이 모여 펩타이드 결합을 통해 폴리펩타이드를 형성하고 폴리펩타이드가 입체 구조를 이루면 단백질이 된다. 단백질은 1차, 2차, 3차, 4차 구조로 나눌 수 있다. 1차 구조는 단백질에서의 아미노산 배열 순서를 의미한다. 이 구조에 의해 형성된 단백질 분자가 그 구성 아미노산의 분자 구조로 인해 일정한 각도로 꼬이고 구부러져서 특정한 형태를 가지게 되는데, 이것을 단백질의 2차 구조라고 한다. 2차 구조는 알파 나선 구조와 베타 구조로 나눌 수 있으며 규칙성이 없이 꼬여 있는 구조도 존재한다. 2차 구조를 가진 단백질은 3차원적으로 꼬이고 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 3. 18.

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  생화학실험 | Protein quantification by DC protein assay DC (Detergent Compatible) protein assay 본 반응은 Lowry assay와 거의 동일한 원리로 진행된다. 단백질과 alkaline copper tartrate solution 사이의 반응이 일어나고, 이때 생성된 copper-treated protein이 foline 시약에 의해 환원되면서 푸른 색 변화를 보인다. 이는 단백질 농도에 따라 750㎚ 에서 최대 흡광도를 보이면서 단백질 양을 측정할 수 있다. 1. 장점 및 단점 본 실험은 계면활성제가 용해된 상태에서 진행하는 비색성 정량법(colorimetric assay)으로, 계면활성제 존재에 따른 실험값의 추가적인 보정이 필요 없다. 또한 15분 내에 최대 색 변화의 90% 이상 진행되므로 시간을 절약할 수 있다. 시약의.. Biology/생화학 2020. 5. 9.