반응형 일반생물학실험 | Chromatography 실험 배경 종이 크로마토그래피에 정지상과 이동상은 무엇이며 분리 원리는 어떤 것인지 혼합색소의 분리를 통해 알아보고, Rf 값을 알아내면서 극성의 개념을 이해한다. 엽록소가 가지고 있는 각각의 색소를 분리해서 확인하고 이들이 흡수하는 파장의 영역에 대해서 알아본다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 시금치에서 잎맥을 제거해서 5g정도 얻는다. 2) 시금치를 막자사발에 넣고 액체질소를 부은 뒤 열심히 간다. 3) 어느 정도 가루가 되었다 싶으면 100%아세톤을 부어 처리한다. 4) 피펫으로 3의 용액을 소형 튜브에 넣고 원심분리기로 3분 동안 7000rpm으로 돌린다. 5) 원심분리 후에 가라앉지 않은 위층의 용액을 피펫으로 따로 분리하고 그 용액을 얼음 속에 넣는다.(엽록소의 파괴를 막기 위해서) 6) 그.. Biology/일반 | 세포 생물학 2024. 3. 18. 일반화학실험 | 얇은 막 크로마토그래피 TIP 시료와 용매의 분배차이를 이용하여 크로마토그래피의 원리를 이해하고 혼합물을 분리할 수 있다. 얇은 막 크로마토그래피 얇은 막 크로마토그래피는 분배 및 흡착 크로마토그래피가 모두 가능하나 보통 흡착에 의한 것을 많이 사용한다. 흡착 TLC의 고정상은 고체흡착제이다. 이 크로마토그래피에 있어서는 먼저 실리카겔 혹은 알루미나와 같은 고체흡착제를 얇게 바른 유리관을 마련해야 한다. 분석 또는 정제하려는 물질의 용액을 만들고 이 용액을 모세관으로 흡착제를 바른 유리관의 하단 근처에 묻혀 반점을 만든다. 이 관을 전개실의 전개 용매에 담그는데 용매의 액면이 반점밑에 오도록 한다. 그러면 용매는 모세관현상에 의하여 관을 따라 위로 올라가게 되고 시료중의 성분물질들은 서로 다른 속도로 이동하게 된다. 이와 같이.. Chemistry/일반화학 2022. 9. 11. 일반화학실험 | 얇은 막 크로마토그래피 TIP 유리판 위에 얇게 실리카 겔을 입힌 정지상과 이동상인 적당한 용매에 대한 시료 성분들의 분해의 차이를 이용하여 혼합물을 분리하는 방법을 얇은 막 크로마토그래피라 한다. 이 실험에서 몇 가지 빛깔이 다른 물감을 예로 하여 크로마토그래피법을 이해할 수 있다. 크로마토그래피(chromatography) 크로마토그래피(chromatography)는 분배평형에 기초를 둔 중요한 분리기술이다. 크로마토그래피의 어원은 chroma로 '색'을 의미하는데, 최초의 크로마토그래피 분리가 색을 지닌물질을 대상으로 행하여졌기에 붙여진 명칭이다. 크로마토그래피의 원리는 용질이 되는 화학종이 이동상(mobile phase)(고정상에 비해 이동하므로)과 고정상(stationary phase)으로 불리는 두 상 사이에서 서로.. Chemistry/일반화학 2022. 9. 2. 일반화학실험 | 얇은 막 크로마토그래피 크로마토그래피는 정지상과 이동상을 이용하여 혼합물의 성분들을 분리하여 분석하는 방법이다. 이 방법은 다양한 화학 합성을 통해 얻어지는 혼합물이나 미지의 혼합물의 성분들을 신속하게 분석할 수 있는 유용한 방법이다. 크로마토그래피의 효율은 정지상과 이동상의 종류에 따라 달라질 수 있으며, 기체 크로마토그래피, 액체 크로마토그래피 등이 많이 쓰이며, 실험적으로 간편하게 사용될 수 있는 것은 컬럼 크로마토그래피 또는 얇은 막 크로마토그래피 등이 있다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 전개시킬 3가지 용액 제조 : diphenyl ether, geraniol, cyclohexanone 각각 10㎖ + ethyl acetate 5㎖ 2) eluting solvent 제조 : hexane + ethyl acetate.. Chemistry/일반화학 2022. 