반응형 일반생물학실험 | 침샘 염색체 관찰 TIP 1. 초파리에서 침샘을 꺼내어 침샘 염색체를 관찰할 수 있다. 2. 침샘 염색체가 다른 염색체보다 크기가 큰 이유를 설명할 수 있다. 염색체의 구조 진핵세포의 간기 핵으로부터 분리된 염색질 에서는 염색체의 형태를 찾아 볼 수 없으며 , 대신 불규칙적으로 모여 있는 핵단백질이 관찰된다. 핵단백질은 많은 DNA와 소량의 DNA를 포함하고 있는 단백질로 구성되어 있다. 이들 단백질은 염색질의 중요한 구조적 역할을 하는 염기성의 히스톤 단백질과 DNA나 RNA 합성 등에 관여하는 비 히스톤 단백질로 되어 있다. DNA 2중 나선의 모양을 띄고 있다. DNA가 히스톤 단백질과 결합하여 뉴클레오솜 형성하며, 뉴클레오솜이 코일 모양으로 감겨 30nm 폭의 염색사를 형성한다. 염색사가 응축되어 굵은 염색체 가닥.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 10. 24. 일반생물학실험 | DNA 구조의 이해 TIP 생물체의 유전정보를 가지고 있는 DNA는 데옥시리보뉴클레오티드로 이루어진 고분자 중합체이다. DNA 단일가닥 또는 이중가닥의 형태로 존재할 수 있으나, 세포를 가진 생물의 DNA는 모두 이중가닥 형태를 가진다. Major groove, Minor groove DNA 이중나선이 다른 두 종류의 고랑을 가지는 이유는 당과 염기를 연결하는 글리코시드 결합이 90°가 아닌 120° 혹은 240° 각도로 기울어져 있어서 염기쌍들이 대각선상에서 서로 마주 보는 위치에 놓이지 않고 비대칭적으로 위치하기 때문이다. 각 염기쌍은 34°씩 축에서 점차적으로 비틀어져 있고, 약 10.5개의 염기쌍마다 360°로 회전되어 한 바퀴를 돌게 된다. 큰 고랑의 길이는 22 Å인데 비해 작은 고랑의 길이는 12 Å이고, 당과.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 11. 22. 화학생물공정실험 | DNA의 농도 및 순도의 측정과 Denaturation 및 Renaturation TIP DNA의 정량방법에 대하여 습득하고, 온도에 따른 변화를 확인함으로서 DNA의 생화학적 특성을 이해한다. DNA 농도측정 DNA를 얻었으면 얼마나 있는가, 얼마나 정제되었는가(다른 불순물이 없는가) 알 필요가 있는데 이는 자외선 분광광도 비색 측정법으로 측정한다. Spectrophotometry의 원리는 특정 파장의 빛을 액체에 통과시키면 빛의 강도가 감소하는 것이다. 물질에 따라서, 또 파장에 따라서 빛의 강도의 감소정도가 일정하므로 이것으로 특정 물질의 농도와 다른 물질(불순물)의 농도를 알 수 있다. (자외선 흡수 복사량은 DNA량에 비례; 260㎚에서 흡광도 1.0 은 50㎍의 복선 DNA양과 일치- 260㎚와 280㎚에서 흡광도 비율은 1.8이다. 측정치가(비율이) 1.8미만이면 DNA시.. Engineering/화학생물공정 2020. 2. 3. 분자생물학실험 | RNA 추출과 RT-PCR RNA 추출 원리 포유세포는 보통 한 세포 당 10-5㎖ RNA를 포함하고 있으며 이 중 80∼85%가 rRNA, 15∼20% 가 tRNA, 1∼5%가 mRNA로 이루어져 있다. 리보솜 RNA나 tRNA 등은 일정한 크기와 염기서열을 가 지고 있기 때문에 전기영동, 초 원심 분리 및 크로마토그래피에 의해 순수하게 분리할 수 있는 반면, mRNA는 크기도 다양하고 많은 종류가 혼합되어 있기 때문에 한 종류의 mRNA를 순수 분리 하기가 쉽지 않다. 그러나 진핵세포 mRNA는 3말단에 poly(A)를 가지고 있기 때문에 리보솜 RNA나 tRNA 등으로부터 분리해 낼 수 있다. RNA를 추출할 때 가장 주의해야 할 점은 핵산 가수분해효소에 의해 분해되지 않고 완전하게 얻는 것이며, 또한 단백질이 제거된 순수한.. Biology/분자생물학 2020. 