반응형 생화학실험 | 단백질 정량(Lowry 법) TIP 어수리의 추출 희석액으로부터 어수리의 단백질을 Lowry법으로 정량한다. Lowry법 알칼리성에서 단백질의 peptide 결합과 구리가 반응하여 Cu2+이온을 생성하는 Biuret 반응의 원리를 이용한 것이다. 발색의 정확한 기작은 밝혀지지 않았지만 Cu2+ 이온은 방향족 아미노산의 산화를 유도하여 phospomolybdotungstate를 푸른색의 heteropolymolybdnum으로 환원시킨다. 이러한 반응 결과 강한 푸른색을 생성하며 그 강도는 tryptophan과 lysine양에 영향을 받는다. 이 방법은 단백질의 농도가 0.01~1.0㎎/㎖의 경우에 측정가능하다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 교반 추출액(10000ppm 용액)을 1000ppm으로 희석하여 마이크로튜브에 넣고 Vort.. Biology/생화학 2023. 3. 24. 물리화학실험 | 설탕의 당화공정 TIP 1. 산의 농도가 설탕이 가수분해되는 속도에 미치는 영향을 알아본다. 2. 수소이온을 촉매로 하여 설탕(sucrose)이 가수분해되는 전화속도를 분광광도계를 사용하여 동력학적 해석을 한다. 촉매가 반응 속도에 미치는 영향 1. 정촉매 : 보다 쉽게 반응이 일어날 수 있는 경로를 제공 → 활성화 에너지를 감소 → 반응을 일으킬 수 있는 입자수 증가 → 유효 충돌 횟수 증가 → 반응이 빨라짐 (부촉매의 경우는 반대) 2. 촉매는 반응 전이나 후에 변하지 않고, 반응 종결시 원래의 상태로 회복된다. 3. 촉매는 반응물이 아니라 단지 중간 생성물일 뿐이므로 촉매를 사용하더라도 최종 생성물의 농도는 변하지 않고 반응 속도만 빠르게 한다. 실험 방법 1. 검량선 만들기 1) 포도당의 농도를 각각 10, 20.. Chemistry/물리화학 2022. 7. 18. 일반화학실험 | 분광광도계를 이용한 액체의 농도측정 TIP 분광 광도계의 사용법을 익히고, 기본원리인 Beer의 법칙을 이해하며 검정곡선을 그리는 방법을 이해한다. 검정곡선(검량선) 검정곡선은 분석하고자 하는 물질의 '알고 있는 농도와 기기 반응간의 관계'에 대한 곡선이다. 검정곡선은 표준용액의 몇 개 농도수준에서 분석기기의 반응을 측정하기 위하여 작성한다. 이 때 분석하고자 하는 물질, 화합물질의 표준용액 및 작업장 시료는 같은 방식으로 분석기기에 반응을 한다는 가정을 둔다. 검정곡선의 정확도는 정성 및 정량분석에서 필수적이다. 표준용액과 시료는 동일한 시기와 동일한 조건하에서 동일한 분석기기를 이용하여 동시에 분석해야 한다. 표준용액은 적어도 3개 이상의 농도(양)를 만들어야 하고 시료는 이러한 농도범위에 반드시 포함되어야 한다. 검정곡선 범위를 넘는.. Chemistry/일반화학 2022. 2. 8. 화공기초실험 | 흡광광도 분석 TIP 흡광광도 측정법의 개념 및 원리를 이해하고 흡광광도 측정에 사용되는 분광광도계(spectrophotometer)의 작동원리 및 사용법을 이해하며 발생용액의 최대흡수파장을 결정한다. 편광에는 직선 편광, 원 편광, 타원 편광이 있다. 전기장 벡터의 정점을 연결한 선이 빛의 진행 방향으로부터 보아 직선으로 보이는 것이 직선 편광, 원이 되는 것이 원 편광, 타원이 되면 타원 편광이라 한다. 직선 편고아은 타원율= 0, 원 편광은 타원율=1의 특수한 타원 편광이라고 생각할 수 있다. 