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  일반생물학실험 | 유사 분열 TIP  유사분열의 전 과정을 관찰하고 시기별 염색체 양상을 알 수 있다.  세포분열분열(문화어: 세포분렬)은 어미 세포가 두 개의 ‘딸세포’로 나뉘는 과정을 말한다. 생명체는 성장하고 또 자손을 만들어낸다. 따라서 생명체는 최소 기본 단위라 할 수 있는 세포의 수를 늘려야 하며, 이를 위해 세포 분열을 한다. 세포분열은 세포분열시 방추사의 유무에 따라 무사분열과 유사분열로 나뉘며 유사분열은 다시 염색체수 변화에 따라 체세포분열과 감수분열로 나뉜다.  실험 방법1. 실험 과정1) 고정 : 양파뿌리를 고정액(에탄올:아세트산=3:1)에 12시간 정도 넣어둔다.  2)  저장 : 70%의 알코올로 넣어 냉장보관한다. 3)  증류수로 씻는다. 4)  해리 : 시험관에 양파뿌리 넣고 1 N HCl을 넣어 60℃가.. Biology/일반 | 세포 생물학 2024. 6. 3.

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  일반생물학실험 | 동물세포의 유사분열 염색체 관찰 TIP  두 가지 방법을 통해 동물세포의 유사분열 염색체를 관찰할 수 있다.   실험 방법1. Preparation of Mouse Metaphase Chromosomes1) 배양된 B16F10의 media에 colchicine(10㎎/㎖)을 4㎍/㎖이 되도록 첨가한다. ⇒ ( Total medium 10㎖에 4㎕) 2)  2시간 동안 37℃ incubator에서 배양한다. 3)  Media를 제거하고 1X PBS 5㎖로 washing한 후 0.5% Trypsin-EDTA를 1㎖ 처리한다. 4)  3∼5분간 37℃에 둔 후 media(+FBS) 4㎖을 넣고 pipetting하여 cell을 50㎖ conical tube로 옮겨준다. 5)  상온의800rpm에서 3분간 원심 분리한다. 6)  Media을 제.. Biology/일반 | 세포 생물학 2024. 5. 17.

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  공학생물학실험 | 초파리 침샘염색체 관찰 TIP 본 실험에서 침샘염색체의 슬라이드 표본을 제작하는 방법을 배우고, 각염색체의 밴드 패턴과 염색체의 끝 모양을 참조하여 각 염색체를 구별하고 퍼프와 같은 특징을 관찰한다. 실험 배경 쌍시목(Diptera)곤충의 유충은 침샘(salivary gland)에서 세포분열이 없이 염색체의 연속적인 분열을 통해 다사 염색체를 형성한다. 초파리의 침샘 세포의 염색체는 다른 세포의 염색체에 비해 약 100배 정도나 크고, 4쌍의 각 염색체에 특징적인 띠(band)가 나타나므로 비교적 구별이 용이하다. 침샘세포에서 염색체는 8개로 보이는 것이 아니라 각 상동염색체가 접합하여 마치 하나의 염색체처럼 되어 있어 4쌍이 아니라 4개로 보이며, 또한 4종류의 염색체가 동원체에서 붙어있다. X염색체와 4번째 염색체는 동원체.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 1. 15.

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  일반생물학실험 | 체세포 분열의 관찰 TIP 양파 근단을 이용하여 체세포분열을 관찰하고, 세포분열의 중요성을 이해한다. 체세포분열(somatic cell division, mitosis) 분열 후 모세포와 유전적 조성이 똑같은 두 개의 새로운 딸세포를 만들어 낸다(염색체 수, 염색체에 있는 DNA량 같음). 1. 전기(Prophase) ① 주형 DNA와 복제된 DNA는 각각 1개의 동원체(centromere)를 가지며, 동원체를 중심으로 서로 긴밀한 거리를 유지하면서 염색사(chromonema)로 변한다. ② 염색사는 나선구조가 계속 꼬임으로써 길이가 짧고 굵어지고, 점차 막대모양으로 띄면서 염색체로 변형되며, 하나의 염색체는 2개의 염색분체(sister chromatid)로 구성된다. ③ 2쌍의 중심립이 핵의 주변부를 따라 반대 반향으로 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 1. 8.

