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  일반생물학실험 | 침샘 염색체 관찰 TIP 1. 초파리에서 침샘을 꺼내어 침샘 염색체를 관찰할 수 있다. 2. 침샘 염색체가 다른 염색체보다 크기가 큰 이유를 설명할 수 있다. 염색체의 구조 진핵세포의 간기 핵으로부터 분리된 염색질 에서는 염색체의 형태를 찾아 볼 수 없으며 , 대신 불규칙적으로 모여 있는 핵단백질이 관찰된다. 핵단백질은 많은 DNA와 소량의 DNA를 포함하고 있는 단백질로 구성되어 있다. 이들 단백질은 염색질의 중요한 구조적 역할을 하는 염기성의 히스톤 단백질과 DNA나 RNA 합성 등에 관여하는 비 히스톤 단백질로 되어 있다. DNA 2중 나선의 모양을 띄고 있다. DNA가 히스톤 단백질과 결합하여 뉴클레오솜 형성하며, 뉴클레오솜이 코일 모양으로 감겨 30nm 폭의 염색사를 형성한다. 염색사가 응축되어 굵은 염색체 가닥.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 10. 24.

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  일반생물학실험 | 침샘(타액선)염색체의 관찰 TIP 1. 노랑초파리의 일반적인 특징과 침샘염색체를 관찰할 수 있다. 2. 침샘염색체의 관찰을 통해서 염색체의 구조 및 기능과 유전현상과의 관계를 이해할 수 있다. 초파리의 생활사 초파리는 절지동물문, 곤충강, 쌍시목, 초파리과, 초파리 속으로 분류되며 우리나라에는 초파리과에 속한 8속 16아속 약 100종이 발견, 연구되고 있다. 초파리는 농가에서 누룩으로 식초를 만들 때 모여들므로 초파리, 또는 과일 썩은데 모이므로 과일파리로 보통 불리운다. 초파리 종류 중 모건(Morgan)이 제일 처음 사용한 종류로써 주택 부근에 많은 것은 노랑초파리이다. 따라서 보통 초파리라고 하면 노랑 초파리를 가리킬 정도이다. 이것은 몸빛이 노랑색을 띄우는 까닭에서 이름 지워진 것이며 학명은 Drosophila melan.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 10. 20.

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  유전학실험 | 초파리 염색체 관찰 - 거대 염색체 관찰 TIP 쌍시목 곤충의 애벌레에서 거대염색체를 관찰하여 염색체의 구조를 현미경으로 관찰한다. 초파리의 생활사와 염색체 초파리과 초파리속 에 속하는 파리 종류를 초파리라고 부른다. 초파리는 생활사가 짧고, 변이가 확실하여 유전학에서 연구재료로 많이 이용되고 있다. 초파리는 절지동물문 곤충강 유시아강 신시군 내시류 파리목에 속한다. 몸은 일반적으로 두부, 흉부, 목부의 3 부분으로 나뉘어지며, 두부에는 1쌍의 복안과 1쌍의 촉각, 3개의 단안, 3쌍의 부속지로 된 구기가 있다. 흉부에는 3쌍의 체절과 3쌍의 다리와 2쌍의 날개를 가진다. 복부는 원칙적으로 11체절로 되며, 보통 복부에는 다리를 가지지 않고, 제 8-10절에 생식기를 가진다. 곤충의 날개는 지구상의 각종 생태계에 적응함으로써 보다 다양한 형태로.. Biology/유전학 2022. 10. 17.

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  미생물해양학실험 | PCR TIP 1. PCR과 전기영동법을 이해하고 증폭된 DNA를 관찰하기 위해 실험을 시행함. 2. PCR의 기본 원리와 필요한 성분 및 방법에 대해 조사해보자. 먼저 PCR을 우리말로 바꾸면 중합효소연쇄반응이다. 중합효소연쇄반응(PCR)은 관심 있는 DNA서열을 수백만 벌이나 신속히 생성할 수 있는 기술로, 대장균이나 효모 같은 생물을 쓰지 않고 일정한 Cycle을 반복하여 DNA의 양을 증폭시키는 기술이다. 이 기술은 사람의 게놈과 같은 매우 복잡하며 양이 지극히 미량인 DNA 용액에서 연구자가 원하는 특정 DNA 단편만을 선택적으로 증폭시킬 수 있다. 또한 증폭에 필요한 시간이 2시간 정도로 짧으며, 실험 과정이 단순하고, 전자동 기계로 증폭할 수 있다. 특정 DNA 서열을 증폭하기 위한 방법을 고안하여.. Biology/미생물학 2022. 10. 13.

