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  일반생물학실험 | 광합성 색소와 분리 TIP 종이 크로마토그래피를 이용하여 잎에서 색소를 분리하고 각각의 색소의 최대 흡수파장을 측정한다. Rf(Ratio of flow)에 영향을 주는 요인 Rf=특정 색소가 이동한 거리/전개액이 이동한 거리'이다. 종이크로마토그래피의 원리는 전개액에 더 잘 녹는 성분이 더 많이 이동하게 된다는 사실을 이용한 것이다. 여기서 전개액과 색소는 여과지를 통해서 이동하게 되므로 여과지의 성질에 영향을 받게 되고, 온도의 양 또한 얼마나 잘 이동하는지에 영향을 준다. 또한, 시료의 양, 물의 포화정도, 전개용매의 성질도 에 직접적으로 영향을 주는 요인이 될 수 있다. GC의 원리 고정상에 흡착성이 있는 고체의 분말 미립자를 사용하는 기체-고체크로마토그래피와 적당한 비활성 고체분말의 표면에 비휘발성 액체를 보유시킨 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 10. 18.

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  물리화학실험 | 평형상수의 결정 - 물감지시약의 산 해리상수 TIP 본 실험의 목적은 분광광도계를 이용하여 용액중의 화학반응에 관한 평형상수(平衡常數)를 결정하는 것이다. 화학반응은 수용액중의 약산 및 지시약의 해리이다. 평형상수를 결정하는 방법(구하는 방법)은 여러 가지가 있을 수 있으나 정확한 농도를 모르고 가해진 양만 아는 이번 경우에는 흡광도를 이용하여 구할 수 있다. 즉 각각의 pH에 대하여 흡광도를 구하고 그것을 이용한 식과 pH를 그래프로 도시하여 평형상수 를 구하는 것이다. 분광광도법 (Spectrophotometry) 빛의 세기를 측정하는 방법의 하나. 분광측광법 또는 분광분석법이라고도 한다. 측광의 본래 뜻은 눈에 느껴지는 빛의 세기, 즉 시감측광을 가리키는 것이지만, 각종 광학장치의 개발로 열전쌍광전관․광전자증배관 등을 사용하는 광전적 측광이 .. Chemistry/물리화학 2020. 8. 24.

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  일반생물학실험 | Bradford assay를 이용한 단백질(우유)의 정량 - The Bradford Method for Protein Quantitation of Milk TIP 1. 세포를 이루고 있는 생체 거대분자의 존재를 생화학적인 실험 방법을 통해서 확인하고 이들의 양을 정량 하는 기술을 습득한다. 2. 표준 단백질용액(standard protein solution)을 이용하여 단백질 농도 검량선을 작성하고 미지 시료의 단백질 농도를 측정한다. 3. 표준 용액을 이용한 표준 곡선의 작성과 비색정량법을 습득한다. 또한 이 방법들을 이용하여 수용액에 녹아있는 단백질의 양을 Bradford 방법으로 정량한다. 세포를 이루는 분자는 단순한 구조와 기능을 가지고 있는 유기분자들이 모여서 거대분자 (macromolecule)를 형성한다. 세포 내 거대분자는 크게 4 종류로 나눌 수 있다: 단백질 (proteins), 탄수화물 (carbohydrates), 지질 (lipids).. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 8. 9.

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  물리화학실험 | 분광광도법에 의한 화학평형상수의 측정 - Spectrophotometrical Determination of Equilibrium Constants TIP 분광광도법으로 약산인 메틸 레드(methyl red)의 해리상수를 측정한다. 실험 방법 1. 메틸레드 stock solution의 제조 1) 메틸레드 0.439g의 질량을 잰다. 2) 150㎖ 메틸알콜에 메틸레드를 녹인다.(메틸레드가 잘 안 녹으므로 어느 정도 녹인 후 용량플라스크에 넣어 흔든다.) 3) 250㎖용량플라스크에 녹인 용액을 넣고 증류수로 250㎖로 맞춘다. 4) 메틸 레드의 stock solution 제조 : 95% 에탄올 300㎖에 1g의 메틸 레드를 녹인 다음 물로 희석시켜 500㎖로 만든다. 2. 메틸레드 표준용액의 제조 1) 메틸알콜 50㎖에 위에서 제조한 stock solution 5㎖를 가한다. 2) 100㎖ 둥근플라스크에 넣고 증류수로 100㎖로 맞춘다. 3) 메틸 레드.. Chemistry/물리화학 2020. 8. 8.

