반응형 면역학개론 | Enzyme-Linked Immunosorbent Assay(ELISA) TIP 1. ELISA 2. ELISA의 원리 3. ELISA의 종류 4. Sandwich ELISA 실험방법 ELISA ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)는 그 방법이 간단하고 비용이 많이 들지 않으며 다량 분석이 가능하여 현재 가장 널리 쓰이고 있는 Ag-Ab 분석법의 하나가 되고 있으며, Ag-Ab interaction을 이용하여 Ag 또는 Ab를 정성, 정량 할 수 있다. 효소결합 면역흡수 분석법, 즉 ELISA는 효소의 작용을 이용해 특정효소와 결합할 수 있는 면역글로불린(immunoglobulin)의 존재를 확인할 수 있다. 항체에 결합되는 효소 중에는 간단한 기질 용액을 넣어주면 색깔을 띄는 반응을 하게 되는데, 대표적인 효소로는 염기성인산분해효소 (al.. Biology/면역학 2020. 2. 2. 면역학실험 | Mouse immune system의 면역반응 test와 해부학적 구조 확인 1주차 실험 1. 실험 목적 1) 마우스 보정방법 숙지한다. 2) Mouse를 구분할 수 있는 numbering 방법 숙지한다. 3) Mouse 채혈 방법 숙지한다. 4) Centrifugation 원리 숙지로 plasma와 serum 차이 이해, 작동 시 주의 숙지한다. 2. 실험 요약 Mouse numbering → Blood collection → Centrifugation → serum 획득 → antigen 희석액 제조 → mouse에 주입 2주차 실험 1. 실험 목적 1) Serum 2차 채취 2) Ag 2차주입(2차면역반응) 3) Cell의 staining을 통해 leukocyte component에 대해 알아본다. 2. 실험 방법 슬라이드 글라스를 알코올에 소독한 뒤 blood를 monol.. Biology/면역학 2019. 12. 22. 면역학실험 | ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent assay) TIP 1. 실험을 통해 ELISA가 어떻게 수행되어지고 진단 테스트에 적용되는지 배운다. 2. antigen-antibody, receptor-ligand, enzyme-substract 간의 특정한 protein-protein interaction에 대해 이해할 수 있다. ELISA 효소면역측정법이라 불리는 ELISA는 sample에서 antibody나 antigen의 존재를 찾는데 사용되는 생화학적 방법이다. antigen-antibody 반응을 enzyme 표지를 이용하여 enzyme에 대한 substrate를 첨가하여 antigen-antibody 결합체에 붙은 enzyme의 양을 enzyme이 substrate에 대해 작용하여 발색반응이 일어난 정도를 분광 광도계로 측정함으로써 정량하는 방법이.. Biology/면역학 2019. 11. 29. 면역학실험 | Rabbit의 면역체계를 이용한 항원-항체 반응 - Rabbit 체내의 Salmonella 균에 대한 항원-항체 반응 외계로부터 오는 암석, 자외선 등은 지구를 항상 위협한다. 대기층은 지구의 크기에 비하면 보이지 않을 정도로 얇지만 유일하며 강력한 방어기제이다. 인간(동물)의 몸도 외부의 자극으로부터의 방어기제를 지니며 항원-항체 반응은 가장 강력한 방어수단중하나이다. 대기가 거의 없는 달이 운석과 같은 외부공격에 쉽게 황폐화되는 것처럼 면역이 약해져 항원-항체 반응이 일어나지 않으면 개체는 더 이상 유지될 수 없다. 이 반응을 관찰하기가 쉽지 않으므로 ELISA를 method로 채택 하였다. 항원의 유입에 따른 항체의 생성을 관찰하기 위해서 Rabbit의 몸에 Salmonella 균을 항원으로서 투입하고 매주 혈청을 뽑아 따로 보관하였다. 실험 방법 1. 혈청확보 rabbit의 귀에서 1㎖의 혈액을 뽑는다. 혈액을 .. Biology/면역학 2019. 11. 14. 생명과학실험 | Enzyme-linked immunosorbent assay TIP 실험을 통해서 어떻게 ELISA가 작용하는지 알아 보자. 또한 specific protein-protein interaction을 이해해 보자. Enzyme-linked immunoassay (ELISA, 효소결합면역흡착검사) antibody를 이용하여 색깔의 변화를 관찰하고 그 결과를 통하여 antigen이 sample내에 존재하는지를 판별하는 실험법이다. 이 실험 법은 indirect ELISA, direct ELISA, sandwich ELISA 이렇게 3가지 종류가 있다. 이제 이 세가지 실험법들이 어떻게 다른지에 대하여 알아보자. ELISA의 보편적인 실험 원리는 다음과 같다. Protein이 잘 흡착되는 well의 바닥에 알아보고자 하는 antigen이 들어 있는 sample을 넣고 흡.. Biology/생명 과학 | 공학 2019. 11. 10. 면역학실험 | ELISA를 이용한 토끼에서 살모넬라균의 항체 검출 TIP 매주마다 토끼에게 Salmonella균을 주입하고 ELISA라는 실험방법을 통해 Salmonella균에 대한 생성된 항체의 양을 측정하는 것이다. ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)의 원리 및 응용 효소의 작용으로 면역글로불린의 존재를 확인할 수 있는데 이러한 효소를 표식자로 하여 항원-항체반응을 이용한 항원 또는 항체량 측정 방법을 ELISA라고 한다. 이 면역학적 검사방법은 항체 분자에 효소를 공유결합으로 부착시켜 높은 특이성과 민감도를 가지기 때문에 정성 및 정량분석에 유리하며 임상적으로 널리 쓰이고 있다.(0.001-0.01μg/㎖까지 측정가능) 이 기법은 효소의 촉매작용과 항체의 특이성에 변화를 주지 않고 효소를 공유결합시킨 항체를 사용한다. 전형적.. Biology/면역학 2019. 11. 6. 이전 1 다음 반응형