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  일반생물학실험 | 체세포 분열 관찰 TIP 1. 체세포분열 관찰을 통하여, 염색체의 구조와 기능을 이해한다. 2. 체세포 분열 각 단계의 특징을 염색체의 모양과 이동을 중심으로 이해한다. 체세포 분열 1개의 세포가 2개의 세포로 갈라져 세포의 개수가 불어나는 생명현상을 말한다. 이 과정에서 분열되는 세포를 '모세포', 분열 결과 새로 생겨난 세포를 '딸세포'라 한다. 딸세포는 모세포와 같은 수의 염색체를 가지고 있다 세균·아메바 등 단세포생물에 있어서의 세포분열은 자기복제에 의한 개체증식현상에 해당한다. 이에 비해 다세포생물에 있어서 세포분열의 뜻은 생장 또는 결손부위의 보충을 의미하며, 수정란에서는 세포분열이 되어가면서 세포의 수가 증가해가는 동안의 세포의 분화를 의미하기도 한다. 체세포분열과 감수분열의 차이점 체세포분열은 1회 분열하여.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 1. 7.

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  일반생물학실험 | 플라스미드의 분리 TIP 세균 DNA를 구성하고 있는 염색체와 플라스미드의 차이를 알고, 이론을 바탕으로 한 플라스미드 DNA를 분리한다. 플라스미드 세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 환형 DNA분자로서, 고리 모양을 띠고 있으며 세균의 생존에 필수적인 유전자는 아니다. 다른 세균세포에서도, 발현이 가능하기 때문에 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 8.000rpm에서 3분 동안 원심분리를 통해 세포를 채취한다. 2) 박테리아 세포 알갱이들을 Buffer P1 250㎕으로 재부유 시킨다. 3) Buffer P2 250㎕.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 10. 4.

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  일반생물학실험 | 원형 DNA인 plasmid DNA Plasmid 세포 내에서 핵이나 염색체와 독립적으로 존재하면서 자율적으로 자가증식해 자손에 전해지는 유전요인이다. 1952년에 미국의 유전학자 J.레더버그가 세균류의 염색체 이외의 유전요인을 플라스미드라고 명명했는데, 최근에는 진핵생물도 포함해 세포질 인자와 같은 뜻으로 흔히 쓰인다. plasmid의 특징은 다음과 같다. 1) 원형의 이중가닥 DNA(circular double-standed DNA)이다 2) 세포내에서 염색체 DNA와는 별개로 존재 3) 자기 스스로 복제가 가능 4) 대부분 세균에 존재하나, 일부 진핵세포에도 존재 5) 복제기점(DNA 복제의 시작점으로 숙주 범위 및 plasmid DNA의 copy를 결정)이 존재한다 6) 항생제 저항성 유전자(R인자)를 가진다. 7) 다중 제한효소 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 30.

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  일반생물학실험 | 플라스미드 추출 플라스미드는 생장에 필수적인 염색체이며 DNA에서 물리적으로 분리 돼 있는 대표적인 에피솜 DNA분자라고 한다 1953년에 미국의 유전학자 레더버그가 처음으로 플라스미드를 세균의 염색체 말고 독자적으로 증식을 할 수 있는 DNA 분자라는 의미로 이름을 지었다고 한다. 쉽게 말하면 플라스미드는 세균에서 발견이 되는 염색에 이외에 DNA이고 고리모양의 이중가닥 DNA 모양으로 수천개에서 수만개의 염기쌍으로 이루어져 있다고 한다. 하나의 세포내에 여러 개 존재하고 염색체와는 독립적으로 복제가 된다는 게 특징이다. 또 생존에 필수적이지는 않지만 특정한 환경에서 생존을 하는데 유리한 유전자들이 존재한다. 또 세균에 존재하지만 효묘와 같은 진핵 생물에서도 발견이 된다고 한다. 플라스미드의 형태로는 원형 DNA의 한.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 28.

