반응형 생화학실험 | 단백질 분리정제 및 기능분석 - buffer 만들기 TIP 1M의 Tris-HCl (pH7.4), NaCl, MgSO4, Stock solution 을 제조한 후 다양한 NaCl 농도의 elution buffer 를 만든다. DEAE sepharose anion exchange chromatography 이온-교환 크로마토그래피(ion-exchange chromatography)법은 주어진 pH에서 단백질이 가지는 알짜 전하(net electric charge)의 하전성과 전하량의 차이에 의해 분리하는 방법이다. 관 속의 기질은 합성 중합체(수지,resin)로서 전하를 띤 기를 가지고 있는데; 양이온 기를 가지는 경우 양이온 교환체(cation exchanger)라고 부르며, 음이온 기를 가지는 경우 음이온 교환체(anion exchanger)라고 부른다.. Biology/생화학 2023. 4. 11. 생명화공실험 | 완충용액 TIP 완충용액을 제조하는 방법을 익히고 완충용액의 특성을 파악하는 것이다. 실험 요약 pH 측정기, NaOH 용액, HCl 용액, Sodium acetate trihydrate, Glycine 등을 이용하여 완충용액을 제조하는 방법을 익히고 완충용액의 특성을 파악해보았다. 각각의 완충용액을 제조하여 Sodium acetate trihydrate 완충용액에는 NaOH를, Glycine 완충용액에는 HCl을 가해주어 완충용액이 더 이상 완충작용을 하지 못하는 부분이라 생각할 수 있는 용액의 pH가 급변하는 지점을 관찰해본 결과, 완충용액의 농도와 완충 값 사이에 비례관계가 성립함을 알 수 있었다. 완충용액 (Buffer) 제조방법 완충용액을 제조하는 방법은 여러 종류가 있으나 가장 간단하고 안전한 방법은 .. Biology/생명 과학 | 공학 2023. 3. 6. 일반화학실험 | pH와 완충용액 TIP pH와 완충용액에 대해서 자세히 알아보고 각 지시약을 이용해 색 변화를 관찰해보자. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 약산 buffer 와 약염기 buffer를 각 양을 다르게 넣어 9개를 넣어준다. 2) 용액을 넣어 준 팁을 흔들어 섞어준다. 3) 96plate에 섞은 용액을 100람다 씩 3칸에 넣어준다. 4) 샘플도 100람다 씩 3칸에 넣어준다 5) plate의 한 줄씩 blue, purple, phenol- 지시약을 2람다씩 넣어준다. 6) 색 변화를 관찰하여 pH값을 추측해 본다. [일반화학실험]pH와 완충용액 레포트 1. 실험 목적 1.1. pH와 완충용액에 대해서 자세히 알아보고 각 지시약을 이용해 색 변화를 관찰해보자. 2. 실험 기구 및 시약 2.1. 실험 기구 2.1.1. 파이펫.. Chemistry/일반화학 2022. 3. 2. 일반화학실험 | 완충용액의 효과와 용량 확인 TIP 완충 용액의 pH 변화를 통해 완충작용과 완충용량에 대해서 알아본다. 완충 용액 약한 산과 그 짝염기로 구성되어 있으며 pH가 거의 변하지 않는 용액을 말한다. 약산과 그 염의 혼합 용액 또 는 약염기와 그 염의 혼합 용액은 약산과 약염기의 해리특성에 의하여 그 pH가 변화하지 않는다. 적당한 산이나 염기를 그들 의 염과 반응하면 적당한 pH를 나타내는 완충 용액을 조제할 수 있는데 이는 생물완충 등 다양한 방면에서 매우 중요하다. 예 를 들면, 혈장은 pH의 변화가 0.2 이내로 유지하는 거의 완벽하고 이상적인 완충 용액이다. 