반응형 일반화학실험 | 얇은 막 크로마토그래피 TIP 시료와 용매의 분배차이를 이용하여 크로마토그래피의 원리를 이해하고 혼합물을 분리할 수 있다. 얇은 막 크로마토그래피 얇은 막 크로마토그래피는 분배 및 흡착 크로마토그래피가 모두 가능하나 보통 흡착에 의한 것을 많이 사용한다. 흡착 TLC의 고정상은 고체흡착제이다. 이 크로마토그래피에 있어서는 먼저 실리카겔 혹은 알루미나와 같은 고체흡착제를 얇게 바른 유리관을 마련해야 한다. 분석 또는 정제하려는 물질의 용액을 만들고 이 용액을 모세관으로 흡착제를 바른 유리관의 하단 근처에 묻혀 반점을 만든다. 이 관을 전개실의 전개 용매에 담그는데 용매의 액면이 반점밑에 오도록 한다. 그러면 용매는 모세관현상에 의하여 관을 따라 위로 올라가게 되고 시료중의 성분물질들은 서로 다른 속도로 이동하게 된다. 이와 같이.. Chemistry/일반화학 2022. 9. 11. 일반화학실험 | 얇은 막 크로마토그래피 크로마토그래피는 정지상과 이동상을 이용하여 혼합물의 성분들을 분리하여 분석하는 방법이다. 이 방법은 다양한 화학 합성을 통해 얻어지는 혼합물이나 미지의 혼합물의 성분들을 신속하게 분석할 수 있는 유용한 방법이다. 크로마토그래피의 효율은 정지상과 이동상의 종류에 따라 달라질 수 있으며, 실험적으로 간편하게 사용될 수 있는 것은 칼럼 크로마토그래피 또는 얇은 막 크로마토그래피 등이 있다. 크로마토그래피는 1903년 러시아 식물학자 Mikhail Tswett에 의해 분리 기술로 고안되었다. M. Tswett는 칼슘카보네이트 칼럼을 사용하여 식물 pigment의 혼합물을 분리하는 데 성공하였다. 그는 이 실험을 통해 엽록소(chlorophyll)이 단일 화학성분이 아니라는 사실을 입증하였다. 현대에 들어서는 대.. Chemistry/일반화학 2022. 8. 31. 일반화학실험 | 얇은 막 크로마토그래피 TIP 얇은 층 크로마토그래피에 의한 색소의 분리를 통하여 크로마토그래피의 종류와 원리의 개념을 이해한다. 얇은 막 크로마토그래피 박층 크로마토그래피라고도 한다. 유리판에 셀룰로오스 분말이나 산화알루미늄과 같은 얇은 막을 입힌 것을 사용한다. TLC기판의 물질은 이동상인 용매와 고정상인 흡착물질에 의해 경쟁이 일어나 분리된다. 이동거리는 고정상과 이동상에 따라 물질마다 고유의 값을 갖는다. 상당히 작은 화합물까지도 검출할 수 있으며 시료에 따라 지지체를 골라 쓸 수 있으며 이온 교환성을 지닌 물질을 지지체로 사용할 수도 있다. 종이크로마토그래피에 비해 전개 시간이 짧고 분리 능률이 양호하며 강한 염기나 강렬한 시약 등을 발색시약으로 사용할 수 있다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 적색 40호, 황색 5.. Chemistry/일반화학 2022. 8. 3. 유기화학실험 | 시금치 색소성분 분리 시금치 색소 성분 분리 실험은 녹색만 뚜렷하게 보이는 시금치에 어떤 색소들이 혼합되어 있는지 알아보는 실험이다. 녹색은 엽록소, 노란색은 크산토필, 붉은색은 카로틴 성분이다. 노란색과 붉은색을 포함하고 있는데도 녹색으로 보이는 이유는 엽록소가 가장 많기 때문이다. 시든 시금치 잎이 노란색인 것은 엽록소가 파괴되면서 다른 색이 드러났기 때문이다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 막자사발에 시금치 5g + 헥산 20㎖ + 아세톤 20㎖ 를 간다. 2) 10분간 환류시키고 여과 추출 후, 분별 깔대기에 넣는다. 3) 분별깔대기에 헥산 10㎖와 아세톤 10㎖를흔들어준다. 