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  일반생물학실험 | Chromatography 실험 배경 종이 크로마토그래피에 정지상과 이동상은 무엇이며 분리 원리는 어떤 것인지 혼합색소의 분리를 통해 알아보고, Rf 값을 알아내면서 극성의 개념을 이해한다. 엽록소가 가지고 있는 각각의 색소를 분리해서 확인하고 이들이 흡수하는 파장의 영역에 대해서 알아본다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 시금치에서 잎맥을 제거해서 5g정도 얻는다. 2) 시금치를 막자사발에 넣고 액체질소를 부은 뒤 열심히 간다. 3) 어느 정도 가루가 되었다 싶으면 100%아세톤을 부어 처리한다. 4) 피펫으로 3의 용액을 소형 튜브에 넣고 원심분리기로 3분 동안 7000rpm으로 돌린다. 5) 원심분리 후에 가라앉지 않은 위층의 용액을 피펫으로 따로 분리하고 그 용액을 얼음 속에 넣는다.(엽록소의 파괴를 막기 위해서) 6) 그.. Biology/일반 | 세포 생물학 2024. 3. 18.

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  일반화학실험 | 얇은 막 크로마토그래피 크로마토그래피는 정지상과 이동상을 이용하여 혼합물의 성분들을 분리하여 분석하는 방법이다. 이 방법은 다양한 화학 합성을 통해 얻어지는 혼합물이나 미지의 혼합물의 성분들을 신속하게 분석할 수 있는 유용한 방법이다. 크로마토그래피의 효율은 정지상과 이동상의 종류에 따라 달라질 수 있으며, 실험적으로 간편하게 사용될 수 있는 것은 칼럼 크로마토그래피 또는 얇은 막 크로마토그래피 등이 있다. 크로마토그래피는 1903년 러시아 식물학자 Mikhail Tswett에 의해 분리 기술로 고안되었다. M. Tswett는 칼슘카보네이트 칼럼을 사용하여 식물 pigment의 혼합물을 분리하는 데 성공하였다. 그는 이 실험을 통해 엽록소(chlorophyll)이 단일 화학성분이 아니라는 사실을 입증하였다. 현대에 들어서는 대.. Chemistry/일반화학 2022. 8. 31.

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  일반화학실험 | 얇은막 크로마토그래피에 의한 엽록체 색소의 분리 TIP 1. 어떠한 특정 물질이 시료에 들어 있는지 알아내는 문제를 다루는 화학의 분야를 분석화학, 더 자세히 말하는 정성 분석이라고 한다. 크로마토그래피는 혼합물에서 각 성분을 분리하여 정량 및 정성분석을 가능하게 하는 중요한 분석방법이다. 2. 본 실험은 분석 화학의 하나의 예로 얇은 막 크로마토그래피(Thin-layer Chromatography, TLC)를 이용하여 식물의 엽록체 색소를 분리를 통해 크로마토그래피의 원리를 배운다. 광합성은 엽록체가 불리는 식물의 특수한 기관에서 수행된다. 엽록체의 내막인 틸라코이드막은 빛에너지를 흡수하는 데에 필요한 광합성 색소를 가지고 있다. 주요 광합성 색소로는 엽록소a, 엽록소b와 카로틴계 색소 등이 있다. 카로틴계 색소에는 β-카로틴, 크산토필, 루테인, .. Chemistry/일반화학 2021. 10. 7.

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  일반생물학실험 | 세포의 에너지 합성 - 엽록소 분리와 함량 측정 TIP 1. 종이 크로마토그래피를 이용하여 시금치 잎에서 광합성 색소를 분리하고 색소의 빛 흡수를 알아본다. 2. 분광광도기를 이용한 시료 분석방법을 배운다. 광합성 색소(엽록소) 광합성은 엽육세포의 엽록체라는 소기관에서 수행된다. 엽록체의 내막인 틸라코이드막은 빛에너지를 흡수하는 데에 필요한 광합성 색소 를 가지고 있다. 주요 광합성 색소로는 엽록소 a, 엽록소 b와 카로틴계 색소 등이 있다. 카로틴계 색소에는 β-카로틴, 크산토필, 루테인, 리코펜 등이 있다. 광합성 색소들은 각기 특정한 파장의 빛을 흡수한다. 예를 들면, 엽록소 a는 430㎚ 파장의 빛과 663㎚ 파장의 빛을 최대로 흡수한다. 광합성 색소들은 화학 구조에서 볼 수 있듯이 대부분 지용성 분자들로 여러 가지 유기용매에 녹는 정도가 다르.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 8. 1.

