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  일반생물학실험 | 엽록소 함량 측정 및 기공의 개폐작용 TIP 1. 엽록소 함량 측정 - Spectrophotometer의 사용방법을 익히고 이것을 이용한 분석방법을 배운다. 2. 기공의 개폐작용 - 식물의 잎에서 CO2와 H2O의 교환장소인 기공의 해부학적 구조를 관찰하고 기공의 개폐에 미치는 환경요인 등을 알아본다. 기공 숨구멍이라고도 한다. 식물의 표피세포가 특수한 분화(分化)를 함으로써 공변세포(孔邊細胞)가 생기는데 이 공변세포 사이에 만들어진다. 식물체내의 조직과 외계(外界) 사이의 가스 교환을 담당한다. 공변세포에 접하고 있는 몇 개인가의 표피조직의 세포가 다른 표피세포와 다소 다른 모양의 경우가 많은데, 이러한 세포를 부세포(副細胞)라고 한다. 부세포의 유무와 수(數), 기공의 배열상태 등은 식물의 종류에 따라 다르다. 기공은 잎에 많이 존재하는.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 8. 2.

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  일반생물학실험 | 세포의 에너지 합성 - 엽록소 분리와 함량 측정 TIP 1. 종이 크로마토그래피를 이용하여 시금치 잎에서 광합성 색소를 분리하고 색소의 빛 흡수를 알아본다. 2. 분광광도기를 이용한 시료 분석방법을 배운다. 광합성 색소(엽록소) 광합성은 엽육세포의 엽록체라는 소기관에서 수행된다. 엽록체의 내막인 틸라코이드막은 빛에너지를 흡수하는 데에 필요한 광합성 색소 를 가지고 있다. 주요 광합성 색소로는 엽록소 a, 엽록소 b와 카로틴계 색소 등이 있다. 카로틴계 색소에는 β-카로틴, 크산토필, 루테인, 리코펜 등이 있다. 광합성 색소들은 각기 특정한 파장의 빛을 흡수한다. 예를 들면, 엽록소 a는 430㎚ 파장의 빛과 663㎚ 파장의 빛을 최대로 흡수한다. 광합성 색소들은 화학 구조에서 볼 수 있듯이 대부분 지용성 분자들로 여러 가지 유기용매에 녹는 정도가 다르.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 8. 1.

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  일반생물학실험 | 해수의 영양염 분석 질산(암모늄, 질산염, 아질산염), 인 등을 포함하는 영양염이 플랑크톤 류와 조류 등의 먹이원이 되기 때문에 플랑크톤, 조류의 생산성을 좌우하게 되고 생산이 과잉되거나 적어지면 해양 환경에서 다양한 파래 대발생이라든지 적조, 녹조 등을 야기할 수 있기에 해수의 영양염을 측정하게 된다. 실험 방법 1. 실험 과정 제주도 시흥해역의 해수의 영양염을 분석한다. 암모늄 = Sample water 2.5㎖ Add 0.1l pheol alcohol, vortex and wt 1 minute Add 0.1l sodum nitroprusside solution, ortex an wait minute Add 0.25m oxidizing solution → 10.0㎖ alkaline solution 2.5㎖ chlorox.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 31.

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  일반생물학실험 | 아밀라아제의 활성과 온도 TIP 아밀라아제의 온도와 소화 효소의 관계를 실험해본다. 아밀라아제 소화효소(amylase) 녹말에 침을 섞어 따뜻하게 하면 아이오딘반응이 일어나지 않는데, 그 이유는 침 속의 아밀라아제의 작용 때문이다. 침 1ℓ 속에는 약 0.4g의 아밀라아제가 들어 있는데, 침이나 위액 속의 아밀라아제는 녹말을 가수분해하여 말토스를 생성하므로 소화작용에 있어서 꼭 필요하다. 아밀라아제는 고등동물뿐만 아니라, 고등식물·곰팡이·세균 등 자연계에 널리 분포한다. 다카미네[高峰讓吉]는 누룩곰팡이가 배양액에 다량의 아밀라아제를 분비한다는 것에 착안하여 타카디아스타아제(takadiastase)라고 하는 소화제를 만들었다. 또 어떤 종의 곰팡이의 아밀라아제는 녹말을 거의 완전히 가수분해하여 포도당(글루코스)으로 변화시키므로 포.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 28.

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  일반생물학실험 | Cell lysis, Bradford Assay TIP Transfection, harvest가 잘 이루어졌는지 알기 위해 cell lysis를 하여 lysate를 얻고 Bradford assay를 통해 protein을 측정한 후 loading sample을 완성한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) lysis buffer를 계산하여 만든다 2) Deep freezer에 얼려놓은 sample을 가져온다. 3) sample이 어느정도 녹은 후 만들어 놓은 lysis buffer를 140㎕씩 넣는다. 4) Pipetting을 하여 바닥에 붙은 cell을 떨어뜨리고 전부 E-tube에 담는다. 5) E-tube를 약 5초간 vortexing하고 ice에 넣어 10mins 기다린다. 6) Centrifuge (12500rpm, 12mins, 4℃) 7) Pe.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 27.

