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  유전학실험 | Restriction enzyme digestion Treatment of Restriction Enzymes 제한효소를 이용한 절단은 적절한 반응조건하에서 DNA와 효소를 incubation시킴으로써 간단히 수행할 수 있다. 염 농도, pH, 반응온도, DNA 및 효소의 양 등이 효소반응의 변수로 작용한다. 제한효소의 1 Unit는 지정된 buffer와 지정한 온도에서 1시간 동안 λ DNA 1㎍을 완전히 분해하는데 필요한 양을 나타낸다. 1) 멸균한 200㎕ microtube에 다음과 같은 비율로 잘 혼합한다. 2) 37℃ incubator에서 약 2시간 정도 반응시킨다. 3) 전기영동하여 확인한다. 실험 방법 1. Protocol 1) 37℃ incubator에서 약 2시간 반응시킨 후 전기영동하여 확인한다. Plasmid DNA 16㎕ 10X R .. Biology/유전학 2024. 1. 9.

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  유전학실험 | gDNA extraction from human oral epithelial cells Genomic DNA Genomic DNA는 유전체(genome)을 구성하고 있는 긴 DNA 서열으로, 개체가 가지고 있는 유전 정보를 포함하는 모든 DNA를 총칭한다. 좁은 의미로는 플라스미드(plasmid) DNA 와 구분하여 세포 내 염색체(chromosome)를 구성하는 염색체 DNA를 의미하기도 한다. 일반적으로 진핵세포의 genomic DNA는 염색체가 위치하고 있는 세포핵(nucleus) 내부에 위치하며 긴 선형 염기 서열으로 구성되어 있다. Genomic DNA와 플라스미드 DNA는 서로 대비되는 성질을 가진다. 먼저 두 DNA는 서로 다른 구조를 가지는데, 플라스미드 DNA는 원형(circular) DNA 구조를 가지고 genomic DNA는 긴 선형(linear) DNA 구조를 가진다... Biology/유전학 2024. 1. 8.

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  유전학실험 | Sex Chromatin 관찰 바소체 간기(間期) 시기에 진하게 염색되는 이질염색질(heterochromatin) 덩어리 로 불활성화된 X염색체를 말한다. 포유류에서 수컷은 하나의 X염색체를, 암컷은 두 개의 X염색체를 갖고 있다. 따라서 암컷에서 두 개의 X염색체 위에 있는 유전자가 모두 활성화되어 만들어진다면 하나의 X염색체를 갖고 있는 수컷보다 2배나 많은 양의 유전자 산물을 합성하게 된다. 그러나 이렇게 되면 불균형을 초래하여 정상적으로 발생을 하지 못한다. 따라서 유전자량 보정(dosage compensation)을 통하여 암컷의 X염색체 하나를 응축시켜서 불활성화시킴으로써 평형을 유지한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 뺨 안쪽을 이쑤시개로 긁어 구강상피세포를 얻는다. 2) slide glass에 얇게 smear한다. 3.. Biology/유전학 2021. 11. 17.

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  유전학실험 | 혈액을 통해 유전자 검사하는 과정 채혈 1. 소독을 위해 70% isopropyl alcohol이 권장되며 채혈할 부위를 중심으로 바깥쪽으로 원형을 그리듯이 닦아낸다. 소독약이 마르지 않았을 때 채혈을 하면 용혈이 발생하므로 소독약이 완전히 마른 후에 채혈을 실시한다. 2. 압박대는 소독약이 마른 후 채혈 직전에 사용하거나, 묶은 상태로 1분 이상 방치해서는 안된다. 3. 채혈은 바늘 굵기가 18-23G인 주사기를 사용하거나 상품화된 진공채혈관과 일회용 채혈바늘을 사용하여 실시한다. 4. 주사기를 사용하여 채혈할 때는 주사바늘의 사면이 위로 향하게 하여 채혈하고자 하는 정맥에 찌른다. 5. 정맥내에 주사바늘이 들어갔음을 확인하고 지혈대를 푼 후에 혈액을 채취한다. 이때 혈액채취를 빨리하면 피가 잘 나오지 않거나 적혈구가 용혈되는 경우가 .. Biology/유전학 2019. 10. 28.

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  유전학실험 | subcloning I(digestion) TIP 우리가 확인하고자 하는 promoter의 활성을 측정하기 위한 실험과정중 하나로써, 이미 vector에 붙어있는 promoter에서 일부분을 자르기 위해 vector를 restriction enzyme(restriction endonuclease)을 이용하여 잘라낸 후 그 크기들을 확인한다. 1. genomic DNA와 plasmid DNA의 차이 2. subcloning 3. electrophoresis 4. restriction enzyme 5. promoter gene & reporter gene 실험 방법 1. 실험 과정 1) plasmid DNA인 pMB01을 준비한다. 2) Microfuge tube에 DDW 12.5㎕, DNA(pMB01) 5㎕, enzyme(BamHI)을 일정량 넣고.. Biology/유전학 2019. 10. 24.

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  유전학실험 | UV조사를 이용한 B-W균주의 돌연변이 유도 및 효소활성 미생물의 종류에 따라 적절한 배지를 선택하여 사용해야 하기 때문에 배지의 종류와 각종 배지의 제조방법들을 배워서 미생물의 생육조건과 사용목적에 따라 적합한 배지를 선택해야 한다. 그리고 세균 배양에 필요한 영양소가 포함된 배지를 만들어 목적 세균을 증식시킬 수 있고 완벽하게 멸균하기 위해 고압증기 멸균방법을 알아본다. 또한 UV를 이용하여 돌연변이를 유도해 생성되는 결과물을 관찰하고 돌연변이 된 균주와 모체의 차이점을 알 수 있는 실험법에 대해 알아보고, 효소 활성 확인 배지에서 효소활성여부 결과를 확인해본다. 모체와 돌연변이체의 차이점 첫 번째로 DNA 염기서열 차이가 있는데 돌연변이가 생기게 되면 DNA의 염기서열에 변화가 일어나서 문제가 발생되며 변화가 생긴 염기서열이 복제가 되면서 모체와는 다른 .. Biology/유전학 2019. 10. 9.