직선 편광은 그 전기장 진동 방향이 쪼이는 대상 표면에 대하여 수직인 경우 이를 p편광이라 하며, 한편 평행인 경우 s편광이라 한다. 편광을 이용하여 측정한 스펙트럼을 편광 스펙트럼(Polarized Spectrum)이라 .. Engineering/화학 공학 | 단위조작 | 유체역학 2021. 12. 16. 일반화학실험 | 화학반응에서의 평형상수 결정 TIP 1. 주어진 온도에서 화학물질이 반응하면 반응물질이 완전히 반응하지 않고, 어느 중간 상태에서 반응물과 생성물의 농도가 시간에 따라 변하지 않는 평형상태에 도달하게 된다. 2. 반응물의 농도를 여러 혼합비로 조정하여 용액을 만든 다음, 반응계가 평형에 도달하였을때, 생성물의 농도를 분광광도계(spectrophotometer) 및 혼합용액의 색(color)을 이용하여 측정하고, 반응의 평형상수(Kc)를 계산해 본다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 시험관에 1~5번까지 번호를 표시한다. 2) 2.00×10-3M Fe(NO3)3 용액을 다섯개의 시험관에 각각 5ml씩 피펫으로 취한다. 3) 2.00×10-3M KSCN용액을 피펫을 이용하여 각 시험관에 1,2,3,4,5ml를 차례로 넣는다. 4) 증류.. Chemistry/일반화학 2021. 9. 9. 일반화학실험 | 청량음료 중의 인산의 정량 TIP 청량음료 중의 인산을 몰리브덴청[염화주석(Ⅱ)]법으로 발색시켜, 분광광도계로측정하고 인산의 함유량을 안다. 분석기기의 분류 분석기기를 이용하여 화학분석을 하는 것을 기기분석이라고 하지만 분석기기는 들고 다닐수 있는 작은것에서 크기가 아주 큰 장치까지 또, 정밀도가 낮은 것부터 미량분석을 하는 정밀도가 높은것까지 여러가지가 있다. 분석기기의 원리를 크게 분류하면, 아래와 같이 분류할 수 있다. 전자파에 관한 것 : 물질이 전자파를 흡수하든지, 발광하든지, 반사를 하는 것을 이용한다.(흡광분석, 발광분석, X선회절등) 전기화학적인 것 : 물질의 전기전도도나 배위차등을 이용한다.(전위차적정, 전도도측정, 폴라로그래피 등) 분리․분배에 관한 것 : 어떤 방법으로든 물질을 분리하여 분석한다. (크로마토그래.. Chemistry/일반화학 2021. 6. 14. 생화학실험 | BCA 분석법 BCA분석법은 비색정량법의 일종으로 시료액 중의 아미노산과 시약의 반응에 의한 발색을 비색하여 목적으로 하는 화합물을 정량 하는 분석법으로 20가지 종류의 아미노산 중에 대표라고 할 수 있는 Cysteine(시스테인) 을 사용합니다. BCA분석법에서 사용되는 녹색의 발색시약은 시료액 속에 아미노산이 포함되어있을 경우 보라색으로 변색하며 시료액 속에 아미노산의 농도가 높을수록 더욱 진한 보라색이 됩니다. BCA(Bicinchoninicacid) ① BCA assay는 Bicinchoninicacid에서 나온 말이고, Pierce방식이라고도 한다. ② 단백질의 양이 많으면 보다 많은 보라빛화합물이 생성 → 그 화합물은 빛을 더 많이 흡수. 즉 흡수율이 증가→그것에 비례해서 Sample에 있는 단백질 양을 결.. Biology/생화학 2021. 5. 26. 일반화학실험 | 용액의 농도 결정 TIP 1. 알려지지 않은 황산구리 용액의 농도를 결정하는 실험이다. 유색의 높은 농도의 용액은 낮은 농도의 용액보다 더 많은 빛을 흡수하게 됨을 실험을 통해 확인할 수 있다. 2. 