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  일반생물학실험 | 효모 관찰 TIP 막걸리 속 효모를 관찰함으로써 효모의 생활사 및 생물학적 특징을 알아본다. 효모의 종류 및 특성, 그리고 이용 1. 유포자 효모류 : 포자는 동태 접합에 의하여 형성되며 자낭중에 4∼8개의 구형, 타원형 또는 신장형의 포자를 내장한다. 무성생식은 출아법이 아닌 분열법에 의하여 그 자체가 분열자이다. 2. 담자균류 효모류 : 발효성이 없으며 고체배지에서 carotenoid 색소를 형성하고 오렌지색 또는 분홍색을 띤다. 3. 사출포자 효모류 : 발효성은 없으며 영양 증식은 출아 증식에 의한다. 사출포자는 좌우 대칭의 레몬형이다. 4. 무포자 효모류 : 세포는 구형이나 난형 또는 길쭉한 모양이며 위균사는 형성하지 않지만 점조성의 협막을 형성하므로 집락은 점질이며 때로는 carotenoid성의 황색을 띠.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 7. 12.

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  분자생물학실험 | Restriction digestion TIP 1. Plasmid DNA를 restriction enzyme(제한효소)로 처리하여 restriction enzyme의 특성과 plasmid의 특성을 이해한다. 2. Agarose gel 전기영동의 원리를 이해하고, 크기와 모양에 따른 DNA의 위치를 통하여 제한효소 지도를 작성한다. 실험 배경 restriction enzyme은 특이성에 따라 DNA의 특정한 site를 찾아서 잘라준 다. 이 실험에서 쓰이는 enzyme은 DNA상에서 특정한 site를 인식하여 T 와 C사이의 phosphodiester bond를 끊어준다. 그렇게 끊어주면 circular한 plasmid DNA는 잘려서 linear한 형태로 나타난다. agarose gel electrophoresis은 DNA 조각을 분리하고 인.. Biology/분자생물학 2023. 5. 17.

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  생화학실험 | 단백질 분리정제 및 기능분석 - buffer 만들기 TIP 1M의 Tris-HCl (pH7.4), NaCl, MgSO4, Stock solution 을 제조한 후 다양한 NaCl 농도의 elution buffer 를 만든다. DEAE sepharose anion exchange chromatography 이온-교환 크로마토그래피(ion-exchange chromatography)법은 주어진 pH에서 단백질이 가지는 알짜 전하(net electric charge)의 하전성과 전하량의 차이에 의해 분리하는 방법이다. 관 속의 기질은 합성 중합체(수지,resin)로서 전하를 띤 기를 가지고 있는데; 양이온 기를 가지는 경우 양이온 교환체(cation exchanger)라고 부르며, 음이온 기를 가지는 경우 음이온 교환체(anion exchanger)라고 부른다.. Biology/생화학 2023. 4. 11.

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  보건환경미생물실험 | 수소 이온 농도(Hydrogen Ion Concentration) TIP 1. pH 미터를 통해서 검수의 pH값을 측정하고, 검수에 들어 있는 수소 이온의 농도를 측정한다. 2. 측정한 값을 통해 검수의 산의 정도(수소의 활동도)를 파악하고, 사용 여부를 알아낸다. 측정 원리 반응물이 산 또는 염기인 경우에는 적정법을 이용하여 농도를 측정할 수 있다. 적정법은 농도를 정확하게 알고 있는 용액과 반응하는 다른 용액의 부피를 정확하게 측정하는 데 쓰인다. 이 방법은 반응물 사이의 몰 관계를 이용한 부피분석이라고 할 수 있다. 보통 적정법에서는 온도와 부피를 정확하게 알고 있는 표준용액에 지시약을 넣고 미지농도의 시료용액을 반응이 완결될 때까지 넣어 미지농도의 시료용액의 부피를 정확히 측정한다. 이때 지시약은 반응이 완결되는 시점에서 색변화를 일으킨다. 산-염기 적정에서 산.. Biology/미생물학 2023. 4. 4.

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  생화학실험 | 단백질의 정량분석 TIP Lowry method와 Bradford method를 사용하여 단백질(protein)의 농도를 측정한다. 단백질의 정량 시료 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정으로 280 ㎚에서 흡광도를 측정하는 방법과 단백질의 농도에 따른 색의 변화를 이용하여 분석하는 방법이 있다. 색의 변화를 이용하는 비색정량분석 (colormetric analysis)에는 Bradford법, Biuret법, Lowry법, Bicinchoninic acid법 등이 있다. 280 ㎚의 파장에서의 흡광도 측정 방법은 tyrosine이나 tryptophan 잔기의 흡광도를 측정하는 방법으로 장점으로는 분석이 빠른 것을 들 수 있으며, 단점으로는 tryptophan의 함량 변화에 따라 흡광도가 틀려지고 같은 파장의.. Biology/생화학 2023. 3. 30.

