반응형 일반생물학실험 | 효모의 발효 효모의 호흡산소와의 접촉이 있기 때문에 효모 중 일부는 유기호흡을 한다. 그리고 산소와의 접촉이 없는(산소는 물에 거의 안 녹으므로 효모 현탁액에도 잘 녹지 않는다. 게다가 저어주지 않는다.) 내부에서는 무기호흡인 알콜 발효가 일어난다. 그런데 유기호흡해서 발생한 이산화탄소는 시험관 내부로 들어오지 않고 밖으로 빠져나간다. (표면에서만 산소와 접촉하므로 표면에서만 유기호흡 할 것이다.) 그래서 발효로 인해 발생한 이산화탄소와 가는 곳이 달라 발효량 측정에 영향을 주지 않는다. 실험 방법1. 실험 과정1) 효모 현탁액과 탄수화물 용액을 준비한다. 2) 8개의 시험관에 효모현탁액을 3㎖씩 넣는다. 3) 2개씩 증류수, 포도당 용액, 설탕 용액, 녹말 용액 3㎖넣는다. 4) 시험관 속의 내용물을 파이펫.. Biology/일반 | 세포 생물학 2024. 6. 20. 일반생물학실험 | 여러 조건에 따른 효소 반응 TIP pH변화, 온도, 기질의 농도에 따른 효소 반응을 비교해본다. 효소 효소란 생체 내의 화학반응을 매개하는 단백질 촉매이다. 특정 반응물과 결합하여 활성화에너지를 낮춰 반응을 촉진하는데, 효소와 결합하는 반응물을 기질이라고 하고 효소에서 기질과 결합하는 특정 부분을 활성부위 또는 기질결합 부위라고 한다. 효소의 활성부위에 기질이 결합하여 효소`기질 복합체를 형성하고 반응 결과 생성물이 만들어지면 효소는 생성물과 분리되어 또 다른 반응에 참여한다. 기질의 입체구조와 효소의 활성부위가 맞아야만 결합하여 반응할 수 있으므로 한 종류의 효소는 주로 한 종류의 기질에만 작용한다. 이러한 효소의 성질을 기질 특이성이라고 한다. 효소의 작용에는 여러가지 것들이 영향을 미친다. 우선 효소 는 단백질 촉매이므로 단.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 12. 1. 화공생명공학기초실험 | 염색체 DNA의 정제 및 분석 TIP 박테리아로부터 염색체 DNA를 분리, 정제 하는 과정에서 각 시약과 Enzyme의 작용과 실험과정을 이해하고 PCR과 전기영동법에 대해 알아보며 장치의 조작 방법을 습득한다. DNA는 생명체의 모든 유전정보를 가지고 있는 하나의 거대한 정보저장물질이다. 이러한 DNA를 분석하기 위해선 다량의 DNA를 확보하는 기술이 중요한데 1984년 Kery M㎕lis에 의해 PCR이라는 방법이 도입된 이래 원하는 부분만큼의 DNA부분을 증폭시킬 수 있는 기술이 확보 되었다. 본 실험에서는 DNA를 정제하여 PCR을 이용해 다량 증폭시키고 Agarose gel 전기영동법을 이용하여 DNA를 분석해본다. 실험 방법 1. 세포에서의 DNA추출 1) OD가 1.0이 조금 넘은 배양 세포를 마이크로 튜브에 넣고, 10.. Engineering/화학생물공정 2022. 10. 2. 세포생물학실험 | pH 변화에 따른 Enzyme의 Activty 실험 방법1. Buffer 용액제조1) 먼저 KH2PO4와 K2HPO4를 각각 50mM 80㎖를 제조한다. ➀ 시약스푼을 사용하기 전 알코올로 소독한 뒤 종이타월로 닦아준다. ➁ KH2PO4 0.55g 을 저울로 측정한다. 한번 꺼낸 시료는 다시 담지 않는다.➂ 비커와 실린더를 사용하기 전 D.W 로 세척 한다. ➃ 100㎖ 실린더에 80㎖ 의 D.W를 담고 비커에 옮겨 담는다. ➄ 비커에 80㎖용량을 눈금으로 표시한 후 실린더에 적정량을 덜어놓는다.