8. 24. 일반화학실험 | 종이 크로마토그래피에 의한 금속 이온의 분리 TIP 크로마토그래피의 원리를 알고, 종이 크로마토그래피를 이용하여 금속 이온들을 분리한다. 종이 크로마토그래피의 전개액은 종이를 적시면서 모세관 작용으로 종이 섬유소를 통하여 이동한다. 전개액 속의 물이 셀룰로오스 표면의 히드록실기와의 수소 결합으로 부착되어 물 자체가 새로운 액체 정지상의 역할을 하게 되며, 여기에 시료 분자가 전개액을 따라서 올라오는 동안 정지상으로써의 물 층과 전개액 중의 유기 용매 간에 분배되며 이러한 분배 정도의 차이에 따라 시료의 분리가 이루어진다. 거름종이 위에 묻힌 혼합물이 이동상인 전개액이 전개되는 동안 각 성분이 분리되는 종이 크로마토그래피는 얇은 층 크로마토그래피와 거의 유사하다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 종이 크로마토그래피 하단 약 1㎝ 정도 위에 연필로 연.. Chemistry/일반화학 2022. 4. 1. 일반화학실험 | 크로마토그래피를 이용한 물질의 분리 크로마토그래피는 혼합물을 이루고 있는 각 성분 물질들이 이동상과 고정상에 대한 인력의 크기가 각각 다르기 때문에 차이가 생겨 분리된다. 크로마토그래피는 화학적 성질이 비슷하여 분리하기 어려운 잉크, 엽록소, 당분, 아미노산, 혈액, 비타민, 효소 등의 각 화합물을 분리하는데 유용하다. 또한 매우 적은 양의 물질들이 섞여있는 혼합물도 간단히 분리 가능하다. 크로마토그래피는 시료의 특징에 따라 통과하는 속도가 다르다는 점을 이용해 시료를 분리해내는 방법이다. 이동상은 시료를 함유한 고정상으로부터 시료를 녹여내는데, 용질이 여기를 천천히 지나가 새로운 고정상에 닿으면, 두 상에 대한 물리적·화학적 상호작용의 정도에 따라 흡착 또는 분리가 일어난다. 고정상이 고체인 경우에는 흡착에 의해, 액체인 경우에는 분배에.. Chemistry/일반화학 2021. 8. 28. 일반생물학실험 | 종이 크로마토그래피를 이용한 광합성 색소의 분리 TIP 시금치 잎에서 추출한 광합성 색소들을 종이 크로마토그래피 법을 이용하여 분리하고 색소의 빛의 흡수를 알아본다. 광합성색소 1. 광합성 색소 들은 가시광선의 특정 파장의 빛을 반사하게 되는 데 이 것이 그 색소의 특정 색을 나타내게 된다. 2. 색소들은 특정 파장의 빛을 흡수하여 에너지를 얻는다. 3. 클로로필이 광합성에 직접 참여. 4. 카로틴 계통의 광합성 색소는 흡수한 에너지를 클로로필에 전달. 5. 카로틴 계통의 광합성 색소는 광산화 반응으로부터 클로로필 보호 6. 카로틴 계통의 색소는 비타민A의 전구체. 7. 스펙트럼의 가시영역의 파장을 흡수하는 분자를 색소라고한다. 모든 파장의 가시광선을 가진 하얀 빛이 색소에 투시되면 빛의 어떤 파장은 흡수된다. 산란되거나 통과되는 나머지 파장으로 인해.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 12. 13. 생화학실험 | β-Galactosidase purification & activity & SDS PAGE TIP 음이온교환 크로마토그래피를 이용하여 우리가 얻고자 하는 β-galactosidase를 분리해낸 후 ONPG와 반응시켜 효소의 활성을 확인하고 SDS-PAGE를 이용하여 정제된 β-galactosidase의 밴드 존재유무와 위치를 알아보는 것이었다. 