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  환경미생물학실험 | Gram staining 미생물은 세균, 바이러스, 곰팡이, 원생동물, 효모 등의 여러 가지 형태로 나뉘어진다. 환경미생물을 간단히 확인하는 방법으로는 현미경 관찰이 우선적으로 이야기되는데 세균은 너무 작아서 관찰하기가 어렵다. 따라서 염색을 함으로써 미생물을 염색하여 세포와 배경간의 충분한 대조를 주어 현미경 관찰을 보다 쉽게 할 수 있다. 이러한 염색법의 종류에는 여러 가지가 있다. 단염색(simple stain), Gram stain, 항산성염색(Acid fast staining), 아포염색(Spore staining) 등이 그 종류이다. 그 중 우리는 이번 실험에서 Gram staining으로 E.coli와 bacillus를 염색하고 광학현미경을 통하여 관찰할 것이다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) Take a few .. Biology/미생물학 2022. 7. 25.

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  일반생물학실험 | Gram Staining TIP 1. Gram staining의 원리와 방법을 숙지한다. 2. Gram(+)균과 Gram(-)균을 관찰하여 미생물 분류의 기본을 익힌다. 세균의 세포벽의 구조 차이를 이용하여 분류하는 기초적 세균염색법의 일종으로 1984년 Christian Gram이 창안, 현재는 1921년 Hucker의 개선된 방법이 사용되고 있다. 이것은 세균을 크게 2군으로 분류할 수 있다는 점에서 오래 전부터 사용되어 왔으며 가장 기본적인 염색 방법이다. 우선 열고정시킨 세균을 염기성 색소로 염색한 후, I2-KI 혼합용액으로 처리한 다음, 아세톤 또는 알코올로 탈색하여 다른 색소로 염색한다. 처음에 염색한 색소로 염색되는 것을 Gram(+)라고 하고, 두번째 염색색소로 염색되는 것을 Gram(-)라 한다. Gram(+).. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 7. 25.

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  미생물학실험 | 그람 염색 및 미생물 동정 TIP 그람염색에 의한 세균 감별염색방법과 염색의 원리를 익히고, 미생물의 그람양성 및 그람음성을 판별해 본다. 1884년 덴마크 의사 한스 크리스티안 그람이 고안한 특수 염색법의 하나로 세균의 세포벽의 구조 차이를 이용하여 분류하는 기초적 세균염색법의 일종이다. 세균의 염색 특징(양성 혹은 음성)에 의하여 세균의 분류 및 동정에 이용되는 염색법이라고 할 수 있으며, 염색한뒤 세포벽 구조의 차이에 의해 보라색으로 염색되는 세균을 그람양성균, 붉은색으로 염색되는 세균을 그람음성균이라고 분류 한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 슬라이드글라스에 균명을 기입하고, 뒷면 중앙부에 펜으로 직경 5～10mm의 원을 그린다. 2) 슬라이드글라스 중앙부 원위에 증류수를 소량 떨어뜨린다. 3) 고체배지에서 18～24 .. Biology/미생물학 2022. 7. 23.

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  미생물학실험 | 단 염색 (Simple staining)과 그람 염색 (Gram Stain) TIP 단염색은 한 종류의 염료(dye)를 사용하여 세균의 형태, 배열, 크기 등을 신속히 관찰하는데 목적이 있고, 그람 염색은 그람 염색법에 의해 세균감별염색술 식을 익히고 세균그람염색성에 따른 분류와 그람 염색의 원리를 익힌다. 미생물은 크기가 매우 작고, 분포밀도가 작아 육안으로 관찰 및 연구하기 어려운 생물이다. 따라서 이를 관찰하기 위해서는 미생물을 배양해서 분포밀도를 늘리거나, 현미경을 통해서 미생물을 확대하여 관찰이 가능하다. 이 실험에서는 현미경을 통해 미생물을 관찰할 것이다. 현미경을 통해 미생물을 관찰할 때 염색을 해야 하는 이유는 명시야 현미경의 제한요소 중 하나인 불충분한 대비차를 염색을 통하여 세포의 대비를 증가시켜 명시야 현미경으로도 쉽게 관찰할 수 있게 된다. 즉, 염색을 하지.. Biology/미생물학 2022. 7. 21.

