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소박한 실험 노트 - 종합편

일반생물학실험 | DNA 추출과 전기영동 TIP DNA 추출법을 알고, 전기영동의 원리를 이해한다. DNA 추출 1. Plasmid 세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA로, 고리 모양을 띠고 있으며 세균의 생존에 필수적인 유전자는 아니다. 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다. 2. Plasmisd의 특징 ① 복제기점(original of replication)을 갖기 때문에 증식할 수 있다. ② 항생제 내성 유전자(antibiotic resistance gene)을 가져 selection marker로 사용될 수 있다. ③ Multi cloning site(MCS)가 존재.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 5. 1.

일반생물학실험 | Genomic DNA 추출 및 PCR Genomic DNA는 긴 이중사슬로서, 세포의 핵 내에 존재하고 있다. Genomic DNA의 추출은 DNA를 파손시키지 않고, 추출하여 정제도가 높은 DNA를 얻는 것이 중요하며, 정제도에따라 DNA분석에 큰 영향을 미친다. DNA추출 방법 중 하나인 Phenol-Chloroform추출법은 생화학에서 사용되는 liquid-liquid 추출기법이다. 이것은 분자생물학 분야에서 DNA, RNA, 단백질 분리시 많이 사용되는 방법 중 하나이다. 각각 같은 양으로 구성되어 있는 페놀-클로로포름 혼합용액에 액체상테의 샘플을 섞어주면, 두 층으로 분리된 혼합용액이 만들어진다. 이 방법은 1987년 Piotr chomczynski와 Nicoletta Sacchi에 의해 처음 고안되었다. 원심분리에 의해 두 층으로.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 4. 28.

일반생물학실험 | cDNA 합성 및 Real-time PCR을 통한 유전자 발현 분석 TIP 1. 세포들은 기본적으로 주위 환경에 적응하기 위해 필요한 유전자의 발현을 증가시키고, 필요 없는 유전자의 발현은 억제시키는 방법으로 유전자 발현을 조절한다. 2. 동일한 세포를 서로 다른 영양 환경의 배지에서 배양한 후 유전자 발현을 비교하기 위해 cDNA를 합성하고, Real-time PCR을 통해 유전자 발현의 차이를 직접 확인해 보고자 한다. cDNA는 mRNA를 역전사 시켜 만든 DNA 염기서열로, exon만 존재하는 성숙 mRNA에 상보적인 DNA이다. cDNA를 통해 발현된 DNA 염기서열이 무엇인지 파악할 수 있다. Real-time PCR은 PCR 과정이 진행됨과 동시에 증폭되는 DNA 표적서열의 양을 측정하는 실험방법이다. PCR은 중합효소연쇄반응으로, DNA의 표적서열을 선택적.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 2. 14.

일반생물학실험 | 세포막을 통한 물질이동 TIP 세포막을 통한 물질의 이동 현상을(확산, 삼투, 능동수송) 현미경으로 관찰해보고 세포의 생리적인 변화인 삼투 현상을 동물세포와 식물세포를 비교하여 관찰한다. 세포(cell, 細胞) 지구상 대다수 유기체의 기본 구조 및 활동 단위이다. 박테리아 등의 유기체는 단지 세포 하나로 이루어진 단세포 생물이다. 반면, 인간을 포함한 다른 유기체는 다세포이며, 인간의 경우 대략 60조 개 이상의 세포로 구성되어 있다. 세포 이론은 1839년 마티아스 야코프 슐라이덴과 테오도르 슈반에 의해 확립되었다. 이 이론은 모든 유기체는 하나 이상의 세포로 구성되어 있으며, 모든 세포는 기존의 세포에서 출발했고, 모든 생명 활동 역시 세포에 기반하며, 마지막으로 세포는 스스로의 기능을 정의하고 다음 세대로 정보를 넘겨주기.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 2. 13.

