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  세포생물학실험 | 단백질 정량 분석 비교 TIP  단백질 정량 원리에 대해 이해하고, 대표적인 단백질 정량법인 BCA법을 이용하여 직접 단백질을 정량해본다.   단백질 정량이란 시료 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정으로써, 대부분의 생명과학실험의 기본이 되는 과정이라고 할 수 있다. 생물학 분야의 경우, 다른 분야보다 결과를 볼 때까지 뭔가 잘못되었다는 것을 알기 어려워 준비 단계에서의 단백질 정량이 잘못 이루어지면 헛수고를 하거나 잘못된 결과를 얻을 수 있다.  이러한 이유 때문에 단백질 정량을 정확하게 하는 것은 매우 중요하다. 또한, 정확성뿐만 아니라 대부분의 실험에서 반복적으로 사용하게 되므로 간편성 역시 중요하게 여겨지기 때문에 실험에 따라서 다양한 단백질 정량 방법이 사용되고 있다. 대표적인 정량법은 ① Absorb.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 4. 26.

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  환경공학실험 | 자외선-가시광선 분광법을 이용한 먹는 물 속의 철의 농도 측정 TIP 시료속에 철 이온을 암모니아 알칼리성으로 하여 수산화제이철로 침전분리하고 침전물을 염산에 녹여서 염화하이드록시암모늄으로 제일철로 환원한 다음, 1,10-페난트로린을 넣어 약산성에서 나타나는 등적색 철착염을 510㎚파장에서 그 흡광도를 측정, 철의 농도를 추정한다. 검량선 (Standard Curve, Calibration Curve) 물질량과 측정치의 관계를 나타내는 선. 시료중 성분의 양이나 활성을 비색법, 적정법 그 밖의 간접적 방법으로 측정하는 경우에, 그 성분의 표준시료, 또는 표준물질을 이용하여 그 양이나 활성을 변화시켰을 때의 측정치 변화를 그래프상의 선으로 나타내어, 피시험 시료에 관한 측정치를 이것과 비교하므로써 정량할 수가 있다. 이는 정량에 이용하기 위해 작성한다. Beer-La.. Engineering/환경 | 토양 | 폐기물처리 공학 2022. 3. 9.

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  일반생물학실험 | 단백질과 DNA의 정량 TIP 1. 단백질을 구성하는 아미노산의 구조와 특성을 이해하고 아미노산의 특성을 이용한 몇 가지 단백질 정량 방법을 이해한다 2. 대표적인 단백질 정량방법인 Bradford assay와 Lowry method를 이용하여 단백질을 정량 한다 3. DNA의 구조 및 DNA를 구성하는 네 가지 염기의 구조와 특성을 이해하고 DNA의 정량 방법과 순도결정 방법을 실험한다. Bradford Assay 1. 원 리 ① Coomassie Brilliant Blue G-250 (CBBG) 가 arg, trp, tyr, his, phe에 결합시 흡광도의 변화를 측정한다 ② dye는 6개의 phenyl groups 과 2개의 sulfonic acid groups을 통해서 단백질과 결합한다. hydrophobic (Try.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 1. 4.

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  일반생물학실험 | Measure α-Amylase Activity TIP 1. 침에 의한 효소 작용과 그 성분을 유추할 수 있다. 2. Maltose 표준 곡선을 이용하여 침에 들어있는 효소의 양을 구할 수 있다. 표준 곡선 (standard curve, master curve, type curve) 대표적인 여러 모델에 대하여 모델 변수의 변화에 따라서 모델의 반응을 이론적으로 계산한 곡선이다. 표준 곡선은 실제 탐사 자료를 해석하고자 할 때 실제 자료와의 비교를 위해 사용되며 대체적으로 가로축과 세로축은 정규화 된 값으로 만들어진다. 아밀라아제 (amylase) 침 1ℓ 속에는 약 0.4g의 아밀라아제가 들어 있는데, 침이나 위액 속의 아밀라아제는 녹말을 가수분해하여 Maltose를 생성하므로 소화작용에 있어서 꼭 필요하다. 아밀라아제는 고등동물뿐만 아니라, 고등식.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 4. 19.

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  생화학실험 | UV-vis spectrophotometer와 standard curve TIP UV-vis spectrophotometer를 이용해서 시료의 흡광도를 측정하고 그에 따른 Standard curve를 이용하여 미지시료의 농도를 구하기 실험 방법 1. 실험 과정 1) 1mM의 ρ-nitrophenol을 각각 10, 20, 50, 100, 200μM 농도 1mL를 만든다. ρ-nitrophenol(㎕) DW(㎕) 10μM 10 990 20μM 20 980 50μM 50 950 100μM 100 900 200μM 200 800 2) 10μM나 20μM의 경우 10㎕나 20㎕의 피펫팅이 부정확할 수 있으므로 100μM용액에서 100㎕를 에펜 튜브에 넣고 DW 900㎕를 첨가하면 10μM의 시약을 얻을 수 있고, 20μM농도의 시약도 이 방법을 사용해서 제조할 수 있다. 3) 각각 만.. Biology/생화학 2020. 4. 18.