1. 18. 분자생물학실험 | Polymerase chain reaction(PCR)에 의한 DNA절편의 증폭 TIP PCR의 원리를 이해하고 실제로 DNA의 절편을 증폭하여 본다. PCR과 체내 DNA 합성 1. DNA 두 가닥을 푸는 방법 ① PCR : 온도를 높여 주어서 DNA 이중나선을 푼다. ② 체내 DNA 합성 : 헬리카아제(DNA helicase)라는 효소를 이용하여 DNA 이중나선을 풀고, 단일 가닥 DNA 결합단백질(single strand DNA binding protein)이 분리된 DNA 사슬이 다시 되붙지 못하도록 막는다. 2. 사용하는 polymerase ① PCR : DNA 이중나선이 풀어서 합성해야 하므로, 내열성 DNA polymerase인 Taq polymerase를 사용한다. ② 체내 DNA 합성 : 체내에서는 많은 효소를 사용하기 때문에 내열성 DNA polymerase를 필요.. Biology/분자생물학 2020. 1. 2. 생화학개론 | 세포에 존재하는 분자 TIP 1. 작은 분자는 에너지를 운반하고, 신호를 전달하며, 큰 분자로 결합된다 2. 단백질은 세포 구조를 이루며, 세포가 하는 대부분의 일을 담당한다. 3. 핵산은 적절한 시간과 적당한 장소에서 단백질을 만들 수 있는 암호화된 정보를 갖고 있다. 4. 유전체는 염색체에 모여 있고, 세포분열 동안 복제된다. 5. 돌연변이는 유익하거나 유해하거나 또는 영향이 없을 수도 있다. Molecular cell biologist (분자 세포 생물학자)는 cell의 두드러진 특성을 분자 수준에서 연구한다. 예를 들어, 큰 molecule의 조립 (assembly), 큰 molecule 상호 간의 결합, 특정 chemical reaction (화학 반응)을 촉진하는 catalytic effect (촉매 효과), 그리.. Biology/생화학 2019. 12. 19. 생화학개론 | 핵산의 화학과 대사 TIP 1. 핵산의 구성성분 2 RNA와 DNA 3. Purine과 pyrimidine의 대사 핵산은 생물의 증식이나 생명의 유지에 필수적이며 각 세포 특유의 단백질을 합성하는데 필요한 유전정보를 보존, 전달, 번역하는 기능을 가지고 있다. 핵산은 nucleotide의 중합체(polymer)이며 nucleotide는 purine 염기(adenine, guanine), pyrimidine 염기(cytosine, thymine, uracil), 인산, ribose 또는 2-deoxyribose로 구성되어 있다. 오탄당으로서 2-deoxyribose를 구성성분으로 하는 핵산을 DNA(deoxyribonucleic acid)라 하며 ribose를 가지는 핵산을 RNA(ribonucleic acid)라 한다. D.. Biology/생화학 2019. 12. 2. 분자유전학실험 | CTAB을 이용한 DNA 추출 TIP 1. genomic DNA 추출 과정을 분자 유전학적으로 접근하여 이론으로 배운 DNA에 대해 직접 실험함으로서 기초적이지만 아주 중요한 이론을 확립한다. 2. DNA를 얻고자 CTAB buffer를 이용하여 개개인 혈액의 정제된 genomic DNA를 추출 할 수 있다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 시료 100㎕를 2㎖튜브에 넣고 CTAB buffer 800㎕, Proteinase K를 30㎕ 넣고 균질하게 섞이도록 vortex로 혼합, 65℃ 항온수조에서 30~60분간 항온처리하며 3~4회 혼합 2) phenol : chloroform : isoamyl-alcohol (25:24:1) 용액 800㎕를 넣고 실온에서 5분간 흔들어 준 후 10분간 12000rpm으로 원심분리 3) 새로운 1... Biology/유전학 2019. 11. 18. 