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  물리화학실험 | 페놀의 pH와 흡수 스펙트럼 TIP 1. pH값을 알고 있는 어떤 완충용액과 묽은 HCl, NaOH 용액에서 페놀과 L-타이로신의 흡수 스펙트럼을 측정하여, 그 결과로부터 양 결합에 대한 페놀성 OH기의 해리에 관한 pKa값을 계산해 본다. 2. 분자의 전자적 바닥상태와 들뜬상태, 약전해질과 양쪽성 전해질, 등전점, 질량 작용의 법칙, Henderson-Hasselbalch식의 개념을 익힌다. 들뜬 상태 & 바닥 상태 1. 전자의 들뜬상태(excited state) 분자가 광자를 흡수하면 분자의 에너지를 증가시킨 상태. 양자역학적 상태 중 에너지가 가장 안정된 상태인 바닥상태를 제외하고 이 보다 에너지가 높은 상태를 모두 가리킨다. 주위에서 일어난 어떤 현상에 의해 원자가 에너지를 흡수했을 때 일어나며, 짧은 시간동안 유지되다가 곧.. Chemistry/물리화학 2020. 7. 25.

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  분석화학실험 | UV-Visible Spectrum측정을 통한 Vitamin tablet의 Fe(Iron)정량분석 TIP 1. 본 실험은 비타민제의 Fe 함량에 대한 정량분석으로, 시중에서 판매되고 있는 종합 비타민제인 센트륨의 Fe 함량에 대해 정량적으로 분석해보는 실험이다. 제조사에서 밝히고 있는 1정당 함량은 18㎎이지만, 분석결과 이에 크게 못미치는 7㎎로 약 38%에 해당된다. 2. UV-spectrum을 통한 농도의 분석은 A=εbc 로 주어지는 beer's Law로 설명할 수 있다. beer's Law는 물질의 흡광도에 관한 식으로, 물질은 물질 고유의 몰 흡광계수(ε)를 갖는다. 흡광도는 몰 농도와 시료의 길이에 의해 영향을 받으므로 여러 농도에서의 흡광도A를 측정하면 정량적인 분석이 가능하다. Preparation of sample 이온상태로 존재하는 Iron은 무색으로 Absorbance를 측정할 .. Chemistry/분석화학 2020. 7. 19.

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  일반화학실험 | 알코올의 함량 분석 TIP 소주의 알코올 함량을 흡광도 측정법으로 분석하고 원리를 이해한다. 소주의 알코올 함량 크롬산(CrO3)이 에탄올에 의하여 붉은색의 Cr(Ⅵ)이 청록색의 불투명한 Cr(Ⅲ)으로 환원되는 반응을 이용해서 에탄올의 농도를 알 수 있다. 에탄올의 양에 따라 환원되는 크롬산의 양이 달라지고 Cr(Ⅲ)의 양에 따라서 용액 색깔의 농도가 달라지기 때문에 흡광도를 측정함으로써 용액속의 에탄올의 농도를 측정하는 것이 가능하다. 실험 방법 1. 소주의 알코올 함량 : 흡광도 측정 1) 검량선 결정 용액 ① 1㎖ 주사기를 이용하여 2%, 18%의 에탄올 수용액을 각 각 1.0㎖ 측정하여 삼각플라스크에 넣는다. ② 위의 삼각플라스크에 10㎖ 메스실린더로 1.0M의 CrO3용액 10㎖를 측정하여 넣고 15분간 방치한다... Chemistry/일반화학 2020. 7. 19.