4) 밑의 아세톤층 제거후, 포화 NaCl수용액을 1:1되게 넣어줌 5) 밑의 수층 제거 후, 헥산층에 MgSO4 한스푼 첨가 6) 여과 후,.. Chemistry/유기화학 2022. 7. 14. 일반화학실험 | 종이 크로마토그래피에 의한 금속 이온의 분리 TIP 크로마토그래피의 원리를 알고, 종이 크로마토그래피를 이용하여 금속 이온들을 분리한다. 종이 크로마토그래피의 전개액은 종이를 적시면서 모세관 작용으로 종이 섬유소를 통하여 이동한다. 전개액 속의 물이 셀룰로오스 표면의 히드록실기와의 수소 결합으로 부착되어 물 자체가 새로운 액체 정지상의 역할을 하게 되며, 여기에 시료 분자가 전개액을 따라서 올라오는 동안 정지상으로써의 물 층과 전개액 중의 유기 용매 간에 분배되며 이러한 분배 정도의 차이에 따라 시료의 분리가 이루어진다. 거름종이 위에 묻힌 혼합물이 이동상인 전개액이 전개되는 동안 각 성분이 분리되는 종이 크로마토그래피는 얇은 층 크로마토그래피와 거의 유사하다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 종이 크로마토그래피 하단 약 1㎝ 정도 위에 연필로 연.. Chemistry/일반화학 2022. 4. 1. 일반화학실험 | 크로마토그래피를 이용한 물질의 분리 크로마토그래피는 혼합물을 이루고 있는 각 성분 물질들이 이동상과 고정상에 대한 인력의 크기가 각각 다르기 때문에 차이가 생겨 분리된다. 크로마토그래피는 화학적 성질이 비슷하여 분리하기 어려운 잉크, 엽록소, 당분, 아미노산, 혈액, 비타민, 효소 등의 각 화합물을 분리하는데 유용하다. 또한 매우 적은 양의 물질들이 섞여있는 혼합물도 간단히 분리 가능하다. 크로마토그래피는 시료의 특징에 따라 통과하는 속도가 다르다는 점을 이용해 시료를 분리해내는 방법이다. 이동상은 시료를 함유한 고정상으로부터 시료를 녹여내는데, 용질이 여기를 천천히 지나가 새로운 고정상에 닿으면, 두 상에 대한 물리적·화학적 상호작용의 정도에 따라 흡착 또는 분리가 일어난다. 고정상이 고체인 경우에는 흡착에 의해, 액체인 경우에는 분배에.. Chemistry/일반화학 2021. 8. 28. 일반생물학실험 | Bradford 법을 이용한 단백질 정량분석 - The quantitative analysis of proteins by Bradford method TIP 표준 단백질용액(standard protein solution)을 이용하여 단백질 농도 검량선을 작성하고 미지 시료의 단백질 농도를 측정한다. 단백질 분석 기존 켈달 정량분석 방법에서는 시료 중에 함유되어 있는 총 질소함량을 측정하여 단백질 함량을 계산할 수 있도록 되어 있어서 개략적인 분석만 가능케 되어 있는 단점이 있다. 이러한 단점을 보완하기 위하여 많은 학자들은 순 단백질의 총량을 정량할 수 있도록 하는 새로운 방법들을 개발하고 있다. 이들 중 현재까지 많이 이용되고 있는 몇 가지 방법에는 뷰렛방법, Lowry 방법, 탁도 측정법, 펩티드 측정법, 크로마토그래피, 비색법 및 분광광도법 등을 들 수 있다. 크로마토그래피는 두 개의 서로 다른 상을 이용하여 화합물을 분리한다. 즉, 정지상과 이.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 6. 26. 일반생물학실험 | Paper Chromatography에 의한 물질 분리 TIP 페이퍼크로마토그래피를 이용하여 여러 가지 성분을 가지고있는 물질을 가지고 있는 성분을 대략적으로 분석 하는 것이다. 