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  유기화학실험 | 박막 크로마토그래피 TIP 실험을 통해 크로마토그래피의 원리를 이해하고, 크로마토그래피 중에서 가장 간편한 TLC의 활용도에 대하여 생각한다. 박막크로마토그래피 실험의 목적은 실험을 통하여 크로마토그래프의 원리를 분명히 이해하고, TLC의 활동에 대하여 생각하는 것이다. 크로마토그래피는 적절한 정지상과 이동상을 사용하여 시료들이 섞여있는 혼합액을 이동속도 차이를 이용하여 분리하는 방법이다. 이 때 흡착되는 힘이 약한 색소일수록 빠르게 높이 이동하고, 반대로 흡착되는 힘이 큰 색소일수록 느리게 이동한다. 박막크로마토그래피는 흡착제로 실리카겔이나 알루미나와 같은 고체의 고운 가루를 유리판이나 셀룰로이드와 같은 플라스틱판의 표면에 얇은 막이 되게 입혀 거름종이와 같이 사용하는 것이다. 실험은 전개용매를 만들고, TLC판에 시료의.. Chemistry/유기화학 2021. 4. 7.

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  분석화학실험 | 얇은 막 크로마토그래피를 이용한 아미노산 정성분석 TIP In this experiment it would be the amino acid qualitative analysis using thin layer chromatography. Phenylalanine, Tyrosine, will find two Aspartate, amino acids unknown Glysine and components through experiments. 본 아미노산 정성분석 실험에 사용되는 방법은 얇은 막 크로마토그래피이다. 얇은 막 크로마토 그래피의 원리는 정지상을 흡착제인 실리카겔이나 알루미나를 유리판 위에 얇게 입힌 정지상 판과 이 판 위를 흐르는 용매를 이동상으로 하였을 때, 시료 성분들이 두상에 대한 서로 다른 분배를 나타내므로 분리가 되는 방법이다. 이 방법을.. Chemistry/분석화학 2020. 10. 28.

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  일반생물학실험 | 광합성 색소와 분리 TIP 종이 크로마토그래피를 이용하여 잎에서 색소를 분리하고 각각의 색소의 최대 흡수파장을 측정한다. Rf(Ratio of flow)에 영향을 주는 요인 Rf=특정 색소가 이동한 거리/전개액이 이동한 거리'이다. 종이크로마토그래피의 원리는 전개액에 더 잘 녹는 성분이 더 많이 이동하게 된다는 사실을 이용한 것이다. 여기서 전개액과 색소는 여과지를 통해서 이동하게 되므로 여과지의 성질에 영향을 받게 되고, 온도의 양 또한 얼마나 잘 이동하는지에 영향을 준다. 또한, 시료의 양, 물의 포화정도, 전개용매의 성질도 에 직접적으로 영향을 주는 요인이 될 수 있다. GC의 원리 고정상에 흡착성이 있는 고체의 분말 미립자를 사용하는 기체-고체크로마토그래피와 적당한 비활성 고체분말의 표면에 비휘발성 액체를 보유시킨 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 10. 18.

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  유기화학실험 | 크로마토그래피와 이성질체 TIP 전개용매의 혼합비와 화합물 종류에 따른 전개 경향성을 알아본다. 크로마토그래피(Chromatography) 모든 과학 분야에서 널리 이용되고 있는 분석 방법으로써 소량으로 화합물을 확인하고, 많은 종류로 이루어진 혼합물을 분리하는데 사용하고 있다. 크로마토그래피는 상 분배 원칙에 근거하여 정지상 (stationary phase)과 이동상 (mobile phase) 사이의 물질의 분배를 수반한다. 크로마토그래피 중 얇은 층 크로마토그래피는 유리판 위에 실리카 겔이나, 알루미나 가루를 바인더로 이용하여 만든 고체 - 액체 흡착 크로마토그래피이다. 얇은 층 크로마토그래피에서 정지상 (고체)은 실리카 겔 층이고 전개용매는 이동상 (액체)이며, 실리카 겔 층 밑의 유리는 단순히 지지체이다. 분석물질은 모세.. Chemistry/유기화학 2020. 9. 27.