우선 알려진 농도의 용액 5가지를 준비를 할 것이고, 분광광도계를 통해서 흡광도와 농도 사이의 그래프를 구성하면 비어의 법칙을 따르는 비례관계의 그래프를 구성하게 되며 그래프를 통해 미지용액의 농도를 확인 할 수 있다. 농도 액체나 혼합기체와 같은 용액을 구성하는 성분의 양의 정도. 용액이 얼마나 진하고 묽은지를 수치적으로 나타내는 방법이다. 몰농도(㏖arity, M) : 용액의 1L당 들어있는 용질의 ㏖수. 용액의 부피는 온도에 따라 변하기 때문에 역시 몰농도 또한 온도에 따라 변한다. 퍼센트 농도(%) : 아무언급이 없으.. Chemistry/일반화학 2021. 5. 3. 일반화학실험 | 결정장 갈라짐 에너지의 측정 TIP 배위 화합물의 리간드에 의한 결정장 갈라짐 에너지를 측정해서 리간드의 분광화학적 계열과 결정장 이론을 이해한다. 결정장 갈라짐 에너지(Crystal Field Splitting Energy) 배위 화합물의 에너지에 대한 간단하고 유용한 모형 중 하나가 결정장 이론이다. 이것은 금속과 리간드의 결합 모형을 이온성의 관점에서 설명하는 방법으로서 음전하를 가진 리간드가 중심원자에 접근함으로서 발생하는 영향을 설명해 준다. 예를 들면 자유로운 상태의 전이금속(또는 금속이온)은 에너지 준위가 서로 같은 다섯 개의 d-오비탈을 가지지만, 정팔면체 착물에서 6개의 리간드가 가지는 고립전자쌍의 음전하가 중심원자의 x, y, z축 방향으로 접근하면 리간드의 전자와 금속의 d-오비탈의 반발 정도에 따라 d-오비탈의.. Chemistry/일반화학 2021. 3. 7. 분석화학실험 | 분광광도법에 의한 철의 정량 TIP 철(Ⅱ) 이온이 pH2~9 범위에서 1,10-페난트롤린 용액과 정량적으로 빨간색의 킬레이트 착물을 형성하는 것을 이용, 분광 광도계를 사용하여 흡수 최대값의 파장에서의 흡광도를 특정함으로써 철을 정량할 수 있다. 투광도와 흡광도의 측정 여러 가지 수동식 광도계와 분광 광도계는 T=0에서 100%까지 선형 눈금을 갖는 표시판이 설치되어 있다. 그러한 기기로 투광도를 읽으려면 두 가지의 예비조정, 즉 0% T 또는 암전류 조정과 100% T조정을 하여야 한다. 0% T조정은 기계적으로 셔터에 의해 검출기에서 광원을 차단한다. 여러 검출기는 복사선이 없어도 작은 암전류를 나타내므로 독해장치에 눈금이 나타나도록 알맞은 역신호(전위)를 걸어준다. 100% T조정은 셔터를 열고 용매를 빛의 통로에 놓고 조절.. Chemistry/분석화학 2020. 12. 31. 물리화학실험 | 분광광도계를 이용한 약산의 평형상수 결정 TIP 1. 분광광도계 사용법과 그 원리를 이해한다. 2. 분광광도계 측정후 나온 데이터를 그래프로 그리고 흡광도 값을 찾아 약산의 평형상수를 구한다. 0.001M HCl 용액, 0.001M NaOH 용액을 만들고 티몰블루 용액을 0.001M HCl 용액, 0.001M NaOH 용액, Ph 9.0 완충용액에 넣는다. 그리고 큐벳 5개에 base라인을 측정할 증류수 2개와 아까 만든 용액 3개를 넣고 파장 400㎚~700㎚사이에서 분광광도계를 이용해 측정한다. 결과로 나온 흡수스펙트럼을 가지고 약산의 평형상수를 구할 수 있다. 실험 방법 1. 용액제조 1) 약 0.001M HCl 용액 제조 : 0.1M HCl 약 1㎖ 취하고 증류수 100㎖첨가 2) 약 0.001M NaOH 용액 제조 : 0.1M NaOH.. Chemistry/물리화학 2020. 