크로마토그래피 1) 크로마토그래피 원리 크로마토그래피는 혼합물이 분리되는 것은 각 성분들의 이동상에 대한 용해성의 차이와 고정상에 대한 흡착성의 차이 때문에 고정상에 흡착되어 있는 물질을 이동상이 녹여 내면 이동상을 따라 성분 물질들이 움직이게 된다. 2) 크로마토그래피 이용 여러종류의 아미노산을 검출하는데 이용하고 도핑테스트 그리고 각종 비타민, 금속의이온, 당분 지방등을 확인하거나 분리하는 데 이용되고 있다. 3) 크로마토그래피의 종류 종이크로마토그래피 : 종이에 검은 수성 사인펜으로 점을 찍은 후 수직으로 세워놓고 아래 부분이 물에 잠기도록하면 물이 종이를 따라 올라가면서 사인.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 6. 5. 유기화학실험 | 박막 크로마토그래피 - TLC 크로마토그래피 화학에서 가장 기본이 되는 분석 방법으로 그 응용분야가 넓은 학문이다. 크로마토그래피란 두 가지 이상의 성분으로 된 물질을 단일성분으로 분리하는 기법으로써 분리하고자 하는 물질의 각 성분은 두 종류의 상, 즉 고정상과 이동상에 다르게 분포하는데, 이 분포의 차이에 근거하여 분리가 이루어지는 것이다. 시료가 칼럼을 지나는 동안, 각 성분의 이동도 차이를 이용해 혼합물의 각 성분을 분리하는 방법으로 이러한 분리과정은 각 성분의 이동상과 정지상 사이의 분배, 흡착, 이온교환, 시료의 크기 차에 의존한다. 크로마토그래피는 분리뿐만 아니라 물질늬 확인과정에서도 매우 유용하다. 어떤 용매가 10㎝ 이동하는동안 시료 a가 3㎝, 시료 b가 5㎝ 이동했다면 같은 용매가 20㎝ 이동하는 동안 시료 a는 6.. Chemistry/유기화학 2021. 4. 10. 유기화학실험 | 박막 크로마토그래피 TIP 실험을 통해 크로마토그래피의 원리를 이해하고, 크로마토그래피 중에서 가장 간편한 TLC의 활용도에 대하여 생각한다. 박막크로마토그래피 실험의 목적은 실험을 통하여 크로마토그래프의 원리를 분명히 이해하고, TLC의 활동에 대하여 생각하는 것이다. 크로마토그래피는 적절한 정지상과 이동상을 사용하여 시료들이 섞여있는 혼합액을 이동속도 차이를 이용하여 분리하는 방법이다. 이 때 흡착되는 힘이 약한 색소일수록 빠르게 높이 이동하고, 반대로 흡착되는 힘이 큰 색소일수록 느리게 이동한다. 박막크로마토그래피는 흡착제로 실리카겔이나 알루미나와 같은 고체의 고운 가루를 유리판이나 셀룰로이드와 같은 플라스틱판의 표면에 얇은 막이 되게 입혀 거름종이와 같이 사용하는 것이다. 실험은 전개용매를 만들고, TLC판에 시료의.. Chemistry/유기화학 2021. 4. 7. 일반생물학실험 | 지질 아미노산 및 단백질의 정성실험 TIP 1. 크로마토그래피 과정을 상세히 관찰한다. 2. 단백질의 변성과 변성요인에 대해 알아본다. 3. 단백질을 태울 때 냄새와 생성되는 물질에 대해 상세히 관찰한다. 단백질은 생명체에 다량 함유되어 있는 구성성분으로 효소, 에너지원으로 작용하는 등 중요한 역할을 한다. 단백질은 20 종류의 아미노산이 펩티드결합(peptide bond)으로 생성된 중합체로서 구조를 이루어 생체 내에서 가능을 유지한다. 종이 크로마토그래피에 의해 아미노산을 분리하고 닌히드린 반응에 의해 확인하며, 단백질의 정성실험을 실시한다. 실험 방법 1. 아미노산 정성실험 1) 전개병을 준비하고, Whatman No.1 여과지를 전개병에 맞추어 준비하여 아미노산 점적할 곳을 연필로 표시한다. 2) 표시선 위에 아미노산 용액(Pro+.