즉 혈장의 pH는 7.2～7.3으로 유지 되고 있는데 이 pH에서 멀어지면 생명이 유지되지 못한다. 또한 일정한 pH에서 생체 촉매인 효소의 촉매작용도 최대가 된다. 일반.. Chemistry/일반화학 2021. 11. 1. 일반화학실험 | 센물 분석 TIP 1. 킬레이트제인 EDTA를 이용하여 물 속에 존재하는 과 전체농도를 구한다. 2. 핵심개념 : 센물(Hard water), 세기(Hardness), EDTA(ethylenediaminetetraacetic acid), 킬레이트(Chelate), 착물, 완충용액 자연수 속에는 Ca2+과 Mg2+ 이온 같은 이온이 존재 광물 속의 탄산염을 약산인 빗물이 용해시켜 자연수 속에 존재 CaCO3 + H2O + CO2 → Ca2+ + 2HCO3- Ca2+과 Mg2+ 이온은 물 속에서 비누와 반응하여 침전물을 형성하여 세척 효과를 떨어뜨리거나 보일러 내부에 물때를 끼게 함 2C17H35CO2-Na+(aq) + Ca2+(aq) → C17H35CO2- Ca2+ -O2CC17H35(s) + 2Na+(aq) Ca2.. Chemistry/일반화학 2021. 9. 14. 일반화학실험 | 완충용액 TIP 완충 용액의 원리를 탄산 같은 이양성자산의 적정 곡선을 통하여 배운다 강산을 강염기로 적정할 때 pH는 적정되지 않는 산이나 과잉 염기의 농도만으로 구해질 수 있다. 이는 생성된 염기(Cl-)가 pH에 어떠한 영향도 미치지 않기 때문이다. 그러나 약산을 강염기로 적정할 때는 몇 가지 고려할 점이 있다. 어떤 약산이 수용액에서 이온화되어 소량의 H+이온을 생성할 때 다음과 같이 된다. HA → H+ + A- (1) OH-이온이 첨가되면 H+이온을 중화시켜 다음과 같이 된다. OH- + H+ → H2O (2) 다양성자산 H+ 이온의 제거는 약산과 그 이온들 사이의 평형을 방해한다. 따라서 더 많은 HA가 이온화 되어 다시 평형에 도달하게 된다. 새로이 형성된 H+이온은 더욱 OH⁻이온에 의해 원래의 .. Chemistry/일반화학 2021. 8. 21. 일반생물학실험 | 완충액과 증류수의 염산투여에 따른 pH대조 화학, 생물등 많은 과학에서 완충작용은 중요하게 여겨진다. 화학에서는 공통 이온이 들어 있는 산-염기 용액의 응용 중에서 가장 중요한 것이라고 말할 정도이다. 여기서 완충용액의 간단한 정의를 알아보면 완충 용액(buffered solution) 은 수산화 이온이나 양성자가 첨가될 때, 그 pH변화를 막는 용액이다. 완충용액의 가장 중요한 실제 예는 혈액이다. 생체 반응에서 생기는 산이나 염기를 그 pH변화 없이 흡수할 수 있다. 세포는 매우 좁은 pH 범위에서만 살아 남을 수 있기 때문에 혈액의 pH를 일정하게 유지하는 것은 매우 중요하다. 혈액 속의 탄산은 이산화탄소가 물과 반응하여 생성되는데 유리되면 HCO3- 와 H+를 만든다. 탄산과 중탄산염 사이에서의 화학적 평형이 pH의 조절자 역할을 하는 것.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 5. 13. 일반생물학실험 | 완충액 (Buffer solution) “완충”이라는 단어는 보통 “충격을 흡수하는”이라는 의미로 사용된다. 예를들어, 자동차의 범퍼는 충돌의 에너지를 흡수하는 완충제로서 승객을 보호하는 역할을 한다. 