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  일반생물학실험 | 곰팡이의 분리 및 배양 TIP 곰팡이는 토양, 물, 공기 등의 자연 환경에 널리 분포하고 있으며 세균에 비해 크고 복잡한 구조를 가진 다세포의 균사상 진핵세포 생물로 그 형태가 매우 다양하기 때문에 형태학적으로 곰팡이를 분류하는 것은 실로 매우 중요하다. 배지의 pH를 낮추거나 살리실산나트륨 등의 화학 약품을 첨가하면 세균이나 효모의 발생이 억제되어서 곰팡이를 분리하기가 쉽다. 따라서 곰팡이의 내산성을 이용하여 구연산 발효에 사용되는 흑국 곰팡이를 분리한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 목적하는 장소로부터 토양을 채취한다. 2) 멸균된 생리식염수 10㎖에 1g의 토양을 취해 볼텍스 믹서로 섞는다. 3) 1㎖ Pipette을 이용해 2)로부터 1㎖를 취해서 각각을 2개의 Petri Dish에 넣는다. 4) 하나의 Petri .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 10. 5.

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  생화학실험 | PCR과 전기영동 TIP PCR은 아주 소량의 시료로도 우리가 원하는 DNA 서열을 엄청난 양과 높은 정확도로 증폭시킬 수 있다. 전기영동은 전하를 띤 분자화합물에 일정한 전압을 걸어주어 분자량, 전하량등의 물리화학적 성질의 차이에 따라 분리시키는 방법이다. PCR 정의 PCR(polymerase chain reaction, 중합효소 연쇄반응)이란 DNA polymerase를 이용하여 원하는 부위의 DNA를 선택적으로 대량 복제 하는 방법이다. 1983년 PCR이 고안되어 적은 양으로 존재하는 DNA서열 탐지와 cloning이 가능하게 되었다. 방법은 표적 DNA서열의 증폭(amplification)에 기초를 두고 있다. 증폭하고자 하는 DNA내 표적 strand 3' 말단에 상보적인 두 개의 특정 oligonucleot.. Biology/생화학 2022. 10. 5.

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  일반생물학실험 | 플라스미드의 분리 TIP 세균 DNA를 구성하고 있는 염색체와 플라스미드의 차이를 알고, 이론을 바탕으로 한 플라스미드 DNA를 분리한다. 플라스미드 세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 환형 DNA분자로서, 고리 모양을 띠고 있으며 세균의 생존에 필수적인 유전자는 아니다. 다른 세균세포에서도, 발현이 가능하기 때문에 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 8.000rpm에서 3분 동안 원심분리를 통해 세포를 채취한다. 2) 박테리아 세포 알갱이들을 Buffer P1 250㎕으로 재부유 시킨다. 3) Buffer P2 250㎕.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 10. 4.

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  일반생물학실험 | 향균력 Test TIP YG배지에 Bacillus subtilis을 도말하여 항생제를 떨어 드린 후 clear zone을 확인하여 그 이유를 알아보자. 항생제의 4가지 기본 조건 1. 선택성이 있어야 한다. 2. 잔류독성이 없어야 한다. 3. 어느 정도 기간 이후에는 밖으로 빠져 나와야 한다. 4. 항생제는 종류마다 방법 및 경오가 다르므로, 투여 방법을 자결정해야 한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 균을 YG배지에 도말한다. 2) 네임펜으로 줄을 그은 후 페이퍼 디스크를 올린다. 3) 페이퍼 디스트 위에 항생제를 각각 떨어 드린다. [일반생물학실험]향균력 Test 레포트 2. 실험 이론 및 원리 2.1. 항생제의 4가지 기본 조건 2.1.1. 선택성이 있어야 한다. 2.1.2. 잔류독성이 없어야 한다. 2.1.3... Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 10. 2.

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  일반생물학실험 | Plasmid 분리 실험 & Agarose gel을 이용한 plasmid 전기영동 TIP E.coli를 배양해 플라스미드를 분리하고, 분리한 플라스미드를 직접 만든 Agarose gel을 이용하여 전기 영동한다. 전기영동의 원리 DNA 젤 전기영동 방법은 DNA를 크기에 따라 분리하는 간단한 방법이다. 50V-100V 정도의 전류를 장치에 흘려보낸다. DNA는 기본골격에 있는 인산기 때문에 전기영동에 사용되는 완충용액 속에서 (-)전하를 띠고 있으며 따라서 두 전극 사이에 위치해 있을 때 (+)극 쪽으로 움직이게 된다. 이 때 DNA 분자가 젤 매트릭스를 통과하는 속도는 분자량이 커질수록 늦어지며 젤의 밀도가 클수록 늦어진다. 또한 DNA의 분자량이 같더라도 구조에 따라서 움직이는 속도가 다르다. 예를 들면 supercoil된 DNA는 선형 DNA보다 빠르게 움직이는 것으로 알려져 있.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 10. 1.