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  대기화학실험 | 질소산화물 측정 - 수동살츠만법 본 실험은 대기 중의 질소산화물(NO, NO2 등)을 측정하는 방법 중 수동살츠만법을 이용해서 측정하는 실험으로 대기 중 많은 질소들이 고온고압등의 요인으로 NO가 발생하고, NO는 반응성이커서 NO2를 생성하는데, NO2 특성상 냄새가 안좋고 물에 녹아 질산을 생성하여 곳곳에 영향을 끼치기 때문에 실험을 통해서 대기 중의 질소산화물 중 NO2를 농도를 알고자 할 때 이용하는 실험입니다. 즉, 배출가스(연료의 연소가스) 중의 질소산화물(NO2)을 분석, 실험을 통해서 질소산화물 농도를 측정해보는 실험입니다. 실험 방법 1. 흡광도의 측정 1) 분석용 시료용액의 조제 : 발색된 용액(시료 대기 통과 후 상온에서 15분 이내에 완료)을 20분～30분간 방치한 후 분석용 시료용액으로 사용한다. 2) 시료 용액.. Engineering/대기공학 2020. 7. 9.

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  물리화학실험 | 컨쥬게이션 염료의 흡수 스펙트럼 - Carbonium and Related Dyes TIP 1. 몇 개의 대칭 폴리메타인 염료들의 가시광선 흡수 스펙트럼을 측정하고 측정한 스펙트럼을 자유전자 모델을 이용하여 해석한다. 2. UV-Visible Spectromer 측정 원리를 이해하고, 컨쥬게이션 염료의 자외선 가시광선 흡수 스펙트럼 결과를 분석하는 실험이다. 본 실험은 컨쥬게이션 염료의 가시광선 흡수 스펙트럼을 측정하고 측정한 스펙트럼을 자유 전자 모델을 이용하여 해석하는 데 그 목적이 있다. 즉, 어떤 분자 내에서 분자 궤도 함수 내에 있는 전자들은 일정 에너지를 흡수함으로써 그 보다 높은 분자 궤도 함수로 전이를 하게 된다. 이때 흡수하는 에너지의 양에 따라 전자 전이의 정도가 틀려지게 된다. 에너지는 파장과 관련이 있으며 우리가 실험에서 사용하는 UV-Visible (200～700.. Chemistry/물리화학 2020. 6. 21.

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  대기화학실험 | 티오시안산 제2 수은법 염화수소는 자극성이 강한 물질로 생명체에 직, 간접적인 영향을 일으킨다. 대기 중의 염화수소 가스는 물에 쉽게 용해되어 염산이 되기 때문에 산성비의 인자로 작용 한다. 따라서 정부에서는 대기환경기준과 배출 허용 기준으로 이 물질을 관리하고 있다. 본 실험 목적은 대기 오염물질 중의 하나인 염화수소를 정량 측정 하는 것이다. 특히 이 실험은 대기오염 공정시험법에 따른 염화수소 측정법중 흡광 도광법을 사용한다. 흡광 광도법은 시료 중위 염화수소가 티오시안산 제이수은용액과 황산제이철 암모늄용액과 반응하면 특정색의 파장을 나타내는 것을 이용한다. 다시말하면, 시료가스중의 염화수소를 수산화나트륨용액에 흡수시킨후, 티오시안산 제2수은용액과 황산 제2 철암모늄 용액을 가하여 발색시켜, 흡광도(460㎚)를 측정한다. .. Engineering/대기공학 2020. 6. 14.

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  분석화학실험 | 분광 광도법에 의한 비타민 정 중의 철 질량 TIP 1. 비타민 정 중의 철 질량을 분광 광도법에 의해 알아본다. 2. 본 실험에서는 철 표준용액의 흡광도를 측정하여 농도-흡광도 관계를 파악하고, Beer법칙과 standard용액의 농도-흡광도 식을 이용, 비타민 정 중 철을 정량한다. 빛의 흡수에 관하여 색깔을 띠고 있는 물질은 불포화된 결합이 빛을 흡수하므로 색깔을 띠게 된다고 한다. 이와 같은 결합이나 작용기들은 발색단이라 하고 자기 자신은 색을 띠지는 않지만 발색단의 색깔을 내는 힘을 강하게 증가시키는 작용기들은 조색단이라 한다. 이번 실험에서 정량하려는 철의 electron configuration은 1s22s22p63s23d64s2로 d 오비탈이 들뜬상태이므로 UV를 흡수할 수가 있다. 이때 이 발색단의 UV흡수는 대단히 작기 때문에 U.. Chemistry/분석화학 2020. 6. 14.