완충 용액은 용액의 pH에 대해서 이와 유사한 효과를 보인다. buffer solution은 제한된 양의 센산이나 센염기의 첨가에 의한 pH의 변화를 억제한다. pH조절은 모든 생물체가 수행하는 공통적이고 필수적인 활동이다. 생물체 내에서 수소이온의 농도는 매우 좁은 범위 내에서 유지되어야 한다. 예를 들어 정상적인 사람의 혈액의 pH는 7.4이다. 이 pH가 0.2정도로 아주 작게 변해도 혼수 상태를 일으키거나 심지어는 죽음에까지 이른다. 생물은 완충액을 사용하여 수소이온의 농도를 일정하게 조절한다. 가장 흔한 완충액은 약산과 짝염기로 구성된.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 5. 11. 식품분석학실험 | 용액 및 완충용액 조제 TIP 1. 수소이온농도, pH, 완충용액, pH 미터에 대하여 이해한다. 2. 완충용액의 조제법에 대하여 이해한다. 3. 완충능력의 측정법에 대하여 이해한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 100 ㎖ 부피플라스크에 아래 완충용액(1～4)까지 제조한다. 2.0 M CH3COOH 2.0 M CH3COONa 용액전체의부피(㎖) 완충용액 1 2.50 7.50 100.00 완충용액 2 5.00 5.00 100.00 완충용액 3 7.50 2.50 100.00 2.0 M CH3COOH 2.0 M NaOH 용액전체의부피(㎖) 완충용액 4 10.0 5.00 100.0 2) 제조한 각 용액의 50 ㎖을 비커에 취하고 pH meter 기를 이용하여 pH를 측정한다. 3) 0.010 M HCl 용액 50 ㎖, 증류수 50.. Engineering/식품 영양 | 공학 2021. 4. 20. 일반생물학실험 | pH and Buffer TIP 1. 일반 음료들의 pH를 pH 시험지와 pH 측정기를 통해 측정하여 두 값을 비교한다. 비교를 통해 pH 시험지와 pH 측정기의 사용방법을 익히고 차이를 알아본다. 2. 제산제를 넣은 증류수와 순수한 증류수에 HCl 용액을 넣으면서 pH 변화를 측정하여 비교한다. 비교를 통해 제산제가 완충작용을 하는지 알아본다. pH 물의 산성이나 알칼리성의 정도를 나타내는 수치로서 수소 이온 농도의 지수이다. 산성도 또는 알칼리성을 나타내는 수치에는 pH와 pOH가 있다. 이 중 더 널리 쓰이고 있는 pH는 수용액 속 수소 이온의 농도를 나타낸 것으로서 pH 값이 7보다 크면 알칼리성, 7이면 중성, 7보다 작으면 산성을 나타낸다. 즉, pH는 수소이온 농도의 역수에 로그를 취한 값으로 25℃에서 pH와 pO.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 3. 23. 일반생물학실험 | 수용액의 성질 - 산성도, 완충용액과 용액의 부피 TIP 수용액의 산성도 개념을 습득하고 산성도를 일정하게 유지시켜 주는 완충액을 제조하여 성질을 관찰한다. 완충용액 완충용액이란, 어떤 용액이 외부로부터 소량의 산, 염기가 가해졌거나, 그 용액이 희석되었을 때 pH 변화에 저항하는 용액으로 정의할 수 있다. 이것은 어떤 반응을 최적인 상태로 진행시키기 위하여 일정한 pH를 유지해야할 때 매우 유용 하다. 완충용액은 약산과 그 짝염기의 혼합물 또는 약염기와 그 짝산의 혼합물을 미리 일정한 농도 또는 비율로 혼합한 것이다. 완충용액은 pH≒pKa 일 때 유용하다. 합리적인 농도범위 이상에서는 완충용액의 pH가 거의 농도에 의존하지 않는다. 완충용액은 첨가한 산이나 염기와 반응하기 때문에 pH 변화를 억제한다. 