➅ 비커에 KH2PO4시료를 넣고 D.W로 시료용지에 남은 시료까지 비커에 넣는다. ➆ 덜어둔 d.w를 이용하여 비커의 눈금을 맞춰준다.➇ 알코올로 소독한 유리막대를 이용하여 섞어준다. 2) 각각 용액을 40㎖로 나눈 뒤 pH meter를 이용하여 pH5와 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 4. 27. 일반생물학실험 | 효소 반응 TIP 카탈라아제 효소를 pH, 온도, 기질 용액을 변화함으로써 효소의 반응 영향을 미치는 요인을 확인하여본다. 효소(Enzyme) 각종 화학반응에서 자신은 변화하지 않으나 반응속도를 빠르게 하는 일종의 단백질 촉매를 말한다. 효소가 필요한 이유는 생물체가 살기 위해 필요한 화학반응을 낮은 온도에서 빠르게 할 수 있어, 활성화 에너지를 낮추기 때문이다. 여기서 활성화 에너지란 어떤 화학 반응을 일으키기 위해 반응물에 공급해야 하는 최소 에너지를 의미한다. 효소를 이용한 화학반응은 에너지가 단계적으로 조금씩 나오도록 조절하여 에너지 이용의 효율성뿐만 아니라 안전성까지 갖추고 있다. 즉, 효소는 활동의 핵심 요소이다. 만약 효소가 없다면 호흡 한번 하는데, 혈액이 응고 하는데, 소화 한번 하는데 엄청난 시간.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 9. 14. 일반생물학실험 | 효소의 활성 TIP 유기촉매인 효소의 개념에 대해 이해하고, 아밀라아제를 사용하여 효소의 활성에 미치는 pH와 온도의 영향에 대하여 알아본다. 실험 방법 1. pH에 의한 영향 1) 기질 1% starch soluble 2㎖에 각 buffer 2㎖를 가한다.(control, pH4, pH7, pH10) 2) 적당히 희석된 효소액(amylase)1㎖을 넣어서 잘 섞는다. 3) 반응 정지제로서 acetic acid 1㎖를 넣어서 잘 섞는다. 4) 요오드 용액 한 방울을 넣어서 발색반응을 시킨다. 5) 결과 관찰 2. 온도에 의한 영향 1) 기질 1% starch soluble 2㎖에 적당히 희석된 효소액(amylase) 1㎖를 넣는다. 2) 0℃, 37℃, 80℃에 30min간 반응시킨다. 3) 반응 정지제로서 acet.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 9. 13. 일반생물학실험 | 효소의 활성 효소는 세포에서 만들어지는 단백질성의 생체촉매이다. 효소에 의해 촉매 되는 화학반응을 효소반응이라고 하지만 생체 내의 화학반응은 거의 모두가 효소반응이고, 물질대사는 모두가 효소계에 의존하고 있다.효소는 단백질이기 때문에 각종 외적 조건의 영향을 받아서 활성이 변화한다. 고온에 의한 단백질변성으로 불활성화하기도 하고, pH 등의 변화에 의해 활성에 변화를 일으킨다. 또한 활성부위에 결합하는 물질에 의해 활성의 저해가 일어나지만, 작용물질과 특이적으로 결합하는 부위가 활성부위 이외에도 있으며 이 결합에 의해 활성이 높아지거나, 저해되기도 한다. 이것은 생체에서의 대사조절에 큰 의미를 갖는다. 실험 방법 1. 기질의 농도가 효소 활성에 미치는 영향 1) 10개의 튜브를 준비한다. 2) 튜브에 버퍼를 각각 2.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 9. 12. 일반생물학실험 | 아밀라아제의 활성과 온도 TIP 아밀라아제의 온도와 소화 효소의 관계를 실험해본다. 