생화학개론 | Introduction to DNA - 모든 살아 있는 세포에서 볼 수 있고 유전형질을 전달하는 복잡한 유기화학적 분자구조 TIP 1. DNA의 물리적 특성 2. DNA의 구조 3. 유전물질로서의 DNA 4. DNA 복제 5. 유전정보의 매개체로서의 DNA: 유전암호의 전사 및 번역 6. DNA의 RNA로의 전사 7. 단백질 합성(유전암호의 번역) 8. 중심원리 9. 유전암호의 번역 10. 유전암호의 돌연변이 11. 돌연변이의 종류 12. DNA 회복 13. 유전자의 조절 DNA(deoxyribonucleic acid). 눈에 보이지도 않는 이 작은 물질은 만물의 영장인 인간을 비롯하여 매우 하등한 박테리아에 이르기까지 생물의 생장과 진화에 엄청난 영향을 끼치는 유전에 있어서의 key이다. 2차 대전 직후 전 세계의 많은 생리학, 결정학, 화학자들의 관심은 DNA의 구조를 밝히는 데 집중되었다. 그 때까지만 하더라도 이들은 .. Biology/생화학 2019. 11. 14. 생화학실험 | DNA purification & DNA Gel Electrophoresis TIP 1. DNA, RNA, Protein 등의 혼합물, RNA, Protein과 같은 contaminants를 제거하여 Pure DNA를 얻는다. 2. 미생물에서 Plasmid DNA를 분리하고 PCR을 이용하여 DNA를 증폭하고, 제한효소를 이용하여 DNA를 절단한 후 Mini gel을 이용하여 전기영동법에 의해 DNA를 분리하고 확인하여 본다. 3. Plasmid DNA를 이용하여 미생물 형질전환을 한 후 미생물 형질전환체를 선별하는 기술까지 분자생물학을 공부하는데 필수적인 실험 기술을 습득한다. Plasmid DNA 분리법 원핵세포에는 염색체 DNA 외에도 작은 DNA가 발견된다. 보통 플라스미드(Plasmid)라 불리는 이들 DNA는 염색체 DNA보다 상당히 작고(4kb~100kb) 스스로 복.. Biology/생화학 2019. 10. 21. 분자유전학실험 | 알칼리 세포파괴 방법에 의한 플라스미드 DNA의 분리 TIP 1. Plasmid DNA 2. Plasmid DNA 분리 3. RNA is structurally very similar to DNA. How can you remove RNA during plasmid isolation? 4. How do you break the cell membranes? 5. What is the role of ethanol in the current experiment? 6. How do you determine the concentration of the plasmid isolated using UV/Vis spectrometry? 7. 실험 기구 및 시약 8. 실험 방법 Plasmid DNA 염색체 밖에 존재하는 DNA이다. plasmid DNA는 그 자체 내에 re.. Biology/유전학 2019. 9. 4. 생체 성분의 화학 | 핵산 핵산의 구조 생물은 유전 정보의 저장과 전달이라는 기본적인 기능을 위해 데옥시리보핵산(DNA)과 리보핵산(RNA)이라는 고분자 물질을 함유한다. 이들 핵산은 유전 정보를 저장 전달하는 것 이외에도 이 정보를 각 세포의 특징적인 단백질로 정확하게 합성하도록 번역하기도 한다. 핵산의 기본 단위를 nucleotide라하며 각 nucleotide는 purine 또는 pyrimidine의 염기, 5탄당 그리고 인산으로 구성되어 있다. 염기와 당으로만 구성된 물질을 nucleoside라 하며 핵산을 부분 가수분해할 때 생긴다. DNA는 당으로 2-deoxy-D-ribose를 함유하고, 염기로는 purine 염기로서 Adenine(A)과 Guanine(G) 그리고 pyrimidine 염기로는 Cytosine(C)과 .. Chemistry/생활 속 화학 2019. 8. 31. 이전 1 다음 반응형