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  일반생물학실험 | 혈관, 혈액, 혈액형과 유전자 빈도 TIP 혈관 및 혈액에 대해 알아보고 혈액형의 판정과 유전자 빈도를 조사한다. 혈액의 구성 사람의 혈액은 무게가 체중의 8%를 차지하며, 물보다 점성이 5～6배 크고 pH는 약 7.4이다. 1. 혈구(blood cell) ① 적혈구(erythrocyte, red blood cell; RBC) : 직경이 6～8㎛ 정도인 가운데가 오목한 원반형이며, 핵이 없다. 적혈구는 혈구 중 가장 그 수가 많아서 혈액 1㎕ 당 약 400만～600만 개가 들어 있다. 적혈구에는 산소를 운반하는 혈색소인 헤모글로빈이 들어 있기 때문에 붉게 보이며, 그 결과 혈액 전체도 붉은 색을 띤다. ② 백혈구(leucocyte, white blood cell; WBC) : 백혈구는 직경이 12～25㎛ 정도로 모양이 일정하지 않으며 핵을.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 26.

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  일반생물학실험 | 발효와 호흡 TIP 발효와 호흡과정의 속도 비교와 함께, 발효의 산물에 대해 알아보고, 발효와 호흡의 차이를 알아보자 살아 있는 세포를 위한 가장 보편적인 연료는 포도당이다. 많은 다른 화합물은 먹이로서 제공된다. 그러나 이들의 거의 모두는 포도당으로 전환되거나 포도당 대사의 한 단계 한 단계에서 중간 대사물로 전환된다. 이 과정에서 세포는 ATP라는 형태의 에너지를 수확하게 된다. 기본적으로 세포의 이러한 연료전환 과정에는 발효와 호흡 과정이 포함되는데, 먼저 호흡은 산소를 이용할 수 있을 때 작동하여 이산화탄소와 물을 방출한다. 그리고 이것은 피루브산 산호, 시트르산회로, 호흡 사슬의 과정으로 구성된다. 다음으로 발효는 산소가 없는 조건하에서도 세포가 살아남기 위하여 에너지 생산과정을 하는 과정이다. 이 과정은 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 24.

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  일반생물학실험 | Transformation - bacterial genetics TIP E.coli의 일종인 DH5α를 transformation하고, LA배지와 LK배지에 배양하여 콜로니가 형성되는지 관찰한다. Transformation 원래 Transformation은 형질전환이란 말이다. 형질전환은 외부로부터 주어진 DNA에 의하여 생물의 유전적인 성질이 변하는 일을 말한다. 다당류로 이루어진 두꺼운 막, 즉 협막을 가진 S형균으로부터 DNA를 추출하여 이것을 다당류성 협막을 가지지 않은 R형균에 작용시키면 R형균의 일부가 S형균으로 변한다. 이것은 S형 세균의 DAN 가 R형 세균 속에 들어가서 유전자 발현을 하기 때문이다. 전환을 일으키는데 필요한 DNA의 최소량은 약 10만분의 1 mol이며, DNA의 single strand를 주는 것보다도 double strand를 주.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 22.

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  생화학실험 | α-glucosidase 저해 평가 TIP α-glucosidase를 억제하면 빵, 감자, 파스타와 같은 녹말이 장에서 분해되는 것을 막아준다. 즉, 식사 후에 혈당이 증가하는 것을 늦추어 혈당을 낮추는데 도움을 준다. 그러므로 당뇨병이 있는 경우 약물로 사용할 수 있다. 실험을 통해 분광광도계를 이용한 α-glucosidase의 저해를 측정한다. α-글루코시다제(α-glucosidase) 글루코시드 가수분해 효소를 가리킨다. 비환원 말단에 존재하는 α-D-글루코시드 결합을 가수분해하여 α-형 글루코오스를 생성하는 효소의 총칭. 단순히 글루코시다이제라고 불리는 경우도 있다. 동물, 식물. 미생물계에 널리 분포한다. 아밀라아제의 작용으로 생긴 올리고당의 글루코오스에의 분해와 배당체의 분해에 중요한 역할을 한다. 배당체와 글루코시드 결합의 종.. Biology/생화학 2021. 7. 22.