일반생물학실험 | 세포의 수분포텐셜 측정 물은 모든 생물이 생존하기 위해서 꼭 필요로 하는 액체이며 이 물의 흡수와 소모(또는 배출) 사이에 균형을 이루는 것이 매우 중요하다. 생물체의 세포에서의 물의 흡수와 방출은 그 양과 방향성이 삼투현상(osmosis)에 의존하게 되는데 이 삼투현상은 수분포텐셜(ψ)의 차이를 원동력으로 하여 일어난다. 수분포텐셜은 위치에너지의 개념으로 설명할 수 있는데 간단히 말해서 물은 수분포텐셜이 낮은 쪽으로 이동하게 된다. 수분포텐셜을 결정하는 세 가지 중요한 요소는 압력(P), 중력(G), 삼투포텐셜(π)로서 다음과 같이 쓸 수 있다. ψ=P+G+π 이 식에서 P는 정수압을 나타낸다. 식물세포는 표면에 단단한 세포벽을 가지는데 이 때문에 세포내에 수분의 양이 증가해서 세포벽을 바깥쪽으로 밀어내는 양의 정수압, 즉 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 11. 24.

일반생물학실험 | 세포의 삼투현상 관찰 TIP 식물세포막의 선택적으로 물질을 투과시키는 반투과성 성질로 인한 원형질의 분리와 복귀를 관찰하고 삼투현상을 이해한다. 삼투현상이란 농도가 다른 두 용액이 세포막과 같은 막을 경계로 하고 있을 때, 농도가 낮은 용액의 물이 막을 통해 농도가 높은 쪽으로 순이동이 일어나는 현상이다. 이때 물의 확산은 잉크 및 담배연기의 확산과는 다르다. 세포막이 물 이외의 물질에 대하여 수송 기능을 가질 때에는 선택성을 나타낸다. 어떤 물질은 거의 간섭없이 쉽게 통과할 수 있는 반면, 다른 물질은 통과가 되지 않거나 투과의 수월성에 정도의 차이가 있게 된다. 이와 같은 막의 성질을 선택투과성이라 한다. 이런 삼투현상의 예로서 식물의 뿌리털이 물을 흡수하는 현상을 들수있는데 뿌리털을 이루는 세포의 원형질은 흙 속의 물보.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 11. 17.

일반생물학실험 | 확산과 삼투현상 - 막투과성을 이용한 확산과 삼투압 TIP 1. 확산, 삼투현상의 원인을 알고 분자량과 농도 기울기가 확산과 삼투현상에 미치는 영향에 대하여 설명할 수 있다. 2. 셀룰로오스막을 이용한 확산현상을 관찰하고 확산의 의미에 대해 이해한다. 확산 - 물질들은 지속적으로 세포의 안과 밖으로 이동한다. - 원형질막이 가진 선택적 투과성은 일부 물질만 투과시키고 다른 물질은 투과시키지 않는다. - 원형질막을 통과해서 이동하는 물질들은 수동수송과 능동수송이라는 두 가지 방법에 의해 이동한다. 1. 수동 수송 일반적으로 확산 이라고 하며 세포의 에너지 소비가 요구되지 않는다. 분자들은 높은 농도애서 더 낮은 농도 쪽으로 농도 기울기에 의하여 분자의 지속적으로 계속되는 불규칙한 운동에 의하여 이동한다. 또한, 확산은 동일한 종류의 분자가 고농도 영역에서 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 8. 31.

일반생물학실험 | Bradford assay를 이용한 단백질(우유)의 정량 - The Bradford Method for Protein Quantitation of Milk TIP 1. 세포를 이루고 있는 생체 거대분자의 존재를 생화학적인 실험 방법을 통해서 확인하고 이들의 양을 정량 하는 기술을 습득한다. 2. 표준 단백질용액(standard protein solution)을 이용하여 단백질 농도 검량선을 작성하고 미지 시료의 단백질 농도를 측정한다. 3. 표준 용액을 이용한 표준 곡선의 작성과 비색정량법을 습득한다. 또한 이 방법들을 이용하여 수용액에 녹아있는 단백질의 양을 Bradford 방법으로 정량한다. 세포를 이루는 분자는 단순한 구조와 기능을 가지고 있는 유기분자들이 모여서 거대분자 (macromolecule)를 형성한다. 세포 내 거대분자는 크게 4 종류로 나눌 수 있다: 단백질 (proteins), 탄수화물 (carbohydrates), 지질 (lipids).. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 8. 9.