12. 7. 분석화학실험 | 광도계에 의한 철의 함량분석 TIP 분광 광도계를 이용해 철 표준용액으로부터 철 이온이 가장 흡수를 잘하는 파장을 찾고 흡광도를 측정하여 검정 곡선을 그려본다. 본 실험은 분광광도계를 이용해 철의 함량 분석하고 분광광도계의 원리를 이해하는 것이다. 표준용액을 제조 하고 분광광도계를 이용해 빛을 가장 잘 흡수하는 파장을 찾았다. 철 이온만 있는 용액에서는 파장이 나타나지 않았고 Phenanthroline 용액을 첨가한 용액에서는 510㎚ 의 파장에서 빛에서 흡광도가 가장 크게 나왔다. 510㎚ 파장에서 1,2,3,4,5ppm 의 표준용액으로 검정곡선을 그려 보았다. 검정곡선은 직선이 나왔고 흡광도는 Beer의 법칙처럼 시료의 농도에 비례한다는 것을 알 수 있었다. 분광 광도계 물질을 통과하는 빛의 투광도를 측정하는 기기이다. 빛이 시.. Chemistry/분석화학 2020. 11. 27. 일반화학실험 | 지시약의 작용원리 TIP 산¯염기 지시약 용액의 pH를 변화시키면서 흡광도를 측정하여 지시약의 이온화 상수와 변색 범위를 알아낸다. 지시약 지시약은 적정을 하면서 중화점을 알기 위해, 혹은 수소이온의 농도를 알기 위해서 주로 사용된다. 지시약은 용액의 상황이 변함에 따라 눈에 띄는 변화가 나타나는 물질로, 이러한 변화가 색깔로 나타나는 지시약도 있고, 형광이나 발광 등으로 나타나는 것도 있다. 용액이 혼탁해지거나 침전물이 생성되는 경우도 있다. 이 중 가장 널리 사용되는 것은 색깔의 변화가 나타나는 지시약이다. 지시약의 종류는 매우 다양하며 변화가 나타나는 시점이 각각 다양하므로 중화점을 예측하여 그 근처에서 변화가 나타나는 지시약을 사용하면 실험을 효과적으로 할 수 있다. 가장 흔하게 쓰이는 지시약은 산염기지시약으로, .. Chemistry/일반화학 2020. 11. 10. 미생물실험 | 환경오염의 원인인 황화합물 제거를 위한 미생물(T.1082) 배양 최근 환경문제가 대두되고 있는 가운데 오염물질을 처리하는 기술개발에 대한 연구 필요성이 중대해 지고 있다. 악취는 특성상 저 농도에서도 불쾌감이 발생되는 특성을 가지고 있어 지역 주민들의 피해가 급증하고 있으며 세균번식으로 인한 대기오염 등의 환경오염 문제도 생겨나고 있다. 본 실험은 대기오염의 원인이 되고 있는 황화합물 악취가스를 제거하고자 분리한 황화합물 분해균주의 배양특성 하여 오염물질의 정화를 통해 환경 문제를 해결 하는 것에 목적을 두고 있다. 악취 제거와 오염세균 번식을 방지하기 위하여 사용할 수 있는 방법은 화학적, 물리적, 생물학적 3가지 방법이 있다. 환경오염의 원인이 되고 있는 황화합물 분해, 제거를 위해 물리적, 화학적, 생물학적 방법 중 미생물을 이용하여 오염원을 분해하는 생물학적 .. Biology/미생물학 2020. 9. 3. 물리화학실험 | 평형상수의 결정 - 물감지시약의 산 해리상수 TIP 본 실험의 목적은 분광광도계를 이용하여 용액중의 화학반응에 관한 평형상수(平衡常數)를 결정하는 것이다. 화학반응은 수용액중의 약산 및 지시약의 해리이다. 평형상수를 결정하는 방법(구하는 방법)은 여러 가지가 있을 수 있으나 정확한 농도를 모르고 가해진 양만 아는 이번 경우에는 흡광도를 이용하여 구할 수 있다. 