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  일반생물학실험 | Observe the mitotic chromosome of animal cells TIP 두 가지 방법을 통해 동물세포의 유사분열 염색체를 관찰할 수 있다. 유사분열이란, 유전체 양의 변화가 없는 세포분열이며 이 과정에서 방추사가 생기고 염색체가 나타나는 핵분열의 한 형식으로 간접분열이라고도 한다. 유사분열은 전기, 중기, 후기, 말기로 이루어진다. 유사분열이 일어나기 전 간기에는 느슨한 형태의 풀어진 염색체가 존재한다. 전기는 초기와 후기로 나뉘는데 전기의 초기에는 핵이 4개의 염색체를 가지고 있는 모습이며 염색체는 2가닥으로 갈라진 모습을 하고 있는데 한 가닥을 염색분체라고 한다. 전기의 후기에는 각각의 염색체가 염색분체를 2개씩 복제하며 방추체의 구조가 만들어지며 전기과정에서 핵막이 파괴되며 느슨한 염색체의 응축이 일어난다. 중기과정에서는 염색체들이 방추체의 중심을 따라 줄지어 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 3.

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  일반생물학실험 | 체세포 분열과 감수 분열의 비교 및 관찰 TIP 체세포 분열과 감수 분열을 이해하고 각 단계에 따른 염색체 모양을 관찰한다. 세포는 모든 생명체의 기본 단위이며 생명현상을 유지하는데 필요한 여러 기능을 수행한다. 세포분열은 세포에서 세포로 유전적 영속성을 유지해 주기 때문에 가장 중요한 생명 현상의 하나이다. 세포분열은 분열의 양상에 따라 무사분열(amitosis)과 유사분열(mitosis)로 구별된다. 무사분열은 하등한 생물인 세균 등의 원핵생물(prokaryote)에서 일어나며 유사분열은 식물이나 동물 등 고등한 진핵생물(eukaryote)에서 관찰된다. 유사분열에는 체세포의 염색체 수가 감소되지 않고 두 개로 나누어지는 체세포 분열(somatic cell division)과 체세포의 염색체 수가 반으로 감소되어 생식세포가 형성되는 감수분열.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 1. 16.

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  일반생물학실험 | 현화 식물의 염색체 진화 유전 정보를 담고 있는 유전 물질은 세포 안의 핵에 존재한다. 핵에는 생물에 따라 고유한 개수의 염색체가 존재하는데, 이 염색체에 유전 정보가 저장된다. 염색체는 DNA가닥과 단백질로 이루어진 DNA와 단백질 복합체이다. DNA가닥이 히스톤 단백질에 감겨 뉴클레오솜 구조가 만들어지면, 실에 꿰인 구슬 모양의 가닥이 형성되고, 이 가닥이 규칙적으로 꼬여 더 두꺼운 가닥이 만들어진다. 각각의 염색체는 하나의 긴 이중 나선 DNA로 구성되어 있고, 이 DNA 가닥의 여러 부분에 생명체의 특정 형질을 결정하는 유전 정보가 저장되어 있다. 분열 중에는 염색체가 많이 응축되어 있어 광학현미경으로 관찰하면 염색체 수, 크기, 형태적 특징 들을 확인할 수 있다. 분열 중기에 나타나는 염색체의 수와 모양, 크기의 특징을.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 11. 19.

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  일반생물학실험 | 유사 분열 TIP 유사분열의 전 과정을 관찰하고 시기별 염색체 양상을 알 수 있다. 세포 분열은 세포에서 세포로의 유전적인 연속성을 유지해주므로 생물의 성장이나 중식의 바탕이 된다. 세포분열의 과정은 핵분열과 세포질 분열로 나누어지며 핵분열은 다시 그 양상에 따라 유사분열과 무사분열로 구별되는데 체세포분열과 감수분열은 모두 유사분열에 속한다, 체세포 분열은 동물의 배양세포에서 관찰이 가능하나 특수한 기술이 요구되므로 양파나 보리 등의 식물의 뿌리세포를 실험재료로 주로 사용하게 된다. 세포분열의 두 가지 방식 중 하나는 유사분열이다. 다세포 생물에 있어서 모든 체세포는 두 개의 배우자 세포가 융합하여 이루어진 집합자인 한 개의 모세포로부터 유사분열이라고 하는 분열의 고정을 통해 유리된 것이다. 유사분열의 기능은 각 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 12.

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  일반생물학실험 | DNA 추출과 전기영동 TIP DNA 추출법을 알고, 전기영동의 원리를 이해한다. DNA 추출 1. Plasmid 세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA로, 고리 모양을 띠고 있으며 세균의 생존에 필수적인 유전자는 아니다. 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다. 2. Plasmisd의 특징 ① 복제기점(original of replication)을 갖기 때문에 증식할 수 있다. ② 항생제 내성 유전자(antibiotic resistance gene)을 가져 selection marker로 사용될 수 있다. ③ Multi cloning site(MCS)가 존재.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 5. 1.