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  생명과학실험 | 어류의 일반구조 척삭동물문 척추동물아문에 속하는 어류는 턱이 없는 무악어와 턱을 가진 연골어 및 경골어로 구분된다. 무악어에는 먹장어와 칠성장어가 포함되며 상어, 홍어 및 가오리 등이 연골어에 속하고 피라미, 붕어 등은 경골어에 속한다. 무악어는 비늘이 없는 점액성의 피부를 가지지만 연골어와 경골어 는 일반적으로 진피성의 비늘이 몸통과 꼬리지느러미 앞부분에 분포한다. 연골어는 종에 따라 경린, 원린 또는 즐린으로 싸여 있다. 어류의 몸은 방 추형으로 머리, 몸통 및 꼬리로 구분되며 쌍을 이루는 가슴지느러미와 배 지느러미 그리고 쌍을 이루지 않는 등지느러미, 뒷지느러미 및 꼬리지느러 미를 부속지로 가지고 있다. 아가미를 통하여 호흡하며 어떤 종들은 부레 를 가진다. 특히 경골어의 아가미는 좌우 아가미덮개 속에 각각 4장씩.. Biology/생명 과학 | 공학 2022. 7. 9.

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  일반생물학실험 | 식물의 구조(줄기,뿌리) TIP 줄기와 뿌리의 내부구조와 기능을 이해하고 쌍자엽식물과 단자엽식물의 형태적 차이점을 고찰한다. 가설 설정(Setting up hypothesis) 1. 쌍자엽식물과 단자엽식물의 뿌리와 줄기의 구조를 관찰할 수 있을 것이다. 2. 쌍자엽식물과 단자엽식물의 뿌리와 줄기 구조의 차이점을 알 수 있을 것이다. 쌍자엽식물과 단자엽식물은 줄기와 뿌리의 구조가 매우 상이하다. 쌍자엽식물에는 형성층이 있고, 유관속 배열이 환상으로 배열되어있다. 또한 피층과 수의 구분이 명확하다. 하지만 단자엽식물은 형성층이 없고 유관속 배열이 산재되어있으며 피층과 수의 구분이 불명확하다. 쌍자엽은 유관속 조직이 둥근 기둥모양으로 뿌리의 중앙에 위치하고 있고, 단자엽은 둥근 통모양으로 뿌리의 중앙에 수가 있고, 그 주변부에 위치하.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 7. 4.

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  일반생물학실험 | 형질 전환 - 박테리아 유전자 TIP 대장균의 형질 전환 실험을 통해 형질 전환의 원리와 개념을 이해한다. 형질 전환(Transformation) 유전물질인 DNA를 다른 계통의 살아 있는 세포에 주입했을 때, DNA가 그 세포에 들어가 유전형질(遺傳形質)을 변화시키는 현상. 형질 전환은 1928년 F. 그리피스의 폐렴균(肺炎菌)을 이용한 실험과 함께 알려졌다. 그리피스는 폐렴균 중에서 다당류(多糖類)로 이루어진 두꺼운 막(협막〈莢膜〉)을 갖는 병원성(病原性)의 세포(S형균이라 부른다)를 가열하여 죽인 다음, 같은 종의 균의 돌연변이체(突然變異體)로서 협막을 갖지 않는 비병원성 세포(R형균이라 부른다)와 섞어서 쥐에게 주사하여, 쥐는 발병(發病)해 죽고, 시체에는 열에 의해 죽었을 S형균이 출현하는 것을 발견하였다. 실험 방법 1. .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 6. 19.