일반생물학실험 | 동물세포와 식물세포의 관찰 TIP 1. 모든 생물체의 생명현상이 일어나는 가장 기본적인 단위인 세포의 구조를 살피고, 동식물 세포의 차이점을 알아본다. 2. 세포를 현미경으로 잘 관찰하기 위해 사용되는 염색의 원리를 알아본다. 3. 동물세포인 구강상피세포와 식물세포인 양파표피세포를 관찰하여 세포의 구조를 관찰하고 동물세포와 식물세포의 차이점을 알아본다. 동․식물세포의 공통점과 차이점 세포구조 식물세포 동물세포 세포막 있다 있다 핵막 있다 있다 염색체 여러개, 길쭉함 DNA+히스톤단백질 여러개, 길쭉함 DNA+히스톤단백질 엽록체 있다 없다 미토콘드리아 있다 있다 세포벽 주성분: 셀룰로오스 없다 액포 잘 발달 발달 미약 중심체 없다 있다 리보솜 있다 있다 실험 방법 1. 식물세포 관찰(양파표피세포) 1) 면도칼을 사용하여 5㎟의 크기.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 7. 7.

영양생화학실험 | 혈중 콜레스테롤 측정 콜레스테롤의 기능 1. 담즙산의 전구물질이 되는데, 담즙산은 십이지장으로 배설되며, 음식물 속의 지질을 유화시켜 그 흡수를 돕는다. 2. 여러 가지 스테로이드 호르몬의 전구물질이 되어, 당질 대사와 전해질의 조절, 생식기능의 조절 등 생체에서 중요한 기능을 한다. 3. 비타민 D의 전구체이다. 4. 생체막, 특히 세포막의 구성성분이고, 세포의 구조를 유지함과 동시에 막의 유동성을 조절하며, 막의 안팎으로의 물질 투과기능에 관여한다. 5. 부신이나 생식기에서 합성된 콜레스테롤은 주로 그 장기에서 일어나는 스테로이드 호르몬 합성에 쓰이며, 간장의 콜레스테롤은 80%가 담즙산이 되고, 나머지는 혈액속으로 들어가 여러 장기로 운반된다. 콜레스테롤의 수치를 낮추는 방법 혈액중의 콜레스테롤 수치를 낮추는 주요방법은.. Engineering/식품 영양 | 공학 2020. 4. 29.

미생물실험 | 균주 보관법 동결건조법 조작이 저온에서 이루어지므로 열에 약한 물질의 건조법으로 유용하다. 이 방법은 미생물, 의학, 약학방면에서 수분이 많을 때는 불안정하고 또한 열에 극히 민감한 재료(세균, 바이러스, 혈장, 혈청)등을 이 방법에 의해 –10 ～ -30℃의 저온에서 건조시켜 보관하면 상온에서 장기간 보존할 수 있고 물에 대한 용해성이 뛰어난 제품을 얻을 수 있다. 또 식품공업에서 육류, 어류, 야채, 과즙 등을 건조시킬 때 이 방법으로 건조시키면 향, 맛이 남고 천연품에 가까운 인스턴트 음식을 얻을 수 있다. 동결보존시 이용하는 동결보존제는 세포 동결시 세포손상을 막아주는 역할을 하며 이 보존제를 동결배지에 넣어준다. 동결보호제는 세포외액에 얼음결정이 생성될 때 발생하는 삼투압 스트레스로 인한 세포손상을 막아주고.. Biology/미생물학 2020. 4. 19.

분자생물학실험 | RNA Isolation and analysis TIP 세포에서 RNA를 추출하기 위해서 RNA를 RT–PCR 하여 cDNA 상태로 만들고 cDNA를 PCR 하여 sample을 loading 하고 band를 확인하기 위함이다. RNA 추출 원리 포유세포는 보통 한 세포 당 10-5㎖ RNA를 포함하고 있으며 이 중 80∼85%가 rRNA, 15∼20% 가 tRNA, 1∼5%가 mRNA로 이루어져 있다. 리보솜 RNA나 tRNA 등은 일정한 크기와 염기서열을 가 지고 있기 때문에 전기영동, 초 원심 분리 및 크로마토그래피에 의해 순수하게 분리할 수 있는 반면, mRNA는 크기도 다양하고 많은 종류가 혼합되어 있기 때문에 한 종류의 mRNA를 순수 분리하기가 쉽지 않다. 그러나 진핵세포 mRNA는 3말단에 poly(A)를 가지고 있기 때문에 리보솜 RNA.. Biology/분자생물학 2020. 2. 10.