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 1. 25. 일반화학실험 | 색소의 분리와 흡광분석 TIP 1. 화학부문의 연구에 있어서 ‘분리’는 아주 중요한 의미를 지닌다. 화학의 궁극적인 관심사는 물리나 생물과는 달리 원자의 재배열을 통한 화학적 현상 탐구에 있기 때문이다. 이 화학적 현상에는 화합물의 합성, 분해 등 여러 가지가 있는데, 합성과 분해와 같은 화학적 현상의 탐구를 위해서는 반응물과 생성물의 양적 변화를 측정하는 것이 필수적이다. 이런 측정은 혼합물상태보다는 ‘분리’의 과정을 거친 순수한 상태에서 하는 것이 더 쉽고 정확하다. 2. 이런 분리에 사용되는 여러 가지 방법 중 하나가 바로 크로마토그래피이다. 크로마토그래피는 분리하려는 물질들의 고정상과 이동상과의 친화력의 차이를 이용하여 분리한다. 또한 흡광도 분석을 통해서도 정량적인 분석이 가능한데, 크로마토그래피를 이용한 경우는 황색.. Chemistry/일반화학 2020. 12. 27. 일반생물학실험 | 색소 분리 식물은 태양 에너지와 간단한 몇 가지 무기 물질을 이용하여 세포에 있는 엽록체에서 에너지 화합물을 합성하고 그 과정에서 산소를 만들어 내는데 이것을 광합성이라고 한다. 크로마토그래피의 원리 색소 혼합물에 들어있던 색소들은 이동 속도의 차이에 의해 서로 분리 유기용매에 잘 녹는 색소가 덜 녹는 색소보다 멀리까지 이동 실험 방법 1. 광합성 색소의 분리 1) 본 실험에서는 일정량의 시금치를 적당히 잘라 막자사발에서 methanol 10㎖과 chloroform 2㎖을 넣고 (엽록소는 물에는 녹지 않지만, 유기용매에는 잘 녹는다)막자사발로 곱게 간다. 모든 toxic한 유기용매는 첨가나 제거시 흄 hood를 이용한다. 2. 종이 크로마토그래피를 이용한 엽록체 색소 분리 1) 여과지를 세로 12㎝와 가로 1.5㎝.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 12. 26. 일반생물학실험 | 종이 크로마토그래피를 이용한 광합성 색소의 분리 TIP 시금치 잎에서 추출한 광합성 색소들을 종이 크로마토그래피 법을 이용하여 분리하고 색소의 빛의 흡수를 알아본다. 광합성색소 1. 광합성 색소 들은 가시광선의 특정 파장의 빛을 반사하게 되는 데 이 것이 그 색소의 특정 색을 나타내게 된다. 2. 색소들은 특정 파장의 빛을 흡수하여 에너지를 얻는다. 3. 클로로필이 광합성에 직접 참여. 4. 카로틴 계통의 광합성 색소는 흡수한 에너지를 클로로필에 전달. 5. 카로틴 계통의 광합성 색소는 광산화 반응으로부터 클로로필 보호 6. 카로틴 계통의 색소는 비타민A의 전구체. 7. 스펙트럼의 가시영역의 파장을 흡수하는 분자를 색소라고한다. 모든 파장의 가시광선을 가진 하얀 빛이 색소에 투시되면 빛의 어떤 파장은 흡수된다. 산란되거나 통과되는 나머지 파장으로 인해.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 12. 13. 일반생물학실험 | 식물 색소 분리 광합성 반응의 개략 광합성이란 빛에너지를 화학에너지의 형태로 변환시키는, 식물을 포함하여 엽록체를 가지고 있는 생물들이 행하는 동화 반응이다. 엽록체는 현탁액인 스트로마와 그 안에 납작한 주머니 모양이 쌓인 라멜라 구조를 하고 있는 그라나로 이루어진다. 광합성은 명반응과 암반응으로 이루어졌으며 각각 그라나와 스트로마에서 그 반응이 진행된다. 