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  일반생물학실험 | 발효(Fermentation) TIP 세포의 에너지 발생 과정 중 하나인 발효기작의 생화학적 특성을 이해한다. 발효 유기물의 분해 결과 생성된 중간 산물이 인간에게 유용한 경우로 중간 산물의 종류에 따라 알코올 발효, 젖산 발효, 아세트산 발효 등으로 구분한다. 실험 방법 1. 알코올 발효 과정에서 CO2 발생의 관찰 1) YPD 배지를 이용하여 25℃에서 하룻밤 효모를 배양한다.(final 2%의 glucose가 들어있는 정상 YPD 배지를 이용하여 배양) 2) 15㎖ conical tube를 5개 준비하여 포도당, 젖당, 설탕, 전분이 들어간 YPD 배지를 각각 4㎖씩 분주하고, 듀람 시험관을 넣는다.(포도당 1개(대조군), 포도당 1개, 젖당 1개, 설탕 1개, 전분 1개) × 2 3) 혐기 조건으로 사용할 배지에 mineral.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 6. 18.

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  일반생물학실험 | 생명정보학 실습 TIP 1. 생물정보학 학문을 이해하고 생물정보학 Tool을 사용하는 방법을 익힌다. 2. 생물정보학 기반의 Tool을 이용하여 미지의 유전자를 데이터베이스에 대조하고 어떤 서열인지 탐구한다. 생물정보학 생물학적인 문제를 응용수학, 정보과학, 통계학, 컴퓨터 과학, 인공지능, 화학, 생화학등을 이용하여 주로 분자 수준에서 다루는 학문으로 컴퓨터를 이용하여 생물학을 연구하는 모든 분야를 포함하는 학문이다. 생명체가 가지고 있는 유전정보를 찾아내는 연구 사업을 유전체 사업이라고 하는데 이러한 유전체 사업의 결과로 얻어진 정보를 가공 처리하여 유용한 정보를 얻어내는 학문을 생물 정보학이라고 한다. 따라서 생물정보학은 컴퓨터를 이용하여 생물학을 연구하는 모든 분야를 포함한다. 실험 방법 1. BLOSUM 1) .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 6. 18.

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  환경생태학실험 | 용존 산소 측정 (DO) DO (Dissolved Oxygen) ① 물속에 용존하고 있는 산소를 말하며 온도가 높을수록 DO포화도는 감소한다. 20℃에서 용존산소 포화도는 9.17ppm이고, 30℃에서 7.63ppm, 0℃에서는 14.62ppm 정도이다. DO는 수중생물의 생육과 밀접한 관계가 있으며, BOD증가로 급속하게 감소될 때가 있다. ② 수중의 DO농도는 대기중 산소의 자연적 용해(재포기), 조류(algae) 등의 광합성 작 용에 의해 증가되고 수중 불순물의 환원작용, 동식물의 호흡작용, 미생물에 의한 유기물의 분해작요에 의해 감소한다. ③ 오염된 하천의 저부, 호소의 심층, 지하수 등은 무산소 상태로 되는 수가 있는데 이러한 수역에서는 철, 망간 등의 환원용출과 황산염의 환원, 유기물의 부패분해가 일어나 수질의 변화.. Biology/그외 생물학 2022. 5. 24.

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  일반생물학실험 | Amylase에 의한 녹말의 분해(효소반응) TIP  온도의 변화에 따라 침속의 amylase에 의해 녹말(starch)이 분해되는 현상을 관찰하고 그 원리를 알아보자. 또 녹말이 요오드용액과 반응하는 원리를 알아보자.   탄수화물 소화과정에서의 아밀라아제의 역할1. 아밀라아제의 구강 내 소화전분은 타액의 아밀라아제(amylase)에 의하여 덱스트린(dextrin)을 거쳐 맥아당으로 가수분해 된다. 원래의 전분은 소화되기 어렵지만 조리된 전분은 효소의 작용을 받기 쉽다. 음식물이 위장으로 내려가서 위산과 혼합될 때까지는 아밀라아제(amylase)가 계속 작용한다. 2. 위내 소화 위벽에서 분비되는 위액 중에서 탄수화물의 소화효소가 함유되어 있지 않다. 그러나 타액의 아밀라아제(amylase)작용은 음식물이 위내로 들어와 염산을 함유한 위액이 음식물.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 5. 21.