생화학개론 | 세포에 존재하는 분자 TIP 1. 작은 분자는 에너지를 운반하고, 신호를 전달하며, 큰 분자로 결합된다 2. 단백질은 세포 구조를 이루며, 세포가 하는 대부분의 일을 담당한다. 3. 핵산은 적절한 시간과 적당한 장소에서 단백질을 만들 수 있는 암호화된 정보를 갖고 있다. 4. 유전체는 염색체에 모여 있고, 세포분열 동안 복제된다. 5. 돌연변이는 유익하거나 유해하거나 또는 영향이 없을 수도 있다. Molecular cell biologist (분자 세포 생물학자)는 cell의 두드러진 특성을 분자 수준에서 연구한다. 예를 들어, 큰 molecule의 조립 (assembly), 큰 molecule 상호 간의 결합, 특정 chemical reaction (화학 반응)을 촉진하는 catalytic effect (촉매 효과), 그리.. Biology/생화학 2019. 12. 19.

생화학개론 | 세포의 다양성과 공통성 TIP 1. 세포로 시작되는 생명 2. 세포의 다양성과 공통성 세포로 시작되는 생명 인체를 형성하는 cell(세포)도 human(인간)처럼 성장하고 번식하며 정보를 처리하고 자극에 반응 하며 일련의 화학 반응을 수행하는데, 이러한 능력을 생명이라고 정의한다. Human을 포함한 multicellular organism(다세포 생물)은 10 억 또는 1 조개 정도의 cell을 가진 복잡한 구조로 이 루어져 있는 반면, 하나의 cell로 구성되어 있는 생물도 있다. 그리고 단순한 unicellular organism(단세포 생물)도 이러한 생명 현상을 대표하는 모든 특징을 가지고 있기 때문에 cell을 생명체의 기본 단위로 간주하고 있다. 21 세기에 이르러 cell의 구성, 구조 및 상호 작용에 관한 홍수.. Biology/생화학 2019. 12. 16.

일반생물학실험 | 원핵생물 현미경 관찰 - 미생물 : 그람염색(Gram Staining +,-) TIP 1. 세포는 모든 생물의 기능적, 구조적 기본 단위이다. 원핵 세포를 가진 세균들을 미생물 감별염색법 중 하나인 그람염색을 통하여 그 원리와 방법을 이해하고 그람양성균과 음성균의 판정을 내린다. 2. 현미경의 원리, 종류, 사용법을 익힌다. 3. 미생물의 관찰 및 형태학적 특성을 알아본다. 4. 미생물의 염색의 목적과 원리를 알아본다. 5. 염색방법의 종류와 특징을 알아본다. 그람 염색(Gram Staining) 세균학에서 가장 많이 쓰이는 염색방법이며, 염색 과정에서 가장 중요한 것은 1차 염색의 탈색이다. 그람 염색 결과 자주색으로 염색되는 세균의 경우 그람양성균이며, 분홍색으로 염색되는 세균은 그람음성균이다. 이 때 양성과 음성은 전기적인 성질과는 관련 없으며 형태학적인 차이를 나타낼 뿐이다.. Biology/일반 | 세포 생물학 2019. 11. 5.

일반생물학실험 | Osmosis and Plasmolysis - 삼투압과 원형질분리 TIP 1. 삼투압에 따른 세포의 변화를 관찰해보고, 삼투압이 생명에 미치는 영향에 대해 생각해 본다. 2. 식물세포, 동물세포의 각각 등장액, 저장액, 고장액에서 삼투현상에 의한 변화의 모습을 관찰한다. 그리고 세포벽의 유무에 따른 결과를 이해한다. 생명의 기본 단위인 세포(cell)는 그의 생존에 필요한 구조와 분자 구성물을 포함하고 있으며 이 안에서 세포는 원료를 취하고 에너지를 추출하고, 그 자체의 분자를 합성하고, 유기적 형태로 생장하고, 환경으로부터의 자극에 반응하며, 스스로 증식하게 된다. 이러한 정교한 생명 과정이 일어나기 위해서 생명에 필수적인 물질은 지속적으로 흡수하고 대사 노폐물은 방출하는 작용이 필요하다. 이렇게 세포에서 방출되거나 흡수되는 물질은 원형질막(plasma membran.. Biology/일반 | 세포 생물학 2019. 10. 6.

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