크로마토그래피(Chromatography) 크로마토그래피는 혼합물로부터 그 성분들을 순수하게 분리하거나 확인, 정량하는데 사용하는 편리한 방법 중의 하나이다. 이 방법에 의한 물질의 불리는 혼합물이 정지상(stationary Phase)이나 이동상(mobile phase)에 대한 친화성이 서로 다른 점을 이용하는 것으로, 이 친화성에 중요한 영향을 미치는 인자는 흡착, 이온화 및 분배계수들로써 여러 종류의 크로마토그래피는 이들 인자가 서로 합하여 작용하.. Biology/생화학 2020. 3. 15. 분자생물학개론 | HPLC of peptides and proteins TIP 1. Basic Theory and Methodology 2. Liqiud Chromatogaphy의 종류 3. High Performance Liquid Chromatography 4. Retention and Bandwidth Relationships 5. Diagram of the retention parameters that describe a chromatographic separation 6. Capacity factor, k' 7. Equilibrium Distribution Coefficient 8. Selectivity Factors(Seperation factor, α) 9. Column Efficiency (N=Theoretical Plate Number) 10. Resolut.. Biology/분자생물학 2019. 12. 8. 기기분석실험 | HPLC - Benzene, Toluene, Xylene의 분석 TIP HPLC의 이론 및 기기조작을 통하여 혼합 액상의 성분을 분석하고 크로마토그래피의 원리를 이용하여 시료의 정량, 정성 분석 방법을 익힌다. 크로마토그래피법은 1903년 러시아의 식물학자 Michael Tswett에 의하여 처음으로 개발되었다. 최초의 크로마토그래피는 탄산칼슘 분말을 채운 유리관에 클로로필과 식물성 염료를 주입하고 석유에테르 같은 용매를 흘려주어 분리하는 형태였다. 크로마토그래피라는 명칭은 그리스어 chroma(색)와 graphien(쓰다)으로부터 유래하였다. 이후 크로마토그래피법은 점차 발전하였으며 1941년에는 영국의 Martin과 Synge에 의해 액체-액체 크로마토그래피법이 확립된다. 최신의 액체 크로마토그래피는 1960년 중반 이후부터 등장하였는데, 이 최신 액체 크로마토그.. Chemistry/기기분석 2019. 11. 28. 유기화학실험 | 액체-고체 크로마토그래피 - 니트로화 반응 TIP 1. 액체-고체 크로마토그래피를 이용하여 Nitro 반응을 알아본다. 2. Rf 값을 통하여 반응전과 반응후의 변화를 알아본다. Liquid-Solid Chromatography 정지상은 관 안에 충진된 대단히 작은 고체 입자들로 만들어져 있고 이동상은 관을 통해 스며들며 고체 입자들의 표면을 통과하는 액체이다. 고쳐 표면은 정전기적 힘과 반데르발스의 힘 결과로 인해 성질이 다른 분자들의 얇은 층을 흡착한다. 흡착의 세기는 고체 표면의 흡착 특성에 따라 다르기 때문에 적절히 선택된 고체는 어떤 혼합물 중의 한 성분을 선택적으로 흡착할 수도 있다. 마지막 장안에서 사용된 선택된 흡착의 중요한 예는 다량의 극성 불순물을 제거하기 위해서 결정화에서 숯을 사용하는 것이다. 묽은 용액으로부터 흡착을 지배하.. Chemistry/유기화학 2019. 11. 6. 이전 1 다음 반응형