반응형 일반생물학실험 | 단백질의 정량 및 정성 분석 TIP 정성분석(뷰렛방법)을 통해 단백질의 포함 유무를 분석하고 정량분석(BCA법)을 통해 단백질의 양을 측정한다. 단백질 모든 단백질은 널리 존재하는 20가지 종류의 아미노산이 특징적인 선상의 서열로 공유결합된 것이다. 이러한 각 아미노산은 각각의 특유의 화학적인 성질을 나타내는 곁사슬을 가지고 있으며 이 20가지 종류의 전구체 분자로 된 집단은 단백질 구조의 언어로 쓰이는 알파벳과 같다고 볼 수 있다. 단백질은 몇 개의 아미노산 잔기로 이루어진 비교적 간단한 펩타이드에서 분자량이 수백만이나 되는 거대한 중합체(polymer)까지 존재한다. 아미노산은 R기의 극성과 전하(pH7에서)에 따라 5가지 종류로 분류할 수 있다. 비극성, 지방족 R기 알라닌, 발린, 류신, 아이소류신, 글라이신, 메싸이오닌, .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 8. 일반생물학실험 | 생물학적 분자의 검정 TIP 생명체의 중요한 고분자 물질인 단백질, 탄수화물, 지질의 구조와 기능을 이해하고 발색 반응에 의한 생물학적 분자의 검정법에 대해 알아본다. 탄수화물의 검정 녹말, 셀룰로오스, 포도당등과 간이 일반적으로 탄소․수소․산소의 세 원소로 이루어져 있는 화합물이다. 생물체의 구성성분이거나 에너지원으로 사용되는 등 생물체에 꼭 필요한 화합물이다. 탄수화물은 C, H, O로 구성되어있다. 단당류(monosaccharide)는 3~7개의 C를 함유하고 있으며 더 복잡한 탄수화물을 만드는 기본 단위가 된다. 두 개의 단당류가 결합하여 이당류(disaccharide)를 형성하며 많은 수의 단당류가 결합하여 다당류(polysaccharide)를 형성한다. 포도당과 같은 6탄당은 생명체의 기초적인 에너지원이 되며 식물.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 7. 3. 일반생물학실험 | 단백질의 검출 TIP 생명현상과 생물체를 이루는 중요한 구성요소 중 단백질을 발색반응을 이용하여 화학적으로 검출하여 보는 실험이다. 확인 반응 1. 뷰렛반응 뷰렛 반응은 5%의 수산화 나트륨용액(또는 수산화 칼륨)과 1%의 황산구리 수용액을 섞어서 만든 뷰렛 용액(푸른색)을 이용하여 단백질을 검출하는 반응이다. 구리이온이 펩티드와 결합할때 색이 변합니다. (감도는 1-10mg 정도) 즉, 뷰렛 용액에 단백질을 넣으면 단백질의 작용기인 펩티드사슬이 구리와 나트륨과 결합하여 형성되는 비스뷰타렛구리(II)산 나트륨(수산화 칼륨의 경우 비스뷰타렛구리(II)산 칼륨)을 생성하면서 색이 보라색으로 변한다. 2. 로우리법(Lowry) 1951년에 이반응을 발견한 사람 이름을 사용하였다. 금속성 이온이 고리형구조의 잔기를 가진 아미.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 5. 30. 임상화학실습 | Biuret 법 Biuret 법 뷰렛반응 시약 속에는 2가의 구리이온(Cu2+)이 들어 있기 때문에 푸른색을 띤다. 시약이 단백질과 만나면 보라색으로 색이 변하는 성질을 이용하여 단백질의 검출에 사용한다. 색이 변하는 이유는 펩티드결합이 두 개 이상 존재하는 구조를 뷰렛이라 하는데, 이 뷰렛구조가 2가의 구리 이온과 반응하여 보라색의 착화합물을 형성하기 때문이다. 모든 단백질은 기본적으로 무수히 많은 펩티드결합으로 이루어져 있기 때문에, 뷰렛반응으로 검출할 수 있다. 단백질 뿐 아니라 단 몇 개의 펩티드결합을 가지고 있는 펩티드도 검출할 수 있다. 두 개 이상의 펩티드 결합을 가지고 있는 화합물들은 알칼리성 용액에서 묽은 황산구리로 처리하면 자주색을 띠는 물질을 생성한다. 색깔은 구리 원자와 두 개의 펩티드 사슬에서 오.. 보건의료/의약학 2019. 11. 27. 생명공학실험 | Lowry 법을 이용한 단백질 정량 식품중의 단백질은 탄소, 수소, 산소의 각 원소 외에 반드시 일정량의 비율로 질소를 함유하고 있다. 특히 질소는 지방이나 탄수화물 등 식품의 다른 중요 성분에는 포함되어 있지 않으므로, 식품중의 단백질 정량은 전질소량을 정량하고 그 값에 일정의 계수를 곱하여 조단백질의 양을 구한다. 가장 널리 사용되어지는 정량법의 한 가지로서 감도도 좋고, column chromatography에 있어서 단백질의 정량에 적합하다. 또한 이하에 나타낸 물질이 혼재하여도 정량치에 영향을 주지 않는다. 본 법의 원리는 알칼리성에서 단백질의 펩타이드 결합과 구리가 반응해 구리 이온을 생성하는 뷰렛 반응 원리를 이용한 실험이다. 구리 이온은 방향족 아미노산의 산화를 유도하여 인몰리브덴산(인덩스덴산)이 단백질 중의 트립토판과 티록.. Biology/생명 과학 | 공학 2019. 10. 16. 이전 1 다음 반응형