만약 지나치게 과량의 산이나 염기를 가하면 완충.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 2. 7. 분석화학실험 | 전위차 적정 TIP 할로겐화물의 혼합물은 AgNO3로 적정할 수 있다. 적정하는 동안 Ag+의 전위차를 측정하여 혼합물에서 KI와 KCl의 양을 알 수 있다. 1. 지시 전극 : 분석하고자 하는 물질을 직접 감응하는 전극이다. 지시 전극의 조건은 가역적 이어야 하고 감응이 빨라야 하고 재현성이 높아야 한다. 2. 기준 전극 : 일정한 전위를 가지는 반쪽 전지이다. 기준 전극의 조건은 가역적 이어야 하고, 시료용액의 농도에 관계없이 전위가 일정해야 하고, 작은 전류가 흐른 후에도 본래전위로 돌아가야 하고 온도변화에 영향이 작아야 한다. 3. 완충 용액 : 외부로부터 어느 정도의 산 또는 염기를 가해도 그것들의 영향을 받지 않고, 수소 이온 농도를 일정하게 유지하려는 용액이다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 시료를 비.. Chemistry/분석화학 2020. 12. 26. 물리화학실험 | 분광광도계를 이용한 약산의 평형상수 결정 TIP 1. 분광광도계 사용법과 그 원리를 이해한다. 2. 분광광도계 측정후 나온 데이터를 그래프로 그리고 흡광도 값을 찾아 약산의 평형상수를 구한다. 0.001M HCl 용액, 0.001M NaOH 용액을 만들고 티몰블루 용액을 0.001M HCl 용액, 0.001M NaOH 용액, Ph 9.0 완충용액에 넣는다. 그리고 큐벳 5개에 base라인을 측정할 증류수 2개와 아까 만든 용액 3개를 넣고 파장 400㎚～700㎚사이에서 분광광도계를 이용해 측정한다. 결과로 나온 흡수스펙트럼을 가지고 약산의 평형상수를 구할 수 있다. 실험 방법 1. 용액제조 1) 약 0.001M HCl 용액 제조 : 0.1M HCl 약 1㎖ 취하고 증류수 100㎖첨가 2) 약 0.001M NaOH 용액 제조 : 0.1M NaOH.. Chemistry/물리화학 2020. 12. 7. 분석화학실험 | 식초속에 있는 초산의 농도결정 TIP 약산, 센염기 적정을 이용하여 식초의 농도를 알 수 있다. 본 실험은 약산과 센염기 적정을 이용하여 식초에 들어있는 초산의 농도를 알아보는 실험이다. 먼저 기본적으로 알아야할 단위는 몰농도와 노르말농도이다. 몰농도(M)는 용액 속에 포함된 용질의 몰수를 용액의 부피로 나눈 값이고, 노르말농도(N)는 용액 1L속에 녹아있는 용질의 g당량수를 나타낸 값이다. 센 산과 약산의 구분은 이온화정도로 구분된다. 산은 물 속에서 수소이온을 내놓는 물질을 말하는데, 이온화되어 수소이온을 많이 내놓는 산을 강산(센산)이라고 한다. 강산인 물질은 물에서 거의 다 이온화된다. 반면 약한산은 물속에서 1%보다도 적게 이온화되는 산을 말한다. 약산도 산은 산이므로 염기와 중화반응을 한다. 염기도 마찬가지로 수용액에서의 .. Chemistry/분석화학 2020. 8. 20. 