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  화학공학실험 | TLC를 이용한 아미노산 분석 아미노산을 신속하고 간편하게 분리 동정하는 방법과 그 활용범위를 익힌다. 크로마토그래피는 2종류 이상의 화학성분이 혼합되어 있는 생물소재 추출물이나 유기합성 과정에서 얻어진 화합물을 효과적으로 분리하고 정제하는 방법이다. 물질이 분리되는 기본 원리는 정지상(stationary phase)과 이동상(moving phase)사이에서 각 물질이 가지는 독특한 용해도(solubility)와 흡착성(absorption)의 차이에 따라 선별적으로 분배되는 성질을 이용하는 것이다. 얇은 층 크로마토그래피(TLC)는 정지상으로서 유리판이나 플라스틱판 위에 얇게 코팅시킨 silica gel 또는 alumina가 사용된다. TLC에서 주로 사용되는 silica gel은 silicic acid의 중합체로서 다공성 입자를 형.. Engineering/화학 공학 | 단위조작 | 유체역학 2020. 8. 22.

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  일반생물학실험 | 잎의 색소 분리 TIP 1. 광합성색소의 종류를 안다. 2. 크로마토그래피 이용한 광합성 색소의 분리 원리를 이해한다. 3. 분광광도기를 이용하여 색소의 최대흡수 파장을 알아본다. 4. Paper Chromatography를 이용해 잎에서 색소를 분리하고 각 색소의 최대흡수 파장을 알아본다. Photosynthesis(광합성) 광합성 색소 광합성은 엽록체라 불리는 식물의 특수한 기관에서 수행된다. 엽록체의 thylakoid membrane 에는 빛 에너지를 흡수하는 광합성 색소들이 분포 되어있며, 주요 광합성 색소들로는 chlorophyll a, chlorophyll b, carotenoid 등이 있다. 엽록소(chlorophyll)는 빛 에너지를 흡수하는 주 색소이나 , 보조색소(carotenoid) 역시 빛을 흡수하.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 5. 19.

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  생화학실험 | Siderophore type detection 및 발색반응을 통한 siderophore의 작용기 확인 TIP Siderophore type이 무엇인지 확인하고, column 후 그 타입이 발색한 시료를 모아 Silicagel TLC를 통해 나타난 스팟의 발색반응을 통한 siderophore의 작용기를 확인한다. column chromatography ① 유리관과 같은 원기둥 모양의 관에 산화알루미늄이나 이온교환수지 등을 충전한 것 ② column에 시료용액을 통과시키면 시료용액 중에 함유된 여러 물질이 분리되어 층상으로 column 속에 위치 ③ 각 물질은 적당한 용리액을 흘림으로써 각 성분을 추출 TLC(Thin layer chromatography, 박층 크로마토그래피) ① 정지상으로 흡착제인 실리카겔이나 알루미나를 유리판 위에 얇게 입힌 정지상판과 이 판 위를 흐르는 용매를 이동상으로 하였을 때 T.. Biology/생화학 2020. 3. 30.

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  생화학실험 | 종이 크로마토그래피를 이용한 당류의 분석 TIP 1. 크로마토그래피를 이용하여 당류를 분별해내고 Rf 값을 계산하여 미지시료에 함유된 시료를 분석한다. 2. 종이 크로마토그래피의 원리를 이해하고 미지시료를 알아내자. 크로마토그래피는 혼합물로부터 그 성분을 순수하게 분리하거나 확인,정량하는 데 매우 편리한 방법이다. 물에는 녹지 않으나 유기용매에 잘 녹는 물질을 흡착제에 대한 흡착성의 차이를 이용하여 분리할 수 있고(흡착 크로마토그래피), 이온화하는 수용성 물질을 분리하는 데에는 이온교환 크로마토그래피가 이용된다. 또한 혼합물의 성분들이 서로 섞이지 않는 두가지 용매에 다 같이 녹지만 이 두 용매에 대한 용해도의 차이가 있을 경우 분배 크로마토그래피에 의해 그 성분을 각각 분리 할 수 있다. 종이 크로마토그래피는 원리상으로는 분배 크로마토그래피의.. Biology/생화학 2020. 3. 19.

