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  일반생물학실험 | E.coli의 Transformation TIP E.coli의 trasformation 실험을 통해서 유전 공학에 많이 쓰이는 transformation의 기작을 이해하고, 그 방법을 익힌다. Plasmid Plasmid는 원형의 double-stranded DNA로 chromosomal DNA와는 분리되어 있다. 플라스미드는 박테리아나 효모 혹은 기생이나 공생 관계로 보다 고등 eukaryotic cell들 안에 존재한다. 이것은 수천 base pair서부터 100 kilo base pair까지의 다양한 크기를 갖는다. 염색체 DNA와 마찬가지로 이 플라스미드 DNA도 분열전마다 복제된다. 세포 분열 동안 적어도 하나 이상의 플라스미드가 딸세포 속으로 들어가게 되며, 이런 성질로 인해 plasmid는 세대를 계속해서 숙주 세포 안에 존재할 수.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 5. 1.

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  미생물실험 | 균주 보관법 동결건조법 조작이 저온에서 이루어지므로 열에 약한 물질의 건조법으로 유용하다. 이 방법은 미생물, 의학, 약학방면에서 수분이 많을 때는 불안정하고 또한 열에 극히 민감한 재료(세균, 바이러스, 혈장, 혈청)등을 이 방법에 의해 –10 ～ -30℃의 저온에서 건조시켜 보관하면 상온에서 장기간 보존할 수 있고 물에 대한 용해성이 뛰어난 제품을 얻을 수 있다. 또 식품공업에서 육류, 어류, 야채, 과즙 등을 건조시킬 때 이 방법으로 건조시키면 향, 맛이 남고 천연품에 가까운 인스턴트 음식을 얻을 수 있다. 동결보존시 이용하는 동결보존제는 세포 동결시 세포손상을 막아주는 역할을 하며 이 보존제를 동결배지에 넣어준다. 동결보호제는 세포외액에 얼음결정이 생성될 때 발생하는 삼투압 스트레스로 인한 세포손상을 막아주고.. Biology/미생물학 2020. 4. 19.

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  분자생물학실험 | 대장균의 형질전환 형질전환 Transformation(형질전환)이란 외부 DNA를 host cell(숙주 세포) 내에 넣어주어 세포가 원래의 성질과는 다른 새로운 유전형질을 추가로 얻게 되는 것이다. 모든 종의 세포에서 자연스럽게 일어나는 것이 아니고, DNA 흡수와 결합에 관련된 세포 표현 단백질인 수용성 요소를 가지고 있는 competent cell에서만 transformation 된다. E. coil의 형질전환은 초기에는 발견이 되지 않았으나 bacteria를 차가운 CaCl2로 처리한 다음 잠시 heat shock 하면 bacteriophage λ가 세포 내로 들어가 phage를 형성한다는 사실에 의해 처음 관찰되었다. 이와 같은 처리는 bacteria의 세포막이 DNA가 infection 될 수 있는 compet.. Biology/분자생물학 2020. 2. 14.

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  분자생물학실험 | Midi-preparation of plasmid DNA Midi-preparation mini-preparation 과 실험의 원리가 똑같으나, 실험자가 원하는 gene의 수를 늘리기 위해, 즉 bacteria를 증폭시키기 위해 scale을 늘린 실험. mini-preparation은 5∼10㎍을 준비하는데 비해, midi-preparation은 ∼100㎍정도의 양까지 증폭시킨다. 실험 방법 Step 1 : 선처리 1) inoculate two single well isolated colonies into two 1.5 ㎖ LB+amp (working concentration 50 ㎎/㎖) culture tubes (a colony/clone per tube) 2) incubate for approximately 8 hours at 37℃ with vigor.. Biology/분자생물학 2020. 1. 12.

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  미생물실험 | Biochemical Charcterization - β-galactosidase activity 실험 방법 1. 실험 과정 1) 균의 오염을 막기위해서 무균실에서 실험진행 2) 준비된 평판배지(LB agar)에 균들의 색 차이를 확인하기위해서 펜으로 구역을 나누어준다. 3) 백금선을 알코올램프에 달구어 빨갛게 변할때까지 끝까지 멸균해준다. 4) E.coli를 백금선으로 streak plating 해준다. 5) pGEMT easy vector을 주입한 E.coli 역시 ③∼④을 반복해준다. 6) steak plating 된 평판배지를 뒤집어놓는다. [미생물실험] Biochemical Charcterization - β-galactosidase activity 레포트 1. 실험 기구 및 시약 1.1. 실험 재료 1.1.1. 알코올램프, Pipet, 평판배지, 백금선, 펜 1.1.2. 미생물 : E.co.. Biology/미생물학 2020. 1. 7.