물리화학실험 | 메틸레드의 산해리상수 구하기 - Determinate Acid Dissociation Constant of Methyl Red 완충용액 완충 용액(buffer solution)이란 산이나 염기를 가해도 공통 이온 효과에 의해 그 용액의 수소 이온 농도(pH)가 크게 변하지 않는 용액을 말한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 메틸레드 용액을 99%의 에탄올 300㎖에 결정성 메틸레드 1g을 녹이고 증류수를 채워 500㎖를 만들었다. 2) 위 용액 5㎖를 99% 에탄올 50㎖에 천가하고 증류수를 채워 100㎖를 만든다. 3) 산 용액은 표준 메틸레드 용액의 10㎖와 0.1M 염산 10㎖의 혼합물을 증류수로 100㎖까지 희석시킴으로서 준비하였고, 염기성 표준 메틸레드 용액 10㎖와 0.04M 아세트산나트륨 25㎖의 혼합물을 증류수로 100㎖까지 희석시킴으로써 준비하였다. 4) 위에서 준비한 산성 용액과 염기성 용액을 분광용 셀에 넣.. Chemistry/물리화학 2020. 8. 4. 일반화학실험 | 인산의 적정과 완충용액 TIP 1. 인산의 적정을 통해서 다 양성자 산의 적정곡선을 익히고 완충용액의 원리와 중요성을 배운다. 2. 농도를 정확히 아는 표준용액을 (산 or 염기) 만들어 시료 용액과 반응시킬 때 소비된 표준용액의 부피로부터 시료 용액의 농도를 알아내는 적정법의 원리와 실제적 실험법을 익힌다. 산과 염기 일반적으로 산이란, 수용액 중에서 해리하여 수소이온을 생성하고 염기와 중화하여 염을 만드는 물질이고 염기란, 수산이온 OH를 생성하고 산을 중화시켜 염을 만드는 물질이다. 산, 질산, 황산, 인산 등은 일반적인 산들이다. 이 물질 중에 H+이온은 대응하는 음이온과 함께 형성된다. 예를 들어 HCl은 물에 용해되어 H+이온과 Cl-이온을 형성한다. 염화나트륨, 수산화칼륨, 수산화바륨 등은 염기의 예들이다. 이들 .. Chemistry/일반화학 2020. 7. 26. 생화학실험 | pH와 완충용액 - pH and Buffer Solution TIP pH 미터기의 사용법을 숙지하여 pH를 측정한다. 여러 완충용액을 만드는 법을 알고 완충용액의 pH와 변화한 pH를 pH미터기로 측정한다. Handerson-Hasselbalch 식을 이용하여 pH를 계산한다. pH의 측정 Henderson-Hasselbalch 식을 이용해서 pH를 간단하게 계산할 수 없는 복잡한 수용액의 pH를 정확하게 측정하기 위해 pH meter를 이용한다. 요즈음 판매되는 pH meter의 대부분은 기준 전극과 pH 의존형 전극이 함께 하나의 유리나 플라스틱 튜브에 들어있는 복합 전극으로 이루어져 사용이 편리하나 다음과 같은 사항은 꼭 주의하여 사용하여야 한다. pH meter를 사용하지 않을 때는 꼭 대기(stand by) 상태로 두어야하고, 사용하기 전에 반드시 전극 .. Biology/생화학 2020. 6. 22. 생화학실험 | 완충용액 만들기 및 pH 측정 TIP 1. 여러 가지 지시약의 변색 범위를 이용하여 실험을 통해 얻은 완충용액의 pH를 측정할 수 있다. pH 미터기를 이용하여 pH 변화를 관찰하고 농도 변화와 pH관계를 적정곡선으로 나타낼 수 있다. 2. 또한 pH의 이론값과 실제 실험 값을 비교해 보고 그래프로 나타낸다. 3. 지시약을 통해 pH를 측정해본다. 수소이온농도 pH란 용액 1L 속에 존재하는 수소 이온의 몰수를 의미하며 물질의 산성, 알칼리성의 정도를 나타내는 수치로, 수소 이온 활동도의 척도이다. 체내 반응은 수소이온농도, 즉 pH에 따라 그 반응이 진행되기도 하고 비활성화 되기도 하며, pH가 맞지 않는다면 생명체는 치명적인 위험에 처하기도 한다. 이를 이해하기 위해 두 가지 종류의 완충용액을 제조하고 각종 방법을 이용한 pH측정.. Biology/생화학 2020. 6. 11. 이전 1 2 다음 반응형
