반응형 미생물학실험 | Gram-Stain TIP 여러 미생물을 가지고 그람염색을 해본 후 그람음성도에 따라 분류 해 보자. Gram-Stain 세균이나 효모를 동정하고 분류하는 염색 방법으로 1884년 덴마크의 의사 한스 크리스찬 그람이 고안했다. 세균은 그 고정 표본을 Crystal violet, gention violet으로 염색하고, lugol solution으로 처리 한 후 순 에틸 알코올로 탈색조작 하였을 때 탈색되지 않는 균군(gram양성균)과 탈색되는 균군(gram음성균)으로 구별된다. 계속하여 옅은 safaradine sol또는 fuchisin sol로 대비염색하면 전자는 그대로 자색, 후자는 후염색에 의해 적색으로 염색된다. 이것은 세포표면 특히, 세포벽의 화학구조의 차이에 의한 것이다. 그람양성균과 그람 음성균 사이에서 화학적.. Biology/미생물학 2022. 8. 2. 미생물학실험 | 그람 염색법 TIP 분별염색 기법의 한 종류인 그람염색 방법을 익히고 그람염색 방법의 원리를 알 수 있다. 그람양성균과 그람음성균을 구분할 수 있다. 그람염색법은 미생물을 관찰하기 위해 사용하는 염색법이다. 그람염색은 미생물의 세포벽을 구성하는 특정구조와 화학반응을 일으켜 염색이 이루어지는데, 세포벽에 그람염색과 반응하는 화학구조를 갖는 미생물을 그람양성, 그렇지 못한 것을 그람음성으로 분류한다. 그람염색법을 통해 미생물을 분류할 수 있다. 그람염색(Gram staining)의 원리는 분별염색(differential staining)이다. 분별염색은 세균의 식별을 용이하게 하기 위하여 2가지 이상의 생물학적 염료(biological dye)를 사용하는 염색방법이다. 분별염색 기법은 특정 세포구조물을 염색하기 위해 사.. Biology/미생물학 2022. 8. 1. 생명과학실험 | Gram Staining TIP 1. 그람 염색의 화학적, 이론적 기초를 파악하고 그람 양성과 음성의 박테리아를 구분할 수 있다. 2. 그람염색을 통해 미생물을 그람양성과 그람음성으로 분류한다. 그람염색을 통해 미생물을 분류할 수 있다. 그람염색법의 원리 그람 염색을 하기 위해선 관찰하고 싶은 세포에 염색액을 묻힌 후 요오드용액처리를 한다. 그 후 에탄올로 세포를 씻게 되면 조직은 탈색되지만 균은 탈색되지 않고 자주색(염색액의 색)으로 보이게 된다. 자주색으로 균이 보이게 되기 때문에 그람염색법을 이용하여 균을 관찰할 수 있었다. 하지만 에탄올 처리 과정에서 특정균의 경우에는 탈색되는 경우가 있다. 그래서 그람염색을 할 때 에탄올 처리 과정에서 탈색 되지 않는 세균을 그람 양성균이라 하고 탈색되는 균을 그람 음성균 이라고 한다... Biology/생명 과학 | 공학 2022. 7. 30. 미생물학실험 | 미생물의 염색 TIP 세균을 분별염색(differential staining) 하게 되면 그람양성균인지 그람음성균인지에 따라 서로 다른 색을 띄게 된다. 나타나는 색의 차이를 통해서 세균을 동정, 분류하고 구조적 차이에 대해서 이해한다. 세포벽은 삼투압이나 외부의 자극으로부터 세포를 지키는 역할을 한다. 종마다 가지고 있는 세포벽의 종류가 다른데 진정세균은 세포벽으로 펩티도글리칸층(N-acetylglucosamin과 N-acetylmuramic acid의 beta-1,4,결합)을 가지고 있다. 그람양성균과 그람음성균 모두 펩티도글리칸층을 가지지만 그 두께에 있어서 차이가 있다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 스포이드를 이용하여 슬라이드 글라스 위에 3차 증류수 1~2 방울 정도를 떨어트린다. 2) 백금이를 화염멸균하.. Biology/미생물학 2022. 7. 30. 일반생물학실험 | 그람 염색법 계통분류학(systematics)은 생물들의 다양성과 그들의 유연관계를 연구하는 학문이다. 계통분류학은 계통학과 생물의 특성을 규명하고 이름을 부여하며 자연적인 유연관계에 따라 그룹으로 배치하는 분류학을 함께 연계한다. 이 때 대상 생물의 형태적, 생태적, 생리적, 분자생물학적 특징을 종합하여 종을 판별하는 것을 동정이라고 부른다. 한편 세균을 동정할 때 세균은 세포의 모양에 따라 구균, 간균, 나선균 등으로 나누기도 하지만, 본 실험에서는 그람 염색법을 이용하여 세균의 형태학적인 차이에 근거해 세균을 그람 양성균과 그람 음성균으로 분류하고자 하였다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 준비된 대장균과 고초균 sample을 각각의 이름을 labeling한 슬라이드글라스에 도말하였다. 