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  일반생물학실험 | DNA 추출과 전기영동 TIP DNA 추출법을 알고, 전기영동의 원리를 이해한다. DNA 추출 1. Plasmid 세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA로, 고리 모양을 띠고 있으며 세균의 생존에 필수적인 유전자는 아니다. 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다. 2. Plasmisd의 특징 ① 복제기점(original of replication)을 갖기 때문에 증식할 수 있다. ② 항생제 내성 유전자(antibiotic resistance gene)을 가져 selection marker로 사용될 수 있다. ③ Multi cloning site(MCS)가 존재.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 5. 1.

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  생화학실험 | Plasmid DNA isolation from bacterial cell - miniprep 실험 방법 1. 실험 과정 1) 미리 배양한 대장균 (E.coli) 세포 1.9㎖을 2㎖ tube에 넣고 13,000rpm으로 10분간 원심분리 한 후 상등액은 버린다. 2) 남은 용액은 Micro pipette으로 제거하고 Cell 덩어리를 얻는다. 이때 배지 성분이 남아있지 않도록 pipette으로 배지를 완전히 제거한다. 3) Cell이 들어있는 2㎖ tube에 S1 solution 250㎕을 넣고 pipetting한다. 4) S2 solution 250㎕을 넣고 조심스럽게 3～4번 inverting을하고 2분간 방치한다. 5) S3 solution 350㎕ 조심스럽게 inverting 한다. 6) 10분간 원심분리 한 후 plasmid purification tube에 상등액을 붓는다. 이때 pi.. Biology/생화학 2020. 9. 5.