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  대기화학실험 | 스텍가스 염화수소 - 티오시안산 제2 수은법 TIP 미지 시료의 염화수소를 수산화나트륨 용액에 흡수시킨 후, 티오시안산 제2 수은용액과 황산제2 철암모늄 용액을 가하여 발색시켜, 흡광도(460㎚)를 측정한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 염소이온 표준액, 흡수액을 혼합하여 10㎖씩 100㎖ 메스플라스크에 넣는다 2) 여기에 황산제이철 암모늄 용액 2㎖를 첨가한다 3) 티오시안 제2수은 용액 1㎖를 첨가한다 4) 메틸알콜을 첨가한다 5) 10㎜ 셀에 옮기고 460㎚ 부근의 파장에서 흡광도를 측정한다 6) 대조액으로 흡수액 10㎖를 동일 방법에 의해 시험한다 7) 미지시료를 표준액 대신 넣고 위와 동일하게 시험한다 [대기화학실험]스텍가스 염화수소 - 티오시안산 제2 수은법 레포트 1. 실험 목적 가. 미지 시료의 염화수소를 수산화나트륨 용액에 흡수.. Engineering/대기공학 2020. 6. 8.

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  생화학실험 | Absorption Spectra TIP 분광광도계를 이용한 흡수 스펙트럼을 관찰해 본다. 분광광도계 분광광도계는 크게 광원, 단색화 장치, 검출기로 구성되어 있다. 광원에는 텅스텐 램프(320-2500㎚영역의 복사선), 중수소 아크 램프(200-400㎚영역의 자외선), 글로바(4000-200 의 적외선 복사선), 헬륨-네온 레이저(638㎚), 레이저 다이오드(680-1550㎚의 근적외선) 등이 있다. 단색화 장치는 빛을 각성분 파장으로 분산시키고 좁은 띠의 파장을 선택하여 시료 또는 검출기로 보낸다. 검출기는 광자가 검출기에 도달할 때의 전기 신호가 발생하는 원리를 이용하여 전류의 세기와 복사세기가 비례한다는 사실을 이용하여 흡광도를 측정한다. wavelenght range[㎚] color(absorbed) color observed .. Biology/생화학 2020. 6. 1.

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  일반화학실험 | 지시약의 산 해리상수 - Acid Dissociation Constant TIP 여러 pH의 지시약 용액에 존재하는 지시약의 산성 형태와 염기성 형태의 농도를 Beer-Lambert 법칙을 이용하여 얻어내고 이로부터 지시약의 산 해리상수(KHInd)를 구한다. 산의 이온화평형의 평형상수이며, 산의 세기를 나타내는 척도로 값이 클수록 이온화 경향이 크다. 이온화가 여러 단계인 경우에는 각 단계마다 산해리상수를 나타낼 수 있으며 온도에 의해서만 변한다. 산이온화상수라고도 한다. 산해리상수 값이 클수록 이온화가 잘 되는 것이므로 센산이다. 따라서 Ka 값만 비교하면 된다. 이온화가 여러 단계로 일어나는 경우에는 각 단계마다 산해리상수를 나타낼 수 있다. 예를 들면, 아세트산이 물 속에서 이온화하면 각 성분의 농도가 일정하게 유지되는데, 이 때 산해리상수는 평형상수와 같이 온도에 의.. Chemistry/일반화학 2020. 5. 30.