아밀라아제 소화효소(amylase) 녹말에 침을 섞어 따뜻하게 하면 아이오딘반응이 일어나지 않는데, 그 이유는 침 속의 아밀라아제의 작용 때문이다. 침 1ℓ 속에는 약 0.4g의 아밀라아제가 들어 있는데, 침이나 위액 속의 아밀라아제는 녹말을 가수분해하여 말토스를 생성하므로 소화작용에 있어서 꼭 필요하다. 아밀라아제는 고등동물뿐만 아니라, 고등식물·곰팡이·세균 등 자연계에 널리 분포한다. 다카미네[高峰讓吉]는 누룩곰팡이가 배양액에 다량의 아밀라아제를 분비한다는 것에 착안하여 타카디아스타아제(takadiastase)라고 하는 소화제를 만들었다. 또 어떤 종의 곰팡이의 아밀라아제는 녹말을 거의 완전히 가수분해하여 포도당(글루코스)으로 변화시키므로 포.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 28. 일반생물학실험 | 효소의 활성 측정 TIP 1. pH의 변화에 따른 효소의 반응속도를 비교하고 최적의 pH를 알아낸다. 2. 온도변화에 따른 효소의 반응속도를 비교하고 최적의 온도를 알아낸다. 효소(enzyme) 일반적으로 화학반응에서 반응물질 외에 미량의 촉매는 반응속도를 증가시키는 역할을 한다. 생물체 내에서 일어나는 화학반응도 촉매에 의해 속도가 빨라진다. 특별히 생물체 내에서 이러한 촉매의 역할을 하는 것을 효소라고 부르며 단백질로 이루어져 있다. 단백질로 이루어져 있기 때문에 무기촉매와는 달리 온도나 pH(수소이온농도) 등 환경 요인에 의하여 기능이 크게 영향을 받는다. 즉, 모든 효소는 특정한 온도 범위 내에서 가장 활발하게 작용한다. 대개의 효소는 온도가 35∼45℃에서 활성이 가장 크다. 하지만 온도가 그 범위를 넘어서면, .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 6. 29. 일반생물학실험 | 기질농도에 따른 효소의 반응속도 어떤 물질들이 생명체내에서 동화와 이화작용을 통하여 분해하거나 분해된 물질로부터 새로운 물질을 만들어내는 화학반응을 일으키는 과정을 물질대사라 한다. 이 물질대사가 원활하게 생체내에서 움직일 수 있도록 도와주는 촉매와 같은 가장 중요한 역할을 하는 작용을 효소(enzyme)라 부르며 호르몬, 비타민 등도 관여하고 있다. 효소는 화학반응을 촉매 할 수 있는 특수한 단백질로 되어있다. 또한 물리, 화학적 성질을 가지는데 분자량이 작은 것은 10,000 dalton 정도며, 큰 것은 1,000,000 dalton을 넘는 것들도 있다. 효소 중에는 열에 약하며, 비단백질성 유기화합물이 있어야 활성을 찾는 아포효소와 보조인자가 복잡한 유기화합물인 조효소가 있는데 이들이 촉매작용을 통하여 완전한 효소분자가 되었을 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 2. 23. 일반생물학실험 | 촉매와 효소반응 TIP 1. 화학 반응을 촉진시키는 촉매와 효소의 기능적인 공통점을 이해하고 전분 가수분해 효소인 아밀라아제(amylase)를 이용하여, pH, 효소농도 및 기질농도에 따른 효소활성의 변화를 알아 본다. 2. 효소 반응을 이해하고 전분 가수분해 효소인 α-amylase의 활성이 pH 조건에 따라 어떤 영향을 받는지 조사하고, 최적 조건을 알아본다. 효소 효소는 생물학적인 촉매로 화학 반응을 촉진시키는 물질이다. 촉매란 자신은 변하지 않으면서도 화학반응 속도를 빠르게 또는 느리게 하는 작용을 하는 물질로서 효소와 기질(반응 물질)의 복합체를 형성함으로써 기질 분자의 구조를 변화시킬 수 있는 활성화 에너지를 갖는다. 