2) 실온에서 약 5분간.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 7. 29. 미생물학실험 | 그람염색법 그람염색은 세균의 형태, 크기, 배열, 그람 염색상에 따라 세균을 분류하는데 가장 흔히 이용하는 염색 방법으로서 병인균의 신속한 예비 보고와 검체 질 평가에도 유용하게 사용된다. 그람염색법은 1884년 덴마크의 의사 H.C.J.그람(1853∼1938)이 고안한 특수 염색법으로, 표본을 아닐린수(水)·겐티아나액(液)으로 물들여서 요오드·요오드화 칼륨액으로 처리한 후, 순(純)에탄올로 씻으면, 조직은 탈색되지만 균은 탈색되지 않고 자주색으로 보인다. 그러나 그 후 여러 가지 균종이 발견되자 그 속에는 조직과 마찬가지로 에탄올 세정에 의하여 탈색되는 균도 있다는 것이 밝혀졌다. 이때 탈색되는 균을 그람음성균, 탈색되지 않는 균을 그람양성균이라 부르기로 하면서 이 염색법은 당초의 목표와는 달리 세균의 분류에 이.. Biology/미생물학 2022. 7. 27. 일반생물학실험 | Gram Staining 그람 염색법은 1884년 Hans Christian Gram에 의해서 처음으로 개발된 방법으로 각종 검체 및 배양집락의 현미경적 검사에 이용되며 미생물에 의한 감염여부를 조기에 진단할 수 있게 해준다. 이 실험은 그램 염색을 통해서 세포벽의 두꺼운 정도를 알 수 있고 또한 이 실험 방법은 박테리아 분류의 한 방법이기도 하다. 미생물은 다양한 방법으로 분류된다. 즉, 미생물의 형태나 모양에 따라 분류하기도 하지만 미생물이 생존할 수 있는 온도, 수소이온농도(pH), 수분활성도 범위에 따라 분류하기도 한다. 또 미생물은 이용하는 에너지원, 산소의 존재유무, 포자생성방법, 그리고 염색에 의해서도 분류하며, 이러한 분류는 특정목적에 맞게 임의적으로 사용된다. 이번 실험을 통해 Gram staining의 원리에 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 7. 27. 일반생물학실험 | Gram Staining 세균의 염색 방법에는 4가지 방법이 있다. Simple staining, Gram staining, Spore staining, Capsule staining이 있다. 세균의 단순한 모양과 크기만을 아는 게 아니라 그 세균이 Gram positive인지 Gram negative인지를 알 수 있는 방법인 Gram staining을 실험에 사용했다. Gram staining은 1884년 덴마크의 미생물학자인 Christian gram에 의해서 고안된 Differential staining으로 세균은 두 그룹으로 나눠 준다. 염색 과정을 거쳐서 나오는 균들의 색깔을 보고 Gram positive, Gram negative 이 두 가지로 나눠 주는 것이 Gram staining 이다. 실험 방법 1. Gram .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 7. 26. 환경미생물학실험 | Gram staining 미생물은 세균, 바이러스, 곰팡이, 원생동물, 효모 등의 여러 가지 형태로 나뉘어진다. 환경미생물을 간단히 확인하는 방법으로는 현미경 관찰이 우선적으로 이야기되는데 세균은 너무 작아서 관찰하기가 어렵다. 따라서 염색을 함으로써 미생물을 염색하여 세포와 배경간의 충분한 대조를 주어 현미경 관찰을 보다 쉽게 할 수 있다. 이러한 염색법의 종류에는 여러 가지가 있다. 단염색(simple stain), Gram stain, 항산성염색(Acid fast staining), 아포염색(Spore staining) 등이 그 종류이다. 그 중 우리는 이번 실험에서 Gram staining으로 E.coli와 bacillus를 염색하고 광학현미경을 통하여 관찰할 것이다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) Take a few .. Biology/미생물학 2022. 7. 25. 일반생물학실험 | Gram Staining TIP 1. Gram staining의 원리와 방법을 숙지한다. 2. Gram(+)균과 Gram(-)균을 관찰하여 미생물 분류의 기본을 익힌다. 세균의 세포벽의 구조 차이를 이용하여 분류하는 기초적 세균염색법의 일종으로 1984년 Christian Gram이 창안, 현재는 1921년 Hucker의 개선된 방법이 사용되고 있다. 