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  생화학실험 | 단백질 정량(Lowry 법) TIP 어수리의 추출 희석액으로부터 어수리의 단백질을 Lowry법으로 정량한다. Lowry법 알칼리성에서 단백질의 peptide 결합과 구리가 반응하여 Cu2+이온을 생성하는 Biuret 반응의 원리를 이용한 것이다. 발색의 정확한 기작은 밝혀지지 않았지만 Cu2+ 이온은 방향족 아미노산의 산화를 유도하여 phospomolybdotungstate를 푸른색의 heteropolymolybdnum으로 환원시킨다. 이러한 반응 결과 강한 푸른색을 생성하며 그 강도는 tryptophan과 lysine양에 영향을 받는다. 이 방법은 단백질의 농도가 0.01～1.0㎎/㎖의 경우에 측정가능하다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 교반 추출액(10000ppm 용액)을 1000ppm으로 희석하여 마이크로튜브에 넣고 Vort.. Biology/생화학 2023. 3. 24.

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  미생물실험 | Gram staining과 현미경을 이용한 관찰 TIP 현미경을 이용하여 gram staining을 한다. Gram positive 와 negative bacteria의 차이점 특 성 Gram 양성균 Gram 음성균 1. 세포벽 구조 두께(15∼80nm), 단층(single layer) 두께(15∼80nm), 삼층(triple layer) 2. 세포벽 조성 저지질(1∼4%). Peptidoglucan은 단층에 존재한다. 주성분은 세균 세포의 건물량의 50% 이상, teichoic acid가 있다. 고지질(11∼22%). Peptidoglucan은 내부 강인층에 존재한다. 주성분은 세균 세포의 건물량의 10% 정도, teichoic acid가 없다. 3. Penicillin에 대한 감수성 보다 많은 감수성이다. 보다 적은 감수성이다. 4. 염기성 색소에.. Biology/미생물학 2023. 3. 23.

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  일반생물학실험 | Lycopene 배양 및 추출 발효와 부패의 차이 발효는 미생물의 작용에 의해 유기물이 분해되어 사람에게 유용한 물질이 생성되는 현상이다. 특정한 조건(온도, 시간, 무산소상태)에서만 발효가 일어나며, 발효균은 초산과 젖산, 알코올 등 좋은 효소를 분비하여 유해균을 무력화시킨다. 발효를 이용하여 만든 음식은 대표적으로 치즈, 요구르트, 막걸리, 와인, 맥주, 김치 등이 있다. 부패는 생물의 유해나 배설물 등 질소를 함유하는 유기물질이 혐기성 세균에 의해 불완전하게 분해되는 현상이다. 혐기성 세균에 의해 유기물질이 펩톤, 아미노산 등으로 분해되면서 아민, 황화수소가스, 암모니아가스, 메탄이 형성되어 악취가 풍기고 유해한 독성 물질이 발생한다. 실험 방법 1. lycopene 배양 1) 배양조건을 확인하고 배지를 만든다. Strain D.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 3. 20.

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  일반생물학실험 | 혈액 혈구 관찰 TIP 직접 혈액의 혈구를 관찰해보는 등 혈액에 관한 전반적인 것을 이해한다. 혈액의 구성 사람과 같은 다세포 생물은 개개의 세포가 모두 주위 환경과 직접 물질 교환을 할 수 없으므로, 몸을 구성하는 세포 사이를 순환하면서 물질 교환이 가능하도록 해주는 체액이 필요하다. 사람의 몸속을 흐르면서 물질의 교환을 담당하는 체약에는 혈관 속을 흐르는 혈액, 림프관 속을 흐르는 림프, 조직 세포들 사이에 존재하는 조직액이 있다. 이 중 혈액은 세포 성분인 혈구(blood cell)와 세포간 물질인 혈장(plasma)으로 이루어져 있다. 사람의 혈액은 그 무게가 체중의 약 8%를 차지하며 물보다 점성이 크고(5～6배), pH는 약 7.4이다. 혈액을 뽑아서 시험관에 넣어 방치해 두면 잠시 후 혈액 응고가 일어나 상.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 3. 9.