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  일반생물학실험 | 원형 DNA인 plasmid DNA Plasmid 세포 내에서 핵이나 염색체와 독립적으로 존재하면서 자율적으로 자가증식해 자손에 전해지는 유전요인이다. 1952년에 미국의 유전학자 J.레더버그가 세균류의 염색체 이외의 유전요인을 플라스미드라고 명명했는데, 최근에는 진핵생물도 포함해 세포질 인자와 같은 뜻으로 흔히 쓰인다. plasmid의 특징은 다음과 같다. 1) 원형의 이중가닥 DNA(circular double-standed DNA)이다 2) 세포내에서 염색체 DNA와는 별개로 존재 3) 자기 스스로 복제가 가능 4) 대부분 세균에 존재하나, 일부 진핵세포에도 존재 5) 복제기점(DNA 복제의 시작점으로 숙주 범위 및 plasmid DNA의 copy를 결정)이 존재한다 6) 항생제 저항성 유전자(R인자)를 가진다. 7) 다중 제한효소 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 30.

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  생화학실험 | Polyacrylamide Gel Electrophoresis TIP 폴리아크릴아미드 젤 영동법에 대해 알고, 만드는 방법을 익힌 후 PCR을 통하여 밴드를 비교해본다. PAGE(Polyacrylamide Gel Electrophoresis)는 Acrylamide와 bis-acrylamide를 중합시켜서 형성된 gel을 이용하여 전기영동을 하는 것으로, 단백질 입자가 acrylamide의 공극 사이를 지나가게 됨으로써 입자가 큰 것은 진행속도가 더디고, 입자가 작은 것은 진행 속도가 빠르게 되며, 같은 크기의 이바이면 하전량이 많은 것이 더 빨리 이동하게 되는 원리를 이용하여 일정시간 동안 움직인 거리에 의해 단백질 종류를 구분하는 방법이다. SDC 등을 사용하지 않으므로 nondenaturing gel electrophoresis 또는 native gel elec.. Biology/생화학 2022. 9. 30.

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  분자생물학실험 | Agarose gel electrophoresis TIP 일정한 pH의 전해질 용액 중에 단백질과 같은 입자를 부유시켜 전기장 내에 놓으면 이 입자는 전하를 띠어 반대 전극으로 이동하는데 이 현상을 전기영 동이라 하고 Agarose gel electrophoresis를 실험하자. 겔 전기영동 겔은 콜로이드(colloid) 용액이 굳어진 상태를 말하는 것이다. 전기영동이란 말은 전기적인 힘에 의해 전하를 띤 입자가 이동하는 것을 가리키는 표현이다. 따라서 겔 전기영동은 전류를 흘려주어서 전하를 가진 입자가 겔 내부에서 이동하여 분리되도록 하는 기술이다. DNA 나 RNA의 경우 주로 아가로스를 사용하고, 단백질의 경우 폴리아크릴아마이드 등을 굳혀서 겔을 만든다. 구조나 크기 등 입자의 성질에 따라서 겔을 통과하여 이동하는 속도가 달라지게 된다. 겔에 홈을.. Biology/분자생물학 2022. 9. 30.

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  일반생물학실험 | Plasmid DNA purification E.Coli 1. BL21은 일반적인 E.coli host와 달리 protease의 활성을 죽여놓아 단백질의 발현에 많이 사용하고 있습니다. 2. 전 생물을 통틀어서 가장 초월적인 번식속도를 자랑한다. 3. 생존능력이 뛰어난데 많은 종류의 유기물을 에너지원으로 사용 가능하고 산소나 온도의 변화에도 강해 다양한 환경에서 서식 가능. 4. 실험실에서 주로 쓰는 K-12 MG1655계열의 대장균의 경우 약 20분에 1번 세포분열을 하며 이 특성과 함께 실험적으로 상당히 쉽게 배양되는 편이라서 생물학 실험에서 잘 쓰인다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) plasmid DNA를 가지고 있는 E.Coli의 단일 콜로니를 접종한 후 Shaking incubator에서 배양한다. 2) Glur-1-CT(5㎖)를 에핀도.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 29.