화학반응과 활성화 에너지 화학반응의 속도는 반응물이 어느 정도의 에너지를 받아 활성화되는 활.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 6. 3. 생화학개론 | 효소의 고정화(고정화 효소) TIP 1. 효소의 특성 2. 효소의 구조 3. 효소의 분류 4. 효소의 작용 5. 의학 및 산업적으로 활용되는 효소의 종류 6. 효소의 대규모생산 7. 고정화 효소의 특성 8. 고정화 효소를 이용함에 있어서의 장․단점 9. 고정화 효소의 제조 방법 10. 고정화 효소의 산업적 이용 생체촉매인 효소는 하나의 단백질이기 때문에 일반적으로 열, 강산, 강알칼리나 유기용매 등에 의하여 쉽게 활성을 잃는다. 이렇게 변성되기 쉬운 효소를 인위적으로 만든 외부 환경에서 이용하는 것은 세심한 주의를 필요로 한다. 효소의 고정화(enzyme immobilization)란 효소를 화학적인 방법이나 물리적인 방법에 의해 인위적으로 그 이동성을 제한하는 것을 말한다. 실제로 생체 내에서는 수천 가지의 효소가 세포막, 세포 .. Biology/생화학 2020. 4. 25. 생화학실험 | Enzyme assay TIP 340㎚에서의 NADH 흡광도 변화를 통해 LDH 활성도를 확인 할 수 있다. Enzyme 각종 화학반응에서 자신은 변화하지 않으나 반응속도를 빠르게 하는 단백질을 말한다. 즉, 단백질로 만들어진 촉매라고 할 수 있다. 단백질로 이루어져 있기 때문에 무기촉매와는 달리 온도나 pH(수소이온농도) 등 환경 요인에 의하여 기능이 크게 영향을 받는다. 즉, 모든 효소는 특정한 온도 범위 내에서 가장 활발하게 작용한다. 대개의 효소는 35∼45℃에서 활성이 가장 크다. 하지만 온도가 그 범위를 넘어서면, 오히려 활성이 떨어진다. 온도가 올라가면 일반적으로 화학반응 속도가 커지고 효소의 촉매작용도 커지지만, 온도가 일정 범위를 넘으면 효소의 단백질 분자구조가 변형을 일으켜 촉매기능이 떨어지기 때문이다. 또한.. Biology/생화학 2020. 4. 14. 일반생물학실험 | 카탈라아제 효소 TIP 우리 몸의 생체 촉매인 효소의 기작에 대해 이해하고, 시료에 따라 다르게 나타나는 효소의 반응에 대해 알 수 있다. 또한 온도가 효소의 활성에 어떤 영향을 미치는지 알아본다. 효소의 역할 효소는 생체의 에너지 발생 반응, 단백질 합성, 근수축, 난자와 정자의 형성, 세포 분열, 유전자 복제 등 모든 생명 현상을 매개한다. 효소는 우리 일상생활과도 대단히 밀접한 관계가 있다. 술은 효모에 의한 발효로 얻어지지만 실은 효모의 효소에 의하여 이루어지는 것으로 이 효소만 있으면 발효가 일어나 술을 빚을 수 있다. 효소는 세제로도 이용되고 있고, 요즘 각광받는 유전공학도 여러 효소에 의해 가능하다. 또한 혈당량 측정 등 각종 시약에도 이용된다. 효소는 기질과 결합하여 기질을 산화 (oxidase) 또는 환.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 3. 26. 면역학실험 | ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent assay) TIP 1. 