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  일반생물학실험 | 혈구 세포 관찰 TIP 1. 혈액의 조성을 알아보고 혈액 내에 있는 세포의 종류와 기능을 알아본다. 2. 현미경을 이용해서 혈구세포를 관찰하고 형태적 특징을 살펴본다. 혈소판 혈소판은 염색 후 현미경으로 보면 자줏빛을 띄는 미세한 과립의 형태를 하고 있으며 크기는 약 2～3㎛로 적혈구의 5분의 1 정도로 매우 작다. 혈소판의 외피는 일종의 당단백질로 이루어져 있는데 이는 혈소판의 부착과 응집을 주도하는 중요한 역할을 담당한다. 내부에는 혈소판의 기능에 관여하는 여러 가지 물질과 각종 응고인자들이 함유된 과립이 들어 있다. 혈소판은 출혈이 생겼을 때 가장 먼저 작용하는 일차 지혈과정을 담당한다. 혈관이 손상되면 이 부위에 혈소판이 부착되면서 내부에서 섬유소원, 트롬빈 등 각종 화학물질을 분비하여 혈관 수축과 추가 혈소판 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 3. 8.

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  식물생리학실험 | 식물의 모델 생물 - 애기장대 파종 TIP 1. 식물의 모델 생물로 사용되는 애기장대의 형태학적 특징과 이를 통해 밝혀진 중요한 생물학적 기작들 그리고 새로운 실험기법들에 대해 이해하여 본다. 2. 애기장대의 씨앗 발아와 지상부 중 잎과 꽃의 형성에 대해 알아본다. 애기장대 애기장대 (Arabidopsis thaliana)는 겨자 과에 속하는 일년생으로 식물의 대표 모델생물 (model organism)의 하나로 사용된다. 애기장대는 작은 크기, 짧은 세대, 작은 게놈(genome), 높은 생식력, 교배의 용이성, 고효율의 형질전환 등 일반적인 모델 생물의 장점을 갖고 있다. 애기장대를 이용한 다양한 실험을 통해 뿌리의 발달 (root development), 개화 유도 (floral induction), 꽃의 발생 (flower deve.. Biology/그외 생물학 2023. 3. 7.

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  분자생물학실험 | 성장곡선 그리기 TIP 배지 속 세균의 성장을 흡광도를 측정하여 그래프를 작성 및 해석해보자. 생장 곡선 1. lag phase 균을 새로운 배지에 접종하여 배양할 때 배지에 적응하는 시기로서 세포가 새로운 환경에서 증식하는데 필요한 각종 효소 단백질을 생합성하는 시기이다.분열을 위해 세포의 크기가 커지고 호흡활성 도가 높아지는 시기이며, 세포내의 RNA양은 현저하게 증가하고 효소단백질 합성이 왕성해진다. 2. exponential phase 미생물의 발육 과정에서 속도가 최대가 되는 시기. 균의 세대시간이 가장 짧고 대사산물이 원형질의 합성에 가장 잘 이용되는 시기이다. 3. stationary phase 세균이나 세포가 증식할 때에 대수증식기를 경과하면 분열, 증식이 정지하여 개체수의 증가가 나타나지 않는 상태를 유.. Biology/분자생물학 2023. 3. 7.

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  일반생물학실험 | 혈액형 판정법과 혈구세포 관찰 TIP 혈액형 판정을 하기 위해 기본적으로 알아야 할 혈구세포에 대해 조사하고, 항원과 항체에 대한 개념을 숙지하여 응집 유무에 따라 혈액형을 판정할 수 있음을 안다. 수혈관계 다른 ABO식 혈액형끼리 수혈을 할 때 혈액이 응집되면 안되므로 다른 혈액형 끼리는 혈액이 다량 응집되지 않는 선에서 소량 수혈을 한다. 같은 혈액형 끼리는 다량 수혈이 가능하다. Rh혈액형에서는 Rh⁻형이 응집원이 들어오면 후천적으로 응집소가 생겨 응집되므로 Rh⁻형에서 Rh⁺형으로의 수혈만 가능하다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 홈 받침 유리 위에 항A혈청, 항B혈청, 항Rh혈청을 각각 한 방울씩 떨어뜨린다. 2) 왼쪽 검지손가락을 70% 에탄올로 소독한 후 채혈침을 이용하여 피를 낸다. 3) 홈 받침 유리 위의 혈청에 각.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 3. 7.

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  생명화공실험 | 완충용액 TIP 완충용액을 제조하는 방법을 익히고 완충용액의 특성을 파악하는 것이다. 실험 요약 pH 측정기, NaOH 용액, HCl 용액, Sodium acetate trihydrate, Glycine 등을 이용하여 완충용액을 제조하는 방법을 익히고 완충용액의 특성을 파악해보았다. 각각의 완충용액을 제조하여 Sodium acetate trihydrate 완충용액에는 NaOH를, Glycine 완충용액에는 HCl을 가해주어 완충용액이 더 이상 완충작용을 하지 못하는 부분이라 생각할 수 있는 용액의 pH가 급변하는 지점을 관찰해본 결과, 완충용액의 농도와 완충 값 사이에 비례관계가 성립함을 알 수 있었다. 완충용액 (Buffer) 제조방법 완충용액을 제조하는 방법은 여러 종류가 있으나 가장 간단하고 안전한 방법은 .. Biology/생명 과학 | 공학 2023. 3. 6.