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  일반생물학실험 | 단백질 추출 및 정량 TIP  Cell에서 단백질을 추출하고 Bradford assay를 통해 이를 정량한다.   Coomassie Brilliant Blue G-250Bradford mathod에서 사용되는 염료이다. 산성 조건 하에서 갈색인 반면, 단백질과 결합하면 전체적으로 음전하를 띠며 푸른색으로 변하게 된다. 또한 이러한 성질 때문에 Polyacrylamide gel electrophoresis를 사용하여 단백질 또는 단백질 복합체를 분리하는데 사용할 수 있다. 단백질 농도가 많을수록 더욱 진한 파란색을 띤다. Coomassie Blue가 단백질에게 전자를 주어 단백질의 중성 상태를 무너뜨리면 단백질의 소수성 부위가 노출되는데, 노출된 부분에 Coomassie Blue가 비공유 결합을 이룬다. 또한 양전하를 띠는 아.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 5. 9.

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  일반생물학실험 | 원생생물의 관찰 TIP  1. 학교 지도못에 살고 있는 다양한 원생생물의 관찰하고 그 종류를 안다. 2. 다양한 원생생물의 생물학적/생화학적 능력을 안다.   원생생물단세포 생물을 이루는 말이라고 한다. 원생생물은 진핵세포 중에서 고등생물인 동물과 식물이 서로 공생을 해서 진화하는 과정으로 교량역할을 한 것으로 여긴다고 한다. 대부분의 원생생물이 단세포 생물이라고 한다. 원생생물은 규조류, 아메바, 유글레나, 와편모조류, 짚신벌레, 물 곰팡이, 해캄 등이 있다. 원생생물 중의 원생동물은 운동기관의 따라 편모류, 위족류, 섬모류, 포자류 등으로 나눌 수 있다고 한다. 편모류는 1개또는 몇 개의 편모를 갖고 운동한다. 위족류는 부정형으로 위족 운동을 한다고 한다. 예로 아메바가 있다. 섬모류는 원생동물 중 세포소기관이 가장.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 5. 7.

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  일반생물학실험 | 원생생물의 관찰 및 크기 계측 TIP  1. 대표적인 원생생물의 관찰을 통하여 그들의 다양성과 진화적 차이를 안다. 2. Micrometer의 사용법과 Micrometer를 이용한 세포의 크기 계측 방법을 알아본다.   마이크로미터에는 접안마이크로미터와 대물마이크로미터 2가지가 있다. 접안마이크로미터는 둥근 유리로 되어 있으며 눈금이 새겨져 있다. 현미경 사용 시 접안렌즈 안쪽에 넣고, 눈금을 이용하여 물체의 길이를 측정한다. 하지만 접안마이크로미터 한 눈금의 길이는 고정된 값이 아니라 사용하는 대물렌즈의 배율에 따라 달라진다. 따라서 물체의 길이를 측정하기 위해서는 먼저 대물마이크로미터를 이용하여 접안마이크로미터 한 눈금의 길이를 정해야 한다. 대물마이크로미터 한 눈금의 길이는 10μm(마이크로미터)라는 고정된 값을 가진다. 따라서.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 5. 5.