즉 각각의 pH에 대하여 흡광도를 구하고 그것을 이용한 식과 pH를 그래프로 도시하여 평형상수 를 구하는 것이다. 분광광도법 (Spectrophotometry) 빛의 세기를 측정하는 방법의 하나. 분광측광법 또는 분광분석법이라고도 한다. 측광의 본래 뜻은 눈에 느껴지는 빛의 세기, 즉 시감측광을 가리키는 것이지만, 각종 광학장치의 개발로 열전쌍광전관․광전자증배관 등을 사용하는 광전적 측광이 .. Chemistry/물리화학 2020. 8. 24. 생화학실험 | Absorption Spectra TIP 분광광도계를 이용한 흡수 스펙트럼을 관찰해 본다. 분광광도계 분광광도계는 크게 광원, 단색화 장치, 검출기로 구성되어 있다. 광원에는 텅스텐 램프(320-2500㎚영역의 복사선), 중수소 아크 램프(200-400㎚영역의 자외선), 글로바(4000-200 의 적외선 복사선), 헬륨-네온 레이저(638㎚), 레이저 다이오드(680-1550㎚의 근적외선) 등이 있다. 단색화 장치는 빛을 각성분 파장으로 분산시키고 좁은 띠의 파장을 선택하여 시료 또는 검출기로 보낸다. 검출기는 광자가 검출기에 도달할 때의 전기 신호가 발생하는 원리를 이용하여 전류의 세기와 복사세기가 비례한다는 사실을 이용하여 흡광도를 측정한다. wavelenght range[㎚] color(absorbed) color observed .. Biology/생화학 2020. 6. 1. 일반화학실험 | 지시약의 산 해리상수 - Acid Dissociation Constant TIP 여러 pH의 지시약 용액에 존재하는 지시약의 산성 형태와 염기성 형태의 농도를 Beer-Lambert 법칙을 이용하여 얻어내고 이로부터 지시약의 산 해리상수(KHInd)를 구한다. 산의 이온화평형의 평형상수이며, 산의 세기를 나타내는 척도로 값이 클수록 이온화 경향이 크다. 이온화가 여러 단계인 경우에는 각 단계마다 산해리상수를 나타낼 수 있으며 온도에 의해서만 변한다. 산이온화상수라고도 한다. 산해리상수 값이 클수록 이온화가 잘 되는 것이므로 센산이다. 따라서 Ka 값만 비교하면 된다. 이온화가 여러 단계로 일어나는 경우에는 각 단계마다 산해리상수를 나타낼 수 있다. 예를 들면, 아세트산이 물 속에서 이온화하면 각 성분의 농도가 일정하게 유지되는데, 이 때 산해리상수는 평형상수와 같이 온도에 의.. Chemistry/일반화학 2020. 5. 30. 화공생물공학기초실험 | 라디칼 소거활성 측정 - DPPH assay TIP 1. ROS(Reactive Oxygen Species) 활성산소 pathway 및 radical에 의한 인체 내 산화적 스트레스에 대해 이해하고, radical 소거활성능 측정법 중 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH)법으로 항산화 활성을 측정한다. 2. 안정한 자유 라디칼인 2,2-diphenyl-1-picryl hydrazyl (DPPH)을 이용하여 일정량의 시료 용액과의 반응에 의하여 DPPH 라디칼이 감소하는 정도를 분광광도계로 측정하여 간접적으로 시료의 항산화 활성을 한다. 활성산소는 ‘프리라디칼(free radical)' 혹은 ’자유기‘ ’유리기‘라고 불린다. 활성산소는 동식물의 체내 세포들의 대사과정에서 생성되는 산소화합물로 노화나 동맥경화, 암 등의 원인.. Engineering/화학생물공정 2020. 2. 13. 이전 1 2 다음 반응형