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  일반생물학실험 | 혈구세포관찰 및 혈액형판정 TIP 1. 광학현미경으로 보이는 혈구세포의 특징을 이해한다. 2. 항원항체반응을 이용하여 혈액형 판정의 원리를 이해한다. ABO 혈액형 ABO 혈액형은 각 혈액의 적혈구가 갖는 항원의 기호에 따라 A, B, AB, O형의 4가지로 나눈다. 이러한 항원은 유전적으로 결정되는 것이며, 각 인종에 따라 그 표현형의 출현 빈도는 각각 다르다. 한편 혈장에는 항원 A, B에 대하여 각각 α(항A)와 β(항B)항체가 있다. 수혈을 할 경우에는 혈액을 제공하는 사람과 받는 사람의 혈액형 사이에 수혈가능 여부를 반드시 검사해야 한다. 부적합한 혈액형 사이에서 수혈을 하면 항원-항체 반응에 의한 적혈구의 응집현상이 일어나 위험한 부작용을 가져오며, 심한 경우에는 생명에까지 위협을 받게 된다. 수혈에 있어서 문제가 되는.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 3. 6.

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  일반생물학실험 | 적혈구 채취 및 세포 크기 분석 (어류의 혈구 관찰) TIP 1. 현미경을 이용하여 어류의 혈구 세포를 관찰한다. 2. 관찰을 통해 혈구의 구성성분에 대해 알아본다 세포 관찰 시 사용되는 염색액의 종류와 기능 염색액의 종류 기 능 아세트산 카민 염색체를 붉게 염색한다. 에오신액 산성 색소로서 세포질 염색제이다. 세포 내 단백질의 결정, 호분립, 입균, 조류, 동물 조직들을 붉게 염색한다. 메틸렌블루염색약 동물세포의 핵을 푸르게 염색한다. 염기성 푸크신액 염기성 색소로서 핵, 원형질, 목화된 세포막, 세균, 배낭 등을 붉게 염색한다. 산성 푸크신액 원형질(적색), 원생동물, 신경세포 염색한다. 라이트 염색액 과립구의 모든 과립을 명료하게 염색해 내는 장점이 있으나, 때로 너무 강하게 염색되는 경우가 있다. 핵의 염색성은 약간 나쁘다. 비스마르크 브라운액 염기.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 3. 3.

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  일반생물학실험 | 세포 관찰(동물, 식물 세포의 관찰) TIP 1. 광학현미경의 사용방법을 익히고 동물 및 식물 세포를 비교 관찰한다. 2. 프레파라트를 직접 만들어보고 세포를 염색해본다. 3. 현미경으로 식물과 동물조직을 이용하여 생물체가 세포라는 기본단위로 이루어져 있음을 확인한다. 실험 배경 세포는 중앙에 구형인 핵과 주위의 세포질, 그리고 세포질을 싸고 있는 세포막으로 구성되어 있다. 식물세포는 세포막 바깥에 섬유소가 주성분인 두꺼운 세포벽을 갖고 있다. 또, 핵이 핵막에 둘러싸여 세포질과 분리되어 있고, 세포질 내에는 소포체, 골지체, 미토콘드리아, 엽록체, 액포 같은 세포내 소기관들이 잘 발달되어 있다. 액포는 광합성에 필요한 엽록체와 물질의 저장소 역할을 한다. 동물세포는 식물세포와는 달리 세포막 외부에 세포벽이 없으며, 액포와 엽록체도 볼 수 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 3. 2.

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  일반생물학실험 | 세포 관찰 TIP 광학현미경을 이용하여 동물과 식물의 세포를 관찰한다. 실험 배경 모든 생물은 원핵세포나 진핵세포로 구성되어 있다. 세균은 한 개의 원핵세포로 되어 있으며, 크기가 막을 가진 세포내 소기관이 존재하지 않는 간단한 구조이다. 세균의 세포 형태를 현미경으로 관찰하면 크게 막대기 모양, 구형, 또는 나선형 등으로 구분할 수 있다. 동․식물세포는 핵이 핵막에 둘러싸여 세포질과 분리되어 있고, 세포질 내에는 소포체, 골지체, 미토콘드리아, 엽록체, 액포 같은 세포내 소기관들이 잘 발달되어 있다. 동물세포는 식물세포와는 달리 세포막 외부에 세포벽이 없으며, 액포와 엽록체도 볼 수 없다. 세포의 구조처럼 미세한 것의 관찰에는 현미경이 필수적이다. 현미경의 종류는 매우 다양한데 크게 광학현미경과 전자현미경으로 나.. Biology/일반 | 세포 생물학 2023. 2. 28.