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  일반생물학실험 | 플라스미드 추출 플라스미드는 생장에 필수적인 염색체이며 DNA에서 물리적으로 분리 돼 있는 대표적인 에피솜 DNA분자라고 한다 1953년에 미국의 유전학자 레더버그가 처음으로 플라스미드를 세균의 염색체 말고 독자적으로 증식을 할 수 있는 DNA 분자라는 의미로 이름을 지었다고 한다. 쉽게 말하면 플라스미드는 세균에서 발견이 되는 염색에 이외에 DNA이고 고리모양의 이중가닥 DNA 모양으로 수천개에서 수만개의 염기쌍으로 이루어져 있다고 한다. 하나의 세포내에 여러 개 존재하고 염색체와는 독립적으로 복제가 된다는 게 특징이다. 또 생존에 필수적이지는 않지만 특정한 환경에서 생존을 하는데 유리한 유전자들이 존재한다. 또 세균에 존재하지만 효묘와 같은 진핵 생물에서도 발견이 된다고 한다. 플라스미드의 형태로는 원형 DNA의 한.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 28.

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  일반생물학실험 | 플라스미드 추출 TIP Mini-prep라 불리는 Alkaline lysis method을 이용하여 Plasmid DNA을 추출한다. Alkaline lysis Alkaline lysis의 기본적인 원리는 세균의 cell wall과 cell membrance을 부수고 DNA만을 분리하는 것이다. 세균이 원래 가지고 있는 chromosomal DNA와 plasmid DNA를 구분하여 분리해야 한다. 이 둘은 모두 DNA이므로 성질이 비슷하기 때문에 구분하여 분리하기가 쉽지 않다. chromosomal DNA는 분리 과정에서 linear형태가 되고 크기가 상당히 크기 때문에 이런 성질의 차이를 이용하면 분리할 수 있다. 실험 방법 1. Spin Down Bacterial cells 1) Harvesting ① 1.5㎖의 b.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 27.

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  일반생물학실험 | 플라스미드 DNA 추출 TIP Alkaline lysis (denaturation) method에 대해 알아보고 이 방법을 통해 플라스미드 DNA를 추출해본다. DNA Mini prep이란 말을 쓰는데 prep은 ‘prepartion’의 줄임말로 DNA를 소량으로 추출한다는 의미이다. plasmid를 추출하는 방법으로는 기본적으로 여러가지가 있지만 그 가운데 대표적인 방법으로 alkaline lysis (denaturation) method가 이용되고 있다. 세포내에 DNA는 일반적인 double-helix를 형태를 가지는 반면 plasmid는 동그란 모양인 supercoiled형태를 가짐으로써 pH의 변화에 따라서도 plasmid의 형태 와 구조가 크게 변하지 않는다는 특징을 가지고 있다. plasmid는 주로 vector로.. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 26.

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  미생물학실험 | Escherichia coli의 순수 분리 및 배양 미생물에 대한 연구 시, 미생물의 생태적, 생화학적, 분자생물학적 등 다양한 생물학적 특징을 밝혀야 하며 이를 위해 목표하는 미생물을 순수 분리하고 배양할 필요가 있다. 다른 종류의 생명체가 섞여 있지 않은 단일 종의 미생물의 배양을 순수 배양이라 하며, 적절한 환경에서 다른 미생물의 노출 및 오염 없이 배양해야 한다. 미생물의 배양은 미생물의 먹이가 되는 배지(media)를 이용하며, 배지의 상태에 따라 액체 배지와 고체 배지로 나눈다. 본 실험에서는 Luria Bertani media (이하 LB 배지)를 이용하여 실험하였으며, LB배지는 Escherichia coli (이하 E.coli)의 생장에 필요한 질소, 탄소, 비타민, 및 무기염류 등을 제공한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 액상의 LB.. Biology/미생물학 2022. 9. 25.

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  미생물생리학실험 | Plasmid Vector 추출 TIP 다양한 vector의 종류 및 쓰임, 추출방법을 익히고, plasmid 추출 kit를 이용하여 직접 plasmid를 추출해본다. Alkaline Lysis 원리 높은 pH의 Alkaline 용액 상태에서 염색체 DNA와 plasmid DNA의 크기 및 topology에 의해 염색체 DNA와 혼합된 상태로부터 plasmid DNA만 분리한다. Alkaline 상태의 Anionic detergent 용액에서 detergent에 의해 세포가 용해된 후 염색체 DNA 와 plasmid DNA 모두 Alkaline 용액에 노출되면 두 형태의 DNA는 모두 변성된다. 이후 산성용액을 혼합하면 염색체 DNA는 크기가 너무 커서 변성 전 정상적인 Topology로 복원되지 못하고 더욱 엉기는 반면 Plasmid.. Biology/미생물학 2022. 9. 24.