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  화공생물공학기초실험 | 박막크로마토그래피(Thin Layer Chromatography) TIP 생물소재의 분리/정제 과정에서 얻어지는 혼합추출물에서 목적하는 물질을 신 속하고 간편하게 분리 동정하는 방법과 그 활용범위를 익힌다. 크로마토그래피는 2 종류 이상의 화학성분이 혼합되어 있는 생물소재 추출물이나 유기합성 과정에서 얻어진 화합물을 효과적으로 분리/정제 하는 방법이다. 물질이 분리되는 기본 원리는 정지상(stationary phase)가 이동상(moving phase)사이에서 각 물질이 가지는 독특한 용해도(solubility)와 흡착성(adsorption)의 차이에 따라 선별적으로 분배되는 성질을 이용하는 것이다. 박막크로마토그래피(TLC)는 정지상으로서 유리판이나 플라스틱판 위에 얇게(～0.25㎜) coating시킨 silica gel 또는 alumina 가 사용된다. TLC에서 .. Engineering/화학생물공정 2020. 2. 16.

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  일반화학실험 | Thin layer Chromatography - 얇은막 크로마토그래피 TIP 1. 미량의 물질을 분리 또는 정제하는 방법으로 쓰이는 크로마토그래피에 대해 이해한다. 2. 혼합물을 분리 및 정제를 해 본다 Definitions of adsorption chromatography 1. 이동상(Mobile phase)이 고정상(Stationary phase)을 통과할 때 시료성분들이 두 상에 대해서 서로 다른 분포를 갖는 상분포(phase distribution)의 원리이다. 2. 성분이 컬럼을 통과하면서 분배가 이루어지며 분배 계수로도 나타낸다. 3. 각 성분들은 서로 다른 이동속도에 따라 분리 되어 크로마토그램을 만들게 된다. 4. 복잡한 혼합물에서 두 가지 상(Phase)의 분배 차이 이용한다. 즉, 소량의 시료 용액을 컬럼에 주입하면 이동상은 시료를 이동시킨다. 각 성분.. Chemistry/일반화학 2020. 2. 10.

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  유기화학실험 | 박층크로마토그래피(TLC) - 감기약 TIP 1. TLC의 효율적인 사용법을 익힌다. 2. 박층 크로마토그래피에 정지상과 이동상은 무엇이며 분리 원리는 어떤것인지 혼합색소의 분리를 통해 알아보고, 각각의 값을 비교함으로써 미지의 물질을 확인한다. 3. TLC는 유기화학에서 물질을 확인 할 때 가장 많이 쓰는 방법으로서, 판을 이용하여 시료물질을 성분이 다른 용매에 전개시켜 각각의 Rf값을 구하는 법을 알아본다. 4. 어떤 것을 분리, 분석하는 방법 중 하나인 크로마토그래피 중에 유기화학에서 자주 쓰이는 방법인 TLC의 원리와 특징을 알 수 있다. 그리고 TLC의 사용방법을 배워 복잡한 혼합물을 분리, 분석하는데 도움이 될 수 있다. 실험 배경 전개액 마다 시료가 특정한 Rf값을 가지는 특징을 이용하여 물질의 조성을 판별할 수 있다. 또한 T.. Chemistry/유기화학 2019. 11. 16.

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  유기화학실험 | 액체-고체 크로마토그래피 - 니트로화 반응 TIP 1. 액체-고체 크로마토그래피를 이용하여 Nitro 반응을 알아본다. 2. Rf 값을 통하여 반응전과 반응후의 변화를 알아본다. Liquid-Solid Chromatography 정지상은 관 안에 충진된 대단히 작은 고체 입자들로 만들어져 있고 이동상은 관을 통해 스며들며 고체 입자들의 표면을 통과하는 액체이다. 고쳐 표면은 정전기적 힘과 반데르발스의 힘 결과로 인해 성질이 다른 분자들의 얇은 층을 흡착한다. 흡착의 세기는 고체 표면의 흡착 특성에 따라 다르기 때문에 적절히 선택된 고체는 어떤 혼합물 중의 한 성분을 선택적으로 흡착할 수도 있다. 마지막 장안에서 사용된 선택된 흡착의 중요한 예는 다량의 극성 불순물을 제거하기 위해서 결정화에서 숯을 사용하는 것이다. 묽은 용액으로부터 흡착을 지배하.. Chemistry/유기화학 2019. 11. 6.