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  생화학실험 | UV-VIS KMnO4 극대 흡수 파장 측정 TIP UV-Vis의 기기 사용방법을 습득하고 특급 시약으로 조제한 용액의 흡광도를 측정하여 KMnO4의 극대 흡수 파장을 구한다. Beer-Lambert Law 빛의 투광도는 시료의 농도와 특별한 상관관계를 나타내지 않지만 그 로그함수는 다음과 같이 시료의 농도와 일정한 상관관계를 나타낸다. - log T = K×C C : 시료 중의 흡광물질의 농도, K: 상수 위의 식에서 -log T를 흡광도(absorbance,A)라고 함으로 흡광도는 시료의 농도와 특별한 상관관계를 지니게 된다. A = K×C 위의 A = KC의 관계를 Beer's law라고 한다. 하지만 시료의 흡광도는 위에서 설명한 시료중의 흡광 물질의 농도에 의해서만 결정되지 않는다. 즉, cuvette의 직경 또는 폭에 따라서 흡광도는 달.. Biology/생화학 2020. 5. 2.

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  분석화학실험 | Spectrophotometric Measurement of an Equilibrium Constant - 분광광도법에 의한 평형상수측정 TIP Scatchard 도시를 이용하여 시클로헥산에서 요오드와 피리딘 사이의 착물 생성에 대한 평형상수를 구할 수 있다. I2와 I2· 피리딘은 가시선을 흡수하지만 피리딘은 무색이다 요오드의 농도를 일정하게 유지하면서 피리딘의 농도를 여러 가지로 변화시킬 때 수반되는 스펙트럼의 변화를 분석하면서 위 반응의 K를 계산 할 수 있다. 본 실험은 주사할 수 있는 분광광도계가 적합하지만 단일 파장에서도 측정이 가능하다. 실험 방법 (1) 다음의 저장 용액을 준비한다. 1) 0.050～0.055M 피리딘의 시클로헥산 용액 (각자에게 40㎖ 정확히 알려진 농도) 2) 0.0120～0.0125 I2의 시클로헥산 용액(각자에게 10㎖ 정확히 알려진 농도) (2) 25㎖ 메스플라스크 6개에 다음과 같이 저장용액을 피펫.. Chemistry/분석화학 2020. 4. 24.

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  일반생물학실험 | Measure α-Amylase Activity TIP 1. 침에 의한 효소 작용과 그 성분을 유추할 수 있다. 2. Maltose 표준 곡선을 이용하여 침에 들어있는 효소의 양을 구할 수 있다. 표준 곡선 (standard curve, master curve, type curve) 대표적인 여러 모델에 대하여 모델 변수의 변화에 따라서 모델의 반응을 이론적으로 계산한 곡선이다. 표준 곡선은 실제 탐사 자료를 해석하고자 할 때 실제 자료와의 비교를 위해 사용되며 대체적으로 가로축과 세로축은 정규화 된 값으로 만들어진다. 아밀라아제 (amylase) 침 1ℓ 속에는 약 0.4g의 아밀라아제가 들어 있는데, 침이나 위액 속의 아밀라아제는 녹말을 가수분해하여 Maltose를 생성하므로 소화작용에 있어서 꼭 필요하다. 아밀라아제는 고등동물뿐만 아니라, 고등식.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 4. 19.

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  생화학실험 | UV-vis spectrophotometer와 standard curve TIP UV-vis spectrophotometer를 이용해서 시료의 흡광도를 측정하고 그에 따른 Standard curve를 이용하여 미지시료의 농도를 구하기 실험 방법 1. 실험 과정 1) 1mM의 ρ-nitrophenol을 각각 10, 20, 50, 100, 200μM 농도 1mL를 만든다. ρ-nitrophenol(㎕) DW(㎕) 10μM 10 990 20μM 20 980 50μM 50 950 100μM 100 900 200μM 200 800 2) 10μM나 20μM의 경우 10㎕나 20㎕의 피펫팅이 부정확할 수 있으므로 100μM용액에서 100㎕를 에펜 튜브에 넣고 DW 900㎕를 첨가하면 10μM의 시약을 얻을 수 있고, 20μM농도의 시약도 이 방법을 사용해서 제조할 수 있다. 3) 각각 만.. Biology/생화학 2020. 4. 18.