반응형 미생물학실험 | 그람염색법 그람염색은 세균의 형태, 크기, 배열, 그람 염색상에 따라 세균을 분류하는데 가장 흔히 이용하는 염색 방법으로서 병인균의 신속한 예비 보고와 검체 질 평가에도 유용하게 사용된다. 그람염색법은 1884년 덴마크의 의사 H.C.J.그람(1853∼1938)이 고안한 특수 염색법으로, 표본을 아닐린수(水)·겐티아나액(液)으로 물들여서 요오드·요오드화 칼륨액으로 처리한 후, 순(純)에탄올로 씻으면, 조직은 탈색되지만 균은 탈색되지 않고 자주색으로 보인다. 그러나 그 후 여러 가지 균종이 발견되자 그 속에는 조직과 마찬가지로 에탄올 세정에 의하여 탈색되는 균도 있다는 것이 밝혀졌다. 이때 탈색되는 균을 그람음성균, 탈색되지 않는 균을 그람양성균이라 부르기로 하면서 이 염색법은 당초의 목표와는 달리 세균의 분류에 이.. Biology/미생물학 2022. 7. 27. 일반생물학실험 | 미생물 유전정보 분석 TIP 균을 장기간 보관할 수 있는 stock solution와 균을 배양학 위한 LB agar 배지를 직접 제작해본다. 이 과정에서 마이크로피펫을 포함한 다양한 실험 기구들의 사용방법을 익힌다. 또한 PCR과 겔 전기영동의 원리를 이해하고 이를 활용해 배양한 균의 염기서열을 직접 산출해낸다. 산출된 염기서열을 sequencing과정을 통해 미생물의 종을 확인해보며 Hydrolysis test, 그람염색법 그리고 Oxidase, catalase test을 이용해 실험으로 확인할 수 있는 균들의 특징을 확인해 보는 것까지가 이번 실험의 목표이다. 실험 방법 1. 배지 제작 및 미생물 배양 1) 플라스크에 증류수를 150㎖와 LB media 3.75g, Agar 2.25g를 넣는다.(단, LB media와 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 9. 1. 일반생물학실험 | 멸균법 관찰 멸균법 미생물을 배양하기위해 도말할때, 또는 채취할 때 필수적으로 거쳐야 하는 과정이 멸균이다. 이름을 보면 알 듯이 균을 멸한다, 즉 (물리적인 방법으로) 미생물을 사멸시키는 것을 의미한다. 멸균법에는 다음과 같은 종류가 있다. 건열 : 건조한 상태에서 높은 온도를 유지시켜 세균을 제거하는 방법. ① 화염멸균법 : 멸균시킬 물체를 직접 불꽃에 접촉시켜 표면의 미생물을 제거하는 방법. 가스버너, 알코올램프등을 사용하며 금속기구, 유리기구나 자기제품의 일부, 백금선(혹은 백금이)등을 멸균할때 사용된다. 가장 완벽하고 쉬운 멸균법이다. ② 건열멸균법 : 건열멸균기(dry oven)를 사용하여 160～180℃에서 1～2시간 동안 건열처리하며 미생물을 산화또는 탄화시켜 미생물 및 포자를 완전히 멸균하는 방법.유.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 12. 28. 일반생물학실험 | 신체 미생물 및 공중 낙하균 관찰 TIP 실제 우리 주변에서 생활하면서 접하게 되는 것들에게서 미생물을 배양함으로써, 주변에서 볼 수 있는 균의 종류를 알고, 우리 주변에 출현하는 미생물의 종류와 위생 상태를 점검할 수 있다. 실험 방법 1. 배지 만들기 1) DW 600㎖ + LB 15g(N:T:Y=2:2:1) + agar 9g을 준비한다. 2) 삼각플라스크에 넣고 magnetic stirrer넣고 hot plate에서 녹인다. 3) 잘 녹인후 auto clave 돌린다. 4) 은근한 열이 있을 때까지 식힌다. (굳지않게 유의) 5) petri-dish에 적당한 양을 부어주고 식혀 굳힌다. 6) 랩(or 파라필름테이프)에 싸서 4℃에 거꾸로 보관한다. 2. 신체 미생물 및 공중 낙하균 관찰 1) 냉장고에서 꺼낸 LB plate의 온도가.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 6. 7. 미생물공학실험 | Identification of bacteria by 16S ribosomal RNA gene(rDNA) sequence determination - Bacillus coagulans 탐색 TIP Bacillus coagulans의 분리 Bacillus coagulans가 메주의 생성시에 나오는점과 쌀겨발효시 분리된다는 논문을 통해 관찰된다는 점을 통해서 직접 시료로부터 집적배양을 하고 산생성시 균주 선발 및 순수분리 과정을 통해 균주를 선발한후 16s rRNA 유전자 증폭 시키고 염기서열 분석을 하는 것으로 전략을 세웠다. 실험 방법 1. 집적배양 과정 총 4가지 시료 중 {순창 메주,생기몰 메주,재래식 메주(초기,후기),쌀겨} 재래식 메주를 선택하여서 초기,후기 재래식 메주를 각각 10g을 채취후 MRS broth와 항진균제인(Cyclohexmide,NaN3)을 넣어서 농도를 10ppm으로 맞춰주고 autoclave에 50℃로 배양한다. 2. spreading 과정 autoclave에 .. Biology/미생물학 2020. 1. 20. 미생물실험 | Viable cell count - Serial dillution method 실험 방법 1. 실험 과정 1) 균의 오염을 막기위해서 무균실에서 실험진행 2) tube에 펜으로 labeling을 해준다. 10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 3) 준비된 tube (total volume:1㎖) 에서 균을 100㎕만큼 Pipetting 해준다음 900㎕의 H20가 들어있는 tube에 넣어서 total volume을 1㎖로 맞춰준다. (∴10-1희석) 4) 10-1 희석된 튜브에서 같은 방식으로 100㎕만큼 Pipetting 해준다음 각각의 tube에 넣어서 5) 10-2, 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 순서로 희석시켜준다. 6) 10-5 만큼 희석한 것을 100㎕만큼 Pipetting 해준다음 평판배지에 올려놓는다. 7) 준비된 삼각유리봉을 알코올.. Biology/미생물학 2020. 1. 4. 미생물실험 | 공중 낙하균 TIP 1. 대기 중에 존재하는 균의 종류와 위생 상태를 점검할 수 있으며 그 수치를 측정함으로서 미생물의 분포를 알 수 있다. 2. 청정도 테스트의 한 방법인 공중 낙하균 검사는 공중미생물의 종류와 수를 검사하는 것은 식품위생상의 의의가 있다. 공중 낙하균 일정면적의 한천평판배지를 일정시간 어느 환경속에 방치하고 공기 중에 떠다니고 있는 미생물이 낙하하는 균을 말한다. 배지위에 발육하는 균은 생균 또는 먼지 등에 포함된 생균. 곰팡이, 효모류의 포자, 세균의 아포, 구균류 등이 있다. 이 방법은 측정이 용이하고 저렴한 이점이 있지만 단위용적 당 공기 중 세균농도의 평가는 할 수 없다. 공중 낙하균 방법 1) 한천배지를 지정장소에서 일정시간동안 뚜껑을 열고 공중낙하균을 부착시킨다. 2) 37℃의 인큐베이.. Biology/미생물학 2019. 11. 20. 이전 1 다음 반응형
