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  일반생물학실험 | Cell lysis, Bradford Assay TIP Transfection, harvest가 잘 이루어졌는지 알기 위해 cell lysis를 하여 lysate를 얻고 Bradford assay를 통해 protein을 측정한 후 loading sample을 완성한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) lysis buffer를 계산하여 만든다 2) Deep freezer에 얼려놓은 sample을 가져온다. 3) sample이 어느정도 녹은 후 만들어 놓은 lysis buffer를 140㎕씩 넣는다. 4) Pipetting을 하여 바닥에 붙은 cell을 떨어뜨리고 전부 E-tube에 담는다. 5) E-tube를 약 5초간 vortexing하고 ice에 넣어 10mins 기다린다. 6) Centrifuge (12500rpm, 12mins, 4℃) 7) Pe.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 27.

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  생명과학실험 | RNA interference 기법을 이용한 유전자 발현 억제 TIP 1. 유전자의 기능을 연구하기 위한 가장 효과적인 방법인 유전자를 유전체(genome)로부터 제거한 뒤 관찰하는 것을 가능하게 하기 위해서 small interfering RNA를 이용하여 유전자의 발현을 억제시키는 방법을 배워본다. 2. 본 실험에서는 cell을 눈으로 볼 수 있도록 H2AX 단백질에 GFP 형광 단백질을 넣어주어 형광 단백질의 %를 이용하여 쉽게 관찰할 수 있도록 한다. RNA interference RNA가 이중나선 형태를 지니고 있을 때 나타나는 현상으로 이중나선 RNA가 mRNA를 분해하여 특정 유전자를 발현되지 못하게 하는 것을 의미한다. 즉, central dogma 를 일으키지 못하게 하는 것이다. 이중가닥 RNA는 다이서(Dicer)라는 단백질에 의해 인식되어 작은.. Biology/생명 과학 | 공학 2019. 11. 18.