반응형 생명공학실험 | 세포 배양(cell culture) TIP 1. 세포배양을 통하여 세포의 성장 주기와 세포배양법을 익힌다. 2. Hemocytometer를 이용하여 세포 수를 계산할 수 있다. 세포 배양 1. 다세포 생물에서 분리한 세포를 특수한 용기 내에서 성장 및 보존 세포의 세대를 포존시키는 것을 뜻한다. 특수한 용기, 온도, 습도, 영앙소 등의 배양 조건이 필요하다. 2. 계대 배양 : 세포증식을 위해 새로운 배양접시에 옮겨 세포의 대를 계속 이어서 배양하는 방법으로, 제한된 배양접시 내에서 세포가 증식을 멈추게 되므로 이것을 막고 세포가 증식할 수 있게끔 새로운 공간을 제공한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) HBSS를 첨가한다. 2) Trypsin-EDTA 2㎖ 첨가후 37℃ 인큐베이터에 2분간 보관한다. 3) DMEM(+) 10㎖ 첨가후, .. Biology/생명 과학 | 공학 2022. 12. 29. 일반생물학실험 | 푸른곰팡이 포자 수 계측하기 TIP 푸른 곰팡이의 포자 수를 직접적 방법으로 관찰하고 평균 전제 포자수를 계산하기 포자 수 계측의 필요성 1. 포자 수 계측: 포자의 수를 세는 과정 2. 여러 분야에서의 포자 수 계측의 이용 3. 생태학: 생태 내(담수, 토양, 대기 등)에서의 균류의 다양성 확인을 위해 4. 의학, 병리학: 병원성 균류의 확인 및 관련된 실험을 위해 5. 농업, 식물병리학: 식물 병원성 균류의 확인 및 접종 실험을 위해 실험 방법 1. 실험 과정 1) 스포이드로 푸른곰팡이 배지에 증류수를 잠길 정도로 넣는다. 2) 푸른곰팡이 배지를 섞은 후 스포이드를 이용하여 튜브에 푸른곰팡이 포자 현탁액(5㎖)을 넣고 증류수(10㎖)를 넣는다. 3) 블텍싱 기계를 이용하여 푸른 곰팡이 포자 현탁액을 골고루 섞어준다. 4) 푸른 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 8. 7. 분자생물학실험 | Cell Migration assay TIP Cell migration을 유도하고 chemotaxis의 원리를 이해한다. Chemokines 케모카인은 약 100여개의 아미노산으로 구성된 작은 단백질들의 집단으로, 선택적으로 백혈구 소집단의 세포접합, 화학유인작용, 활성화 등을 조절하는 cytokine을 말한다. 케모카인의 이러한 기능 때문에 이들이 염증반응에서 중추적인 역할을 하는 것이다. 케모카인은 림프조직 분아니라 비림프조직에서도 만들어져, 백혈구들이 림프조직이나 일반조직에서 이동하는 과정을 조절한다. 또한 케모카인은 혈관을 통과하여 조직으로 침투한 백혈구를 농도의 차이를 이용하여 염증부위로 유인하는 작용 (chemotaxix)도 나타낸다. 케모카인은 연속된 두개의 cystein의 위치에 따라 CC chemokine과 CXC chemo.. Biology/분자생물학 2021. 7. 8. 일반생물학실험 | Cell counting TIP 세포 배양에서 살아있는 세포의 수를 헤아릴 수 있고 두 실험군의 세포 수를 비교 할 수 있다. Cell counting trypan blue 염색 유무를 이용하여 단순히 살아있는 세포의 수뿐만 아니라 죽은 세포의 수를 함께 측정할 수 있고 살아있는 세포와 죽은 세포의 비율 즉, 세포의 생존율을 계산할 수 있으며 여기에 cell counting의 중요성이 있다고 할 수 있다. 살아있는 세포와 죽은 세포의 counting을 통해 세포의 생존율을 계산함으로써 실험연구에 사용되는 세포가 잘 유지되고 있는지 확인할 수 있고 이를 통해 세포 생존에 유리하도록 환경을 변화시켜줄 수 있는 것이다. 만약 세포의 생존율이 낮음을 알지 못한 채 실험을 했을 경우 산출된 결과가 본래 세포에 의해 나온 결과인지 아니면 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 1. 17. 미생물실험 | Cell counts using Hemocytometer TIP Cell을 배양하는 machine (37도, 5% CO2)에서 꺼낸 sample과 alcohol이 섞인 sample을 비교하여 공기 중에 노출된 sample에서 cell의 생존율을 확인한다. Hemocytometer를 이용한 Cell counting 동물 세포의 수를 세는 방법으로 접종이나 동결보존 등 일정한 수의 동물 세포를 필요로 할 때 이용합니다. 살아있는 세포와 죽은 세포의 counting을 통해 세포의 생존율을 계산함으로써 실험연구에 사용되는 세포가 잘 유지되고 있는지 확인할 수 있고 이를 통해 세포 생존에 유리하도록 환경을 변화시켜줄 수 있는 것이다. 만약 세포의 생존율이 낮음을 알지 못한 채 실험을 했을 경우 산출된 결과가 본래 세포에 의해 나온 결과인지 아니면 죽은 세포에 의해 나타.. Biology/미생물학 2020. 3. 14. 미생물학실험 | 세균 개체수 측정 TIP 1. 세균수를 측정하는 방법을 알아보자 2. Hemocytometer를 이용해 현미경을 통해 육안으로 세균수를 측정해보자. 3. 분광광도계를 이용해 세균수를 측정해보자 Hemocytometer를 이용한 세포 계수법 페트로프-하우저 계수기, hemocytometer를 이용하는 방법은 세균용 계산판에 균액을 한 방울 떨어뜨리고 일정구획 내의 세균을 직접 현미경으로 보면서 계산하는 방법이다. 생균, 사균을 포함한 진균수를 측정하는 방법으로 균수가 너무 적으면 부정확한 단점이 있다. Hemocytometer에 cover glass를 덮고 시료 10㎕ 취하여 hemocytometer의 측면의 홈에 loading 한다. (모세관 현상에 의해 고루 퍼짐. 1회용 C-Chip의 경우 cover glass는 필요.. Biology/미생물학 2020. 1. 31. 동물생리학실험 | hemocytometer를 이용한 세포 계수법 TIP 일정량의 세포 부유액(cell suspension)이 들어갈 수 있는 공간을 가진 hemocytometer를 이용하여 세포수를 현미경으로 측정하여 단위 부피 당 세포수를 계산한다. Hemocytometer(혈구 계산판) Hemocytometer(혹은 Hemacytometer)를 이용한 cell counting은 일정량의 세포 부유액을 눈금이 있는 hemocytometer안에 넣고 눈금 안에 보이는 cell수를 현미경으로 측정 하여 단위 부피당 세포수를 계산하는 방법이다. Hemocytometer의 눈금은 크게 가로 세로 1mm의 정사각형 9개로 구성되는데, 가운데 중앙의 정사각형은 5개의 선으로 나누어 져 25칸이며, 양 옆의 정사각형은 4개의 선으로 분활되어 16칸이다. 보통 대각선 방향의 1m.. 보건의료/의약학 2019. 10. 26. 이전 1 다음 반응형