광합성의 전체 식은 다음과 같다. 이 중 물을 광분해하여 산소와 NADH2를 만드는 과정이 명반응이며, CO2로 포도당을 만들어내는 과정이 암반응이다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 시험관에 용매를 5㎖ 넣고 내부에 용매기체가 포화되도록 기다린다. 2) 여과지를 tube에 적당한 크기(1.5 × 12㎝)로 자르고, 한 쪽 끝을 잘라 뾰족한 모양을 이루게 한다. 3).. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 12. 8. 일반생물학실험 | 식물색소의 분리 및 광학적 정성분석 TIP 시금치잎으로부터 chromatography를 해서 색소를 분리해내서 value를 구한다. 그리고 먼저 측정한 spectrum으로부터 661.6, 644.8, 470㎚에서의 흡광도를 찾고 농도를 계산하고 chromatography로 추출한 각 색소의 band가 무엇이었는지를 알아본다. 엽록체의 구조 내막이 변형된 얇은 막이 여러층 포개져 있는 라멜라구조를 이루며, 라멜라의 일부가 부 풀어 형성된 납작한 주머니 모양(원반상)의 틸라코이드(thylakoid)가 있다. 원반상의 틸라코이드가 층층이 쌓여 동전을 쌓아 놓은 것과 같은 그라나를 이루며, 그라 나 주위의 기질로 채워져 있는 공간을 스트로마라 한다. ① grana thylakoid : 틸라코이드가 서로 중첩된 라멜라(lamella), 광합성 색소.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 12. 1. 일반화학실험 | HPLC에 의한 아데닌과 카페인의 분리 TIP 1. 혼합물을 이룬 여러 가지 물질을 알아내고자 할때 사용하는 방법 중 하나인 크로마토그래피는 다양한 분야에서 활용되고 있는 도구이다. 2. HPLC (High Performance Liquid Chromatography)를 이용하여 아데닌, 카페인의 구조와 elution time과의 관계를 알아보고, 각각의 흡수 스펙트럼을 얻은 후 커피 한 잔에 포함된 카페인을 정량해본다. 본 실험을 통해 극성, 무극성, 분자간 상호작용의 개념을 체험적으로 학습한다. 실험 1을 통해 아데닌과 카페인의 구조와 그에 따른 극성 정도를 비교 실험 2을 통해 아데닌과 카페인이 가장 최대로 흡수하는 파장의 빛을 흡수하는 지 알아본다. 실험 3을 통해 농도비와 흡광도 비를 관련하여 커피 용액에 함유되어 있는 카페인의 양을.. Chemistry/일반화학 2020. 11. 26. 유기화학실험 | 크로마토그래피와 이성질체 TIP 전개용매의 혼합비와 화합물 종류에 따른 전개 경향성을 알아본다. 크로마토그래피(Chromatography) 모든 과학 분야에서 널리 이용되고 있는 분석 방법으로써 소량으로 화합물을 확인하고, 많은 종류로 이루어진 혼합물을 분리하는데 사용하고 있다. 크로마토그래피는 상 분배 원칙에 근거하여 정지상 (stationary phase)과 이동상 (mobile phase) 사이의 물질의 분배를 수반한다. 크로마토그래피 중 얇은 층 크로마토그래피는 유리판 위에 실리카 겔이나, 알루미나 가루를 바인더로 이용하여 만든 고체 - 액체 흡착 크로마토그래피이다. 얇은 층 크로마토그래피에서 정지상 (고체)은 실리카 겔 층이고 전개용매는 이동상 (액체)이며, 실리카 겔 층 밑의 유리는 단순히 지지체이다. 분석물질은 모세.. Chemistry/유기화학 2020. 9. 27. 이전 1 2 다음 반응형
