반응형 일반생물학실험 | 플라스미드 추출 TIP Mini-prep라 불리는 Alkaline lysis method을 이용하여 Plasmid DNA을 추출한다. Alkaline lysis Alkaline lysis의 기본적인 원리는 세균의 cell wall과 cell membrance을 부수고 DNA만을 분리하는 것이다. 세균이 원래 가지고 있는 chromosomal DNA와 plasmid DNA를 구분하여 분리해야 한다. 이 둘은 모두 DNA이므로 성질이 비슷하기 때문에 구분하여 분리하기가 쉽지 않다. chromosomal DNA는 분리 과정에서 linear형태가 되고 크기가 상당히 크기 때문에 이런 성질의 차이를 이용하면 분리할 수 있다. 실험 방법 1. Spin Down Bacterial cells 1) Harvesting ① 1.5㎖의 b.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 27. 분자생물학개론 | Introduction of DNA into Living Cells - 생세포에서의 DNA 도입 TIP 1. 형질전환(Transformation) - 세균 세포에 의한 DNA uptake 2. 재조합체의 동정 3. Introduction of phage DNA into bacterial cells 4. Identification of recombinant phages 5. Transformation of non-bacterial cells 재조합 DNA 제조 후 다음 단계는 생세포(보통 세균)안으로 재조합 DNA를 도입시키는 것이며 그 세포는 클론을 생산하기 위해 성장, 분열하게 된다. 엄밀히 말해서, 클로닝이란 재조합 DNA제조 자체를 일컫는 것이 아니라 그 이후 과정만을 말한다. 형질전환(Transformation) - 세균 세포에 의한 DNA uptake 대부분의 세균 종들은 그들이 성장하는 .. Biology/분자생물학 2019. 10. 28. 이전 1 다음 반응형