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  일반생물학실험 | Immunohistochemistry와 위 양성반응 경로 차단 TIP 1. 항체반응을 이용하여 신경세포를 염색해본다. 2. 실험을 준비하는 과정에서 위 양성반응의 경로를 생각하고 차단하는 설계를 배운다. 본 실험은 표적세포에서만 발견되는 단백질에 1차 항체를 붙이고, 그 1차 항체에 2차 항체를 붙인 후, 2차 항체에 붙어있는 peroxidase에 의해 DAB가 H2O2와 반응하여 갈색으로 염색되는 실험이다. 이렇게 실험이 진행되는 과정에서 두 가지 위 양성경로를 생각할 수 있다.(false positive reaction : 양성이 아님에도 나타남) 1. 세포 내에 있는 과산화소체에 의해 표적세포가 아닌 다른 세포까지 염색이 되는 경우. 2. 세포 표면에 있는 Fc 수용체가 2차 항체의 Fc부분과 맞아떨어져 다른 세포가 염색이 되는 경우. 이런 두 가지 경로를 막.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 12. 20.

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  분자생물학실험 | Western blotting Western blot은 여러 단백질의 혼합물로부터 어떤 특정단백질을 찾아내는 기법으로서 찾고자 하는 단백질에 대한 항체를 사용하여 항원-항체 반응을 일으킴으로써 특정단백질의 존재여부를 밝혀낸다. 특정 단백질을 찾기 위해서 먼저 gel electrophoresis를 이용하여 크기별로 분리해낸다. 단백질을 순수하게 크기별로 분리해 내기 위해서는 단백질의 단위 질량당 charge와 3차원 folding 구조를 모두 같게 해줘야 한다. 이런 이유로, 단백질은 SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electro phoresis)를 수행한다. 이는, SDS를 detergent로서 이용하여 단백질을 모두 단위 질량당 같은 정도의 negative charge를 띠.. Biology/분자생물학 2020. 4. 24.

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  면역학개론 | 항체(Antibody) 항체 (antibody, Ab)는 항원과 결합하는 단백질을 말하며, 혈액과 체액에 녹아있는 면역글로불린 (immunoglobulin, Ig)을 일컫는 말이다. 항체는 B 림프구의 세포표면에도 존재하는 데, 이를 표면 면역글로불린 (surface immunoglobulin)이라고 부르며, B 림프구에서 항원수용체 (antigen receptor)로 작용한다. B 림프구는 세포표면의 항체단백질 즉 면역글로부린을 이용하여 항원과 반응하게 되며, 특정한 항원과 반응한 B 림프구 클론은 plasma cell로 분화되어 자신이 세포표면에 가지고 있던 것과 똑 같은 항체를 세포 밖으로 분비하게 되는 것이다. 이렇게 B 림프구 밖으로 분비된 항체는 혈액이나 체액에 있는 항원과 결합하여 항원의 작용을 방해하거나 (neu.. Biology/면역학 2020. 4. 18.

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  생화학실험 | ICC(Immunocytochemistry) TIP 1. 단백질이 어디에서 발현되는 가의 여부를 알 수있고 또한 그 단백질이 어디로 이동하는 가에 대한 것도 볼 수 있다. 2. 살아있는 세포와 cell line 이 2가지를 이용해서 관찰할 수 있으며 서로 장단점이 있다. 각 단백질에 달라붙은 first antibody와 또 그 antibody에 붙는 secondary 형광 antibody에 붙이면 일정 파장을 반사하여 색깔이 보이는 것이다. 실험 결과 실험1. 세포의 모양이 동그란 부분은 왜 그럴까?？ A, B는 세포 분열 중기 과정입니다. A-B 순으로 세포 분열이 일어나는 거죠. C의 경우 대부분 분열과정에 포함시켜 해석하였는데, 사실은 세포 사멸 중입니다. 세포 사멸을 배웠는지 모르겠지만, 세포 사멸 중 특히 Apoptosis 에서는 Nucl.. Biology/생화학 2020. 2. 26.