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  일반생물학실험 | 발효균의 관찰 TIP 현미경의 구조 및 사용법을 익혀 생물학 실험의 원활한 진행을 할 수 있으며 막걸리 속의 효모를 관찰함으로써 주의 사항을 습득한다. 효모의 특성 효모는 곰팡이와 같은 진균류(fungi)에 속하지만 일반적인 곰팡이와 달리 균사를 만들지 않고 단세포로 되어 있고 증식은 주로 출아법(budding)에 의한다. 효모는 공기의 존재와 무관하게 자라는 통성 혐기성 미생물로서 알코올발효능이 강한 종류가 많아서 예부터 양조, 알코올제조 제빵 등에 이용되어 왔으며 균체는 식량 및 사료용의 당백질, 비타민, 핵산물질의 원료 등으로 이용되기도 한다. 때로는 된장, 간장, 맥주, 포도주, 청량음료, 꿀 등을 변질시키기도 한다. 세포 형태는 구형이나 타원형을 나타나는 것이 많지만 소시지(sausage)형와 레몬형 등 다양.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 21.

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  생화학실험 | Elastase 저해 활성 평가 TIP 펩타이드는 단백질 성분으로, 길고 짧은 아미노산으로 구성되어 있다. 단백질층을 쌓아주는 역할을 한다. 대부분의 펩타이드는 수분 결합(수분을 끌어들이는) 기능을 한다. 그리고 이론적으로는 피부 손상을 복구하라고 명령하는 세포 대화 성분이다. 이러한 이유로 주름개선효과를 내고 싶다면 펩타이드의 분열을 저해해야 한다. 펩타이드의 분열을 저해하는 방법 중 하나는 펩타이드 결합의 분열하는 과정에서 촉매역할을 하는 효소인 Elastase를 저해하는 것이다. 실험을 통해 분광광도계를 이용한 Elastase 활성 저해를 측정한다. 엘라스틴(Elastin) 엘라스틴은 콜라겐과 함께 결합조직에 존재하고 고무탄력성과 같은 신축성이 있는 단백질이며 조직의 유연성, 신축성에 관여하고 있다. 따라서 신축이 항상 반복되는 .. Biology/생화학 2021. 7. 21.

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  일반생물학실험 | Transformation - 미생물에서 재조합 단백질 발현 TIP  E.coli의 transformation 실험을 통해서 유전 공학에 많이 쓰이는 transformation의 기작을 이해하고, 그 방법을 익힌다.   형질전환(TRANSFORMATION)형질전환이란 수용세포에 노출된 DNA가 흡수, 통합, 발현되는 과정을 나타내며 몇몇의 박테리아 사이에서 자연적으로 일어나는 현상이다 (예로 Stretococcus와 Bacillus). 대장균을 포함한 다른 종은 외부DNA를 흡수할 능력이 없다. 이러한 한계점을 극복하기 위해서 수용세포로 DNA를 삽입하기 위한 인공적인 방법이 고안되었고 수많은 실험생물에 적용되었다. 움직이게 할 수 있는 DNA의 2번째 방법인 형질전환은 1928년 Fred Griffith에 의해 발견되었다.  형질전환은 유전자 형태에서 수용성 C.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 20.

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  생화학실험 | DPPH 소거능 TIP 인간을 포함한 생물은 호흡이라는 과정을 통해 ATP 등의 에너지를 얻는다. 이러한 과정에 필연적으로 흡입된 산소의 2%를 활성산소로 변환시켜 지니게 되고 이 활성산소는 Free radical을 가진 산소를 의미한다. free radical은 세포막 산화, 촉진, 노화, DNA 변형 등의 문제를 야기한다. 실험을 통해 분광광도계를 이용한 free radical 소거능력을 측정한다. DPPH (2,2-diphenyl hydrazy)는 안정한 유리기(stable free radical)로서, 분자 내 비공유 전자(N∙)를 갖고 있으나 전자나 free radical과 반응하면 안정한 구조 (N-H)로 변한다. DDPH는 수용액 상태에서 보라색이지만, free radical이 소거되면 전자공여능(elect.. Biology/생화학 2021. 7. 20.

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  일반생물학실험 | 소화 효소의 활성과 온도 TIP 아밀라아제의 온도와 소화 효소의 관계를 실험해본다. 소화 몸이 흡수할 수 있을 정도의 작은 분자로 음식물을 잘게 부수는 과정으로 이러한 소화를 통해 고분자를 구성 단량체로 쪼개어 자신의 물질을 만드는 데 사용하거나, ATP를 생산하는데 사용한다. 1. 세포내 소화 : 내부에 세포 자체의 세포질을 소화시키지 않고 음식을 부수는 가수분해효소가 들어있어서 세포내에서 소화시키는 소화이다. 해면동물은 음식을 세포내 소화를 통해 소화시키는 동물이다. 2. 세포외 소화 : 세포외 소화는 동물의 외부와 연속적으로 연결된 구획 내에서 일어난다. 이러한 구획을 가지는 소화는 세포내 소화보다 더 큰 음식을 먹을 수 있게 해준다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 실험에 필요한 아밀라아제용액, 요오드용액, 베네딕트용액을.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 19.