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  생화학실험 | Plasmid DNA Purification Plasmid는 bacteria 세포의 염색체와는 별도로 존재하면서 self-replication을 할 수 있는 원형 DNA 분자로 적은 수의 gene을 가지고 있다. 이 plasmid는 유전자 재조합 시 재조합 DNA 조작을 위한 vector DNA(숙주에 이종의 DNA를 운반하는 DNA)로 사용되며 원하는 DNA 단편을 넣어 gene cloning 등에 널리 이용된다. Plasmid는 주로 대장균 세포에서 증식되며 vector DNA로 사용되기 위하여 대량 증식된 대장균 세포로부터 분리하여 사용하게 되는데 대장균 세포내에서 염색체와는 별도로 존재하기 때문에, plasmid DNA 분리는 염색체 DNA가 포함되지 않게 분리하는 방법이 사용되게 된다. 이러한 분리 방법 중 널리 사용되는 방법 중 하나가 .. Biology/생화학 2020. 5. 23.

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  일반생물학실험 | 초파리 침샘 염색체 관찰 TIP 1. 초파리의 일반적인 특징과 침샘염색체를 관찰할 수 있다. 침샘염색체의 관찰을 통해서 염색체의 구조 및 기능과 유전현상과의 관계를 이해할 수 있다. 2. 침샘염색체의 슬라이드 표본을 제작하는 방법을 배우고, 각 염색체의 밴드 패턴과 염색체의 끝 모양을 참조하여 각 염색체를 구별하고 퍼프와 같은 특징을 관찰한다. 쌍시목(Diptera)곤충의 유충은 침샘(salivary gland)에서 세포분열이 없이 염색체의 연속적인 분열을 통해 다사 염색체를 형성한다. 초파리의 침샘 세포의 염색체는 다른 세포의 염색체에 비해 약 100배 정도나 크고, 4쌍의 각 염색체에 특징적인 띠(band)가 나타나므로 비교적 구별이 용이하다. 침샘세포에서 염색체는 8개로 보이는 것이 아니라 각 상동염색체가 접합하여 마치 하.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 2. 16.

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  일반생물학실험 | Barr Body 관찰 TIP 표본제작과 현미경 관찰을 통하여 Barr body를 확인한다. Barr body(바소체) 간기 시기에 진하게 염색되는 이질염색질 덩어리로 불활성화된 X염색체이다. 포유류에서 수컷은 하나의 X염색체를 가진데 비해, 암컷은 두 개의 X염색체를 갖고 있어 X염색체 위에 있는 유전자가 모두 활성화되었을 때 암컷은 수컷보다 2배나 많은 양의 유전자 산물을 합성하게 된다. 따라서 유전자량 보정(dosage compensation)을 통하여 암컷의 X염색체 하나를 응축시켜서 불활성화시킴으로써 평형을 유지한다. X chromosome inactivation 남성은 X 염색체에 존재하는 모든 유전자를 하나씩만 가지고도 모든 기능이 정상이다. 이것은 X 염색체에 유전자들은 오직 1개씩만 필요하고, 더 많은 경우는 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2019. 11. 12.

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  생화학실험 | DNA purification & DNA Gel Electrophoresis TIP 1. DNA, RNA, Protein 등의 혼합물, RNA, Protein과 같은 contaminants를 제거하여 Pure DNA를 얻는다. 2. 미생물에서 Plasmid DNA를 분리하고 PCR을 이용하여 DNA를 증폭하고, 제한효소를 이용하여 DNA를 절단한 후 Mini gel을 이용하여 전기영동법에 의해 DNA를 분리하고 확인하여 본다. 3. Plasmid DNA를 이용하여 미생물 형질전환을 한 후 미생물 형질전환체를 선별하는 기술까지 분자생물학을 공부하는데 필수적인 실험 기술을 습득한다. Plasmid DNA 분리법 원핵세포에는 염색체 DNA 외에도 작은 DNA가 발견된다. 보통 플라스미드(Plasmid)라 불리는 이들 DNA는 염색체 DNA보다 상당히 작고(4kb～100kb) 스스로 복.. Biology/생화학 2019. 10. 21.