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  일반생물학실험 | 원생생물의 관찰 TIP  1. 원생생물의 동정 및 기재를 할 수 있다. 2. 담수 생태계 내 원생생물 다양성을 이해할 수 있다.   원생생물계는 원생동물과 조류를 포함하는 진핵생물로 원생생물은 진핵생물 중에 동물이나 식물, 균 계에 속하지 않는 생물의 분류이다. 원생생물의 운동은 편모, 섬모, 위족으로 하는데 운동을 하지 못 하는 것도 있다. 모양은 매우 다양하여 좌우비대칭형, 동그란 형, 원 추형, 가늘고 긴 모양·납작하고 등과 배의 구별이 있는 것 등이 있다. 번식은 주로 이분법과 출아법으로 하며 교미와 접합의 유성 생 식도 가능하다. 원생생물의 종류로는 규조류, 아메바, 유글레나, 와편모조류, 짚신벌레, 물곰팡이가 있다.  실험 방법1. 실험 과정1) 농축된 담수를 채수병에 담았다. 2) 채수한 샘플을 스포이드를 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 5. 2.

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  세포생물학실험 | SDS-Page TIP  SDS-PAGE는 DNA를 전기영동으로 분리하여 크기를 알아보듯이 단백질도 SDS를 이용하여 전하는 모두 잃게 하고 크기에 의해 분리되게 만들어 전기영동을 통해 단백질의 크기를 알아본다.   Sodium dodecyl sulfate-polyacryamide gel electrophoresis (SDS-PAGE)는 단백질을 정제하는 동안 이를 monitor하고, 정제된 단백질의 동질성(homogeneity)을 알기 위한 가장 좋은 방법이다. SDS-PAGE는 일반적으로 단위체의 분자량을 결정하고, 정제된 단백질의 단위체 구성을 알기 위해 사용된다. SDS-PAGE는 더 깊은 연구를 위한 충분한 단백질을 얻기 위해 scale up될 수 있다.   실험 방법1. 실험 과정1) 각 lane 별로 30㎕.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 4. 30.

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  세포생물학실험 | pH 변화에 따른 Enzyme의 Activty 실험 방법1. Buffer 용액제조1) 먼저 KH2PO4와 K2HPO4를 각각 50mM 80㎖를 제조한다. ➀ 시약스푼을 사용하기 전 알코올로 소독한 뒤 종이타월로 닦아준다. ➁ KH2PO4 0.55g 을 저울로 측정한다. 한번 꺼낸 시료는 다시 담지 않는다.➂ 비커와 실린더를 사용하기 전 D.W 로 세척 한다. ➃ 100㎖ 실린더에 80㎖ 의 D.W를 담고 비커에 옮겨 담는다. ➄ 비커에 80㎖용량을 눈금으로 표시한 후 실린더에 적정량을 덜어놓는다.➅ 비커에 KH2PO4시료를 넣고 D.W로 시료용지에 남은 시료까지 비커에 넣는다. ➆ 덜어둔 d.w를 이용하여 비커의 눈금을 맞춰준다.➇ 알코올로 소독한 유리막대를 이용하여 섞어준다. 2) 각각 용액을 40㎖로 나눈 뒤 pH meter를 이용하여 pH5와 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 4. 27.

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  세포생물학실험 | 단백질 정량 분석 비교 TIP  단백질 정량 원리에 대해 이해하고, 대표적인 단백질 정량법인 BCA법을 이용하여 직접 단백질을 정량해본다.   단백질 정량이란 시료 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정으로써, 대부분의 생명과학실험의 기본이 되는 과정이라고 할 수 있다. 생물학 분야의 경우, 다른 분야보다 결과를 볼 때까지 뭔가 잘못되었다는 것을 알기 어려워 준비 단계에서의 단백질 정량이 잘못 이루어지면 헛수고를 하거나 잘못된 결과를 얻을 수 있다.  이러한 이유 때문에 단백질 정량을 정확하게 하는 것은 매우 중요하다. 또한, 정확성뿐만 아니라 대부분의 실험에서 반복적으로 사용하게 되므로 간편성 역시 중요하게 여겨지기 때문에 실험에 따라서 다양한 단백질 정량 방법이 사용되고 있다. 대표적인 정량법은 ① Absorb.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 4. 26.