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  일반생물학실험 | 뿌리 세포 관찰을 통한 체세포 분열 과정의 이해 TIP 양파의 뿌리로부터 표본을 만들어 체세포 분열의 과정을 직접 관찰하고, 체세포 분열의 각 시기를 관찰하고 구분함으로써 체세포 분열의 의미를 이해한다. 세포 분열 1. 핵분열 : 세포질분열(식물세포: 세포판형성, 동물세포: 원형질함입) 핵분열의 각 시기로써 연속적으로 일어난다. 핵분열 과정은 염색체의 행동을 중심으로 전기, 중기, 후기 말기로 구분한다. ① 전기 : 염색사가 응축하여 염색체를 형성한다. 염색체는 세로로 갈라져 두 개의 염색분체로 구성되어 있으며 각 염색분체에는 S기에 복제된 동일한 DNA분자가 들어있다. 핵막과 인이 사라지고 방추사가 나타난다. 동물세포에서는 중심립에서 가느다란 실 모양의 방추사가 뻗어 나오고, 식물세포에서는 양극에서 극모가 나타나 여기에서 방추사를 형성한다. ② 중기.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 19.

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  생화학실험 | ABTS 라디칼 소거능 TIP 인간을 포함한 생물은 호흡이라는 과정을 통해 ATP 등의 에너지를 얻는다. 이러한 과정에 필연적으로 흡입된 산소의 2%를 활성산소로 변환시켜 지니게 되고 이 활성산소는 Free radical을 가진 산소를 의미한다. free radical은 세포막 산화, 촉진, 노화, DNA 변형 등의 문제를 야기한다. 실험을 통해 분광광도계를 이용한 free radical 소거능력을 측정한다. 항산화제(Antioxidant) 항산화제는 산화를 방지하는 물질을 총칭하여 일컫는 말이다. 생체 내에서의 산화 반응은 주로 라디칼이 관여하는 연쇄 반응(chain reaction)을 통해서 이루어지며, 궁극적으로는 세포에 피해를 주게 된다. 싸이올(thiol)이나 아스코르브산(ascorbic acid, 비타민 C)과 같은.. Biology/생화학 2021. 7. 19.

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  생화학실험 | DPPH를 이용한 항산화 테스트 TIP 일상생활에서 사용하는 물질을 DPPH용액을 이용하여 항산화 능력을 테스트해보고 비교해보기 활성산소 활성산소는 산소 원자를 포함한, 화학적으로 반응성 있는 분자로 반응성이 강하고 다른 유기물과 반응하는 물질이다. 생물체내에서 생성되는 산소의 화합물로 생체 조직을 공격하고 세포를 손상시키는 산화력이 강한 산소이다. 산소가 4개의 전자를 받으면서 독성이 없는 H2O를 만드는 도중에 생겨나는 부산물이다. 반응성이 높은 활성산소는 세포에 독성을 일으킬 수 있지만, 건강한 정상 세포 내에서는 대부분 분해되어 제거된다. 세포 내에서 ROS는 생성과 소멸의 균형에 의하여 일정 소량의 활성산소의 양이 존재하고, 이를 통해서 생리현상을 유도한다. 활성산소의 농도는 자외선이나 높은 열에 노출되는 것처럼 환경적인 스트.. Biology/생화학 2021. 7. 19.

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  일반생물학실험 | 양파 근단 세포의 유사분열 관찰 TIP 체세포의 세포분열 과정인 유사분열의 전 과정을 관찰하고 염색체의 구조와 기능을 이해한다. 동물세포와 식물세포 세포질 분열 1. 동물세포 세포질 만입은 세포막이 밖에서 안으로 함입하여 들어오면서 세포질을 분리함으로 2개의 딸세포를 형성한다. 세포의 양극 사이의 중앙부에서 액틴 필라멘트가 세포의 주위를 띠 모양으로 둘러싸고 이 띠가 수축함에 따라 세포가 함입되는 것이다. 2. 식물세포 세포판 형성으로 세포의 중앙에 세포판이 만들어지고, 이것이 바깥쪽으로 성장하여 세포질을 분리함으로써 2개의 딸세포를 형성한다. 식물세포는 세포벽으로 둘러싸여 있기 때문에 단순한 응축에 의해 세포질 분열이 일어날 수 없다. 대신에 막으로 둘러싸인 세포판을 형성하게 된다. 이 세포판은 골지체로부터 조그마한 막성 소낭이 추적.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 15.