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  식품미생물학실험 | 현미경을 이용한 대장균 관찰 TIP 눈으로 볼 수 없는 미생물 중에 대장균을 현미경을 이용하여 대장균의 형태, 크기, 배열, 움직임, 상태 등을 관찰한다. 표본 제작법과 염색법을 배우고 염색유무에 따른 결과를 보고 차이점을 안다. 단순염색 현미경으로 관찰 할 때 시료에 빛이 투과되어 관찰이 되는데 그 때 염색을 하지 않고 관찰하면 배경과 관찰하는 미생물과 분간이 잘 되지 않아 관찰하기가 쉽지 않다. 그래서 미생물에 염색을 하여 배경과 확실하게 구분해 미생물 관찰을 쉽게 한다. 실험에서 하게 되는 단순염색(simple staining)은 가장 많이 하고 쉬운 방법이다. 세균의 핵산과 단백질은 대부분 음전하를 띄기 때문에 음전하와 강하게 결합하는 염기성 염색약을 쓰면 염색약이 세포벽에 들어가 세포의 음전하 부위와 이온결합을 하여 염색이.. Engineering/식품 영양 | 공학 2019. 12. 31.

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  유전공학실험 | PCR과 Transformation TIP 유전자를 cloning하여 vector에 주입하여본다. 그리고, 대장균에 주입하여 발현 정도를 관찰한다. PCR DNA의 원하는 부분을 복제·증폭시키는 분자생물학적인 기술이다. 이 기술은 사람의 게놈과 같은 매우 복잡하며 양이 지극히 미량인 DNA 용액에서 연구자가 원하는 특정 DNA 단편만을 선택적으로 증폭시킬 수 있다. 또한 증폭에 필요한 시간이 2시간 정도로 짧으며, 실험 과정이 단순하고, 전자동 기계로 증폭할 수 있기 때문에, PCR과 여기서 파생한 여러가지 기술은 분자생물학, 의료, 범죄 수사, 생물의 분류 등 DNA를 취급하는 작업 전반에서 지극히 중요한 역할을 담당하고 있다. 1970년대에 gene cloning기술의 개발은 이전에 불가능했던 방법으로 유전자와 유전자 활성에 대한 연구.. Biology/유전학 2019. 12. 11.

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  미생물학실험 | 생균수 측정 실험(MPN법) TIP 대장균을 이용한 생균수의 측정법과 정의를 알아본다. MPN법(Most Probably Number) 시료에 있는 균수를 최적합수법에 의해 산출하기 위해서이다. 최적합수, Most Probably Number란 통계학적으로 가장 확실한 수치를 말하며 옛날부터 공식적으로 사용하고있는 확률론적 추계방법이다. MPN법은 연속 희석한 일련의 시료를 액체배지가 든 여러 개의 시험관에 접종하고 배양하여 자라는 시험관의 수를 세어 통계학적인 방법으로 시료 속의 미생물 밀도를 결정하는 방법으로써 다중시험관 발효법이라고도 한다. 이 방법에서는 최소한 시료를 3단계까지 연속 희석하는데, 10㎖, 1.0㎖, 0.1㎖, 0.01㎖ 과 같이 순차적으로 10배마다 희석해 각 5개씩 시험관을 가진다. 이렇게 복수 배양한 시험.. Biology/미생물학 2019. 11. 9.

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  일반생물학개론 | 생활속에서 미생물이 미치는 영향 TIP 1. 신문 및 방송 기사를 통한 생활속 미생물 2. 신문 및 방송 기사를 통한 생활속 미생물의 영향 1. 신문 및 방송 기사를 통한 생활속 미생물 ※ 대장균, 살모넬라균, 메르스(MERS) 코로나바이러스, 유산균, 고초균 글로벌 식품안전 위해요인 1위 '미생물' 식약처, 50개국 식품정보 7996건 분석…미생물 21.6% 지난해 세계 주요 국가에서 식품안전 위해요인으로 살모넬라와 대장균 같은 미생물 오염이 가장 많이 발생했던 것으로 나타났다. 25일 식품의약품안전처가 50개국 272개 기관에서 발표한 위해식품 정보 1만5376건 가운데 제품명과 위해사유가 확실한 7996건을 분석한 결과 위해요인으로 식육과 식육가공품, 포장육 등에서 주로 발생한 '미생물 오염'이 1727건(21.6%)으로 가장 많.. Biology/일반 | 세포 생물학 2019. 11. 1.