이것은 세균을 크게 2군으로 분류할 수 있다는 점에서 오래 전부터 사용되어 왔으며 가장 기본적인 염색 방법이다. 우선 열고정시킨 세균을 염기성 색소로 염색한 후, I2-KI 혼합용액으로 처리한 다음, 아세톤 또는 알코올로 탈색하여 다른 색소로 염색한다. 처음에 염색한 색소로 염색되는 것을 Gram(+)라고 하고, 두번째 염색색소로 염색되는 것을 Gram(-)라 한다. Gram(+).. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 7. 25. 일반생물학실험 | Observation of Microorganism using Grams Stain Method - 그람염색법을 이용한 미생물의 관찰 TIP 고체배지에서 배양한 미생물에 그람염색법을 이용하여 염색한 뒤 현미경으로 배양시 킨 미생물을 관찰해보자. 그램 염색법은 각종 검체 및 배양집단의 현미경적 검사에 이용되며 미생물에 의한 감염여부를 조기에 진단할 수 있게 해준다. 그램 양성균의 경우 세포벽이 두꺼운 peptidoglycan layer와 풍부한 teicoic acid로 이루어져 있어서 organic decolorizer(탈색제)로 탈색 시 쉽게 탈색되지 않으며 따라서 염색액 crystal violet이 계속 세균내에 남아있어서 보라색으로 염색된다. 그램 음성균은 peptidiglycan layer가 단일충으로 되어있으며 세포벽은 지방성분이 풍부한 lipopolysaccharide(LPS)로 이루어져 있어 탈색제에 의해 crystal vi.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 4. 2. 화공생물공학기초실험 | 유산균 음료로부터 미생물 분리 실험 방법 1. 그람 염색법 1) 균체를 슬라이드글라스에 도말하여 고정시킨다. 균체를 진하게 한 곳과 연하게 한 곳이 있도록 만들면 좋다. 2) 제1액으로 1분간 염색한 다음 물로 씻는다. 3) 제2액으로 1분간 담근 다음, 물로 씻는다. 제2액을 떨어뜨린 다음 즉시 이것을 버리고 다시 제2액을 떨어뜨려 1분간 담그면 좋다. 4) 제2액을 물로 씻은 다음, 살짝 여과지로 물기를 제거하고 완전하게 건조하기 전에 95% 에탄올 중에 살짝 흔들면서 30초 동안 탈색한다. 5) 건조를 한 다음 제3액으로 30-40초 동안 염색하고 물로 씻는다.(대비염색) 6) 현미경으로 관찰한다. 2. BCP Agar의 제조(BCP 24.64g/L) 1) 위의 시약을 150㎖ 제조할 때 해당하는 양을 계산하여 유리 보틀에 넣은.. Engineering/화학생물공정 2020. 2. 24. 미생물실험 | 세균의 분별 염색법 TIP 그람염색법의 원리와 방법을 실험을 통해 터득하고, 주어진 박테리아들을 그람양성과 그람음성으로 구분해 본다. 그람 염색법 세포벽을 이루고 있는 성분과 구조적인 차이에 의해 그람양성균과 그람 음성균으로 구별하는 염색법이다. 그람양성세균은 크리스탈 바이올렛 등의 염기성 염료로 염색되어 탈색제 처리 후에도 탈색 되지 않고 보라색을 나타내는 세균이며, 그람음성세균은 탈색제에 의해 크리스탈 바이올렛이 탈색되고 대응 염색제에 의해 염색되어 붉은색을 나타내는 세균이다. 그람 음성균의 세포벽 펩티도글리칸층이 한 겹으로 매우 얇으며, 이 층 외부에는 인지질 등으로 구성된 외막이 감싸고 있는 형태로 세포벽이 이루어져 있다. 이 때 펩티도글리칸층은 주변세포질공간이라고 불리는 여러 효소와 기질이 존재하는 작은 공간이 생.. Biology/미생물학 2019. 12. 11. 일반생물학실험 | 원핵생물 현미경 관찰 - 미생물 : 그람염색(Gram Staining +,-) TIP 1. 세포는 모든 생물의 기능적, 구조적 기본 단위이다. 원핵 세포를 가진 세균들을 미생물 감별염색법 중 하나인 그람염색을 통하여 그 원리와 방법을 이해하고 그람양성균과 음성균의 판정을 내린다. 2. 현미경의 원리, 종류, 사용법을 익힌다. 3. 미생물의 관찰 및 형태학적 특성을 알아본다. 4. 미생물의 염색의 목적과 원리를 알아본다. 5. 염색방법의 종류와 특징을 알아본다. 그람 염색(Gram Staining) 세균학에서 가장 많이 쓰이는 염색방법이며, 염색 과정에서 가장 중요한 것은 1차 염색의 탈색이다. 그람 염색 결과 자주색으로 염색되는 세균의 경우 그람양성균이며, 분홍색으로 염색되는 세균은 그람음성균이다. 이 때 양성과 음성은 전기적인 성질과는 관련 없으며 형태학적인 차이를 나타낼 뿐이다.. Biology/일반 | 세포 생물학 2019. 11. 5. 이전 1 다음 반응형