실험을 통해 ELISA가 어떻게 수행되어지고 진단 테스트에 적용되는지 배운다. 2. antigen-antibody, receptor-ligand, enzyme-substract 간의 특정한 protein-protein interaction에 대해 이해할 수 있다. ELISA 효소면역측정법이라 불리는 ELISA는 sample에서 antibody나 antigen의 존재를 찾는데 사용되는 생화학적 방법이다. antigen-antibody 반응을 enzyme 표지를 이용하여 enzyme에 대한 substrate를 첨가하여 antigen-antibody 결합체에 붙은 enzyme의 양을 enzyme이 substrate에 대해 작용하여 발색반응이 일어난 정도를 분광 광도계로 측정함으로써 정량하는 방법이.. Biology/면역학 2019. 11. 29. 일반생물학실험 | 환경에 따른 Amylase 활성도 TIP Amylase가 어떤 온도와, 어떤 pH에서 활성도가 가장 높은지 안다. Enzyme 생명체 내부의 화학 반응을 매개하는 Protein 촉매이다. Enzyme은 Temperament와 결합하여 Enzymesubstrate complex(효소-기질 복합체)를 형성함으로써 반응의 활성화 에너지를 낮추는 촉매 역할을 한다. 각 종류의 eb의 이름은 대개 '-ㅔ이스(-ase)'로 끝난다. Enzyme은 Temperament에 대한 특이성을 가지고 있으며, 일반적으로 상온에서 체온 정도의 온도와 중성 pH에서 잘 작동한다. 하지만 특이한 생명체의 Enzyme들은 극한 조건(예: 섭씨 72도, pH 2의 강한 산성 상태 등)에서도 작동할 수 있다. Enzyme은 촉매하는 반응의 종류와 반응하는 Tempera.. Biology/일반 | 세포 생물학 2019. 11. 19. 생물학개론 | 효소의 일반적 성질(General Properties of Enzymes) TIP 1. 촉매 작용 2. 조효소 3. 삼점 부착 4. 효소의 특이성 5. 효소 활성의 측정 6. 효소의 분리 7. 효소의 세포내 분포 8. Isozyme 촉매 작용 촉매는 화학 반응을 촉진시킨다. 촉매는 한 반응에 개입하고 그 반응 과정 중 물리적인 변화를 받지만 반응이 완료되면 원상태로 돌아간다. 효소는 생물계에서의 화학 반응에 대한 단백질 촉매이다. 생세포에서 대부분의 화학 반응은 효소에 의한 촉매에 의하지 않으면 매우 늦게 일어날 것이다. 비단백성 촉매(H+, OH-, 또는 금속 ion)와는 대조적으로 각 효소는 소수의 반응, 흔히 단 하나의 반응만을 촉매할 뿐이다. 그러므로 효소는 반응에 특이적인 촉매이다. 모든 생화학적 반응이 효소에 의하여 촉매되므로 많은 여러 가지 효소가 존재해야 한다. .. Biology/일반 | 세포 생물학 2019. 10. 13. 생체 성분의 화학 | 효소 효소의 작용 화학반응에서 자기 자신은 화학 변화를 일으키지 않고 화학 반응만 촉진시키는 물질을 촉매라고 부른다. 효소(enzyme)란 생물체 내에서 일어나는 여러 반응을 촉진하는 유기촉매이다. 이것은 생물이 체내에서 계속 합성하는 단백질로서 생물학적 활성을 갖고 있다. 효소란 그리이스어의 ‘in yeast'에서 온 말이며 발효와 관계 있다. 현재 알려져 있는 효소는 수천 종에 달하고 있으며 ribonuclease, trypsinogen, lysozyme 등 몇 종류의 효소는 화학구조도 확인되고 있다. 효소는 기질(substrate)에 작용하여 두 가지 이상의 물질로 분해하며, 같은 물질에도 작용하는 효소가 달라짐에 따라 다른 생성물이 생긴다. 효소의 화학 작용을 그림으로 표시하면 [그림 5]와 같다. 예.. Chemistry/생활 속 화학 2019. 8. 28. 이전 1 다음 반응형