• 

  일반생물학실험 | 원핵세포 배양 및 관찰 실험 개요원핵세포란 원핵생물을 구성하고 있고 개체가 단 하나로만 이루어진 단세포이다. 원핵세포는 하나의 염색체만 가지고 있고 진핵세포와 다르게 유사분열을 하지 않으며, 진핵세포보다 요구하는 영양분이 까다롭지 않아 세포배양에 주로 쓰인다. 또한 원핵세포는 다른 세포와 달리 세포주기가 매우 짧아 번식과 증식이 빠르다. 세포배양에 쓰이는 대표적인 균인 대장균은 20분에 한 번씩 분열한다. 하지만 이것은 진핵세포를 완전히 배양하지 않는다는 것은 아니다. 진핵세포를 배양할 때에는 주로 세대수가 짧은 물고기나 생쥐를 이용한다. 세포배양은 생물학 연구 전체에서 가장 유용한 기술이다. 세포배양의 장점은 단일 배양세포를 대량으로 얻을 수 있고 그 중 돌연변이의 관찰도 비교적 용이한 것이다. 초기의 조직배양은 명확하지 않.. Biology/일반 | 세포 생물학 2024. 9. 30.

• 

  분자생물학실험 | 성장곡선 그리기 TIP 배지 속 세균의 성장을 흡광도를 측정하여 그래프를 작성 및 해석해보자. 생장 곡선 1. lag phase 균을 새로운 배지에 접종하여 배양할 때 배지에 적응하는 시기로서 세포가 새로운 환경에서 증식하는데 필요한 각종 효소 단백질을 생합성하는 시기이다.분열을 위해 세포의 크기가 커지고 호흡활성 도가 높아지는 시기이며, 세포내의 RNA양은 현저하게 증가하고 효소단백질 합성이 왕성해진다. 2. exponential phase 미생물의 발육 과정에서 속도가 최대가 되는 시기. 균의 세대시간이 가장 짧고 대사산물이 원형질의 합성에 가장 잘 이용되는 시기이다. 3. stationary phase 세균이나 세포가 증식할 때에 대수증식기를 경과하면 분열, 증식이 정지하여 개체수의 증가가 나타나지 않는 상태를 유.. Biology/분자생물학 2023. 3. 7.

• 

  일반생물학실험 | Observe the mitotic chromosome of animal cells TIP 두 가지 방법을 통해 동물세포의 유사분열 염색체를 관찰할 수 있다. 유사분열이란, 유전체 양의 변화가 없는 세포분열이며 이 과정에서 방추사가 생기고 염색체가 나타나는 핵분열의 한 형식으로 간접분열이라고도 한다. 유사분열은 전기, 중기, 후기, 말기로 이루어진다. 유사분열이 일어나기 전 간기에는 느슨한 형태의 풀어진 염색체가 존재한다. 전기는 초기와 후기로 나뉘는데 전기의 초기에는 핵이 4개의 염색체를 가지고 있는 모습이며 염색체는 2가닥으로 갈라진 모습을 하고 있는데 한 가닥을 염색분체라고 한다. 전기의 후기에는 각각의 염색체가 염색분체를 2개씩 복제하며 방추체의 구조가 만들어지며 전기과정에서 핵막이 파괴되며 느슨한 염색체의 응축이 일어난다. 중기과정에서는 염색체들이 방추체의 중심을 따라 줄지어 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2022. 9. 3.

• 

  일반생물학실험 | 푸른곰팡이 포자 수 계측하기 TIP 푸른 곰팡이의 포자 수를 직접적 방법으로 관찰하고 평균 전제 포자수를 계산하기 포자 수 계측의 필요성 1. 포자 수 계측: 포자의 수를 세는 과정 2. 여러 분야에서의 포자 수 계측의 이용 3. 생태학: 생태 내(담수, 토양, 대기 등)에서의 균류의 다양성 확인을 위해 4. 의학, 병리학: 병원성 균류의 확인 및 관련된 실험을 위해 5. 농업, 식물병리학: 식물 병원성 균류의 확인 및 접종 실험을 위해 실험 방법 1. 실험 과정 1) 스포이드로 푸른곰팡이 배지에 증류수를 잠길 정도로 넣는다. 2) 푸른곰팡이 배지를 섞은 후 스포이드를 이용하여 튜브에 푸른곰팡이 포자 현탁액(5㎖)을 넣고 증류수(10㎖)를 넣는다. 3) 블텍싱 기계를 이용하여 푸른 곰팡이 포자 현탁액을 골고루 섞어준다. 4) 푸른 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 8. 7.

• 

  일반생물학실험 | 미생물 배양 및 세균검사 박테리아의 동정 TIP 1. 미생물 실험의 기초가 되는 멸균과 소독의 개념을 이해하고 배양배지를 만들어 식품위생검사를 위한 균의 접종 및 배양방법을 익히도록 한다. 2. 미생물을 그람 염색하여 염색된 세균의 표본을 관찰한 후 동정된 균의 형태적, 생리적 특성을 파악한다. 미생물 육안의 가시한계를 넘어선 0.1㎜ 이하의 크기인 미세한 생물로 주로 단일세포 또는 균사로써 몸을 이루며, 생물로서 최소 생활단위를 영위한다. 조류(algae), 균류(bacteria), 원생동물류(protozoa), 사상균류(mold), 효모류(yeast)와 한계적 생물이라고 할 수 있는 바이러스(virus) 등이 이에 속한다. 배지의 정의 및 분류 1. 배지 실험실에서 식물 및 동물세포, 미생물의 배양에 필요한 각종 영양분을 섞어 인위적으로 만.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 6. 14.

• 

  일반생물학실험 | cDNA 합성 및 Real-time PCR을 통한 유전자 발현 분석 TIP 1. 세포들은 기본적으로 주위 환경에 적응하기 위해 필요한 유전자의 발현을 증가시키고, 필요 없는 유전자의 발현은 억제시키는 방법으로 유전자 발현을 조절한다. 2. 동일한 세포를 서로 다른 영양 환경의 배지에서 배양한 후 유전자 발현을 비교하기 위해 cDNA를 합성하고, Real-time PCR을 통해 유전자 발현의 차이를 직접 확인해 보고자 한다. cDNA는 mRNA를 역전사 시켜 만든 DNA 염기서열로, exon만 존재하는 성숙 mRNA에 상보적인 DNA이다. cDNA를 통해 발현된 DNA 염기서열이 무엇인지 파악할 수 있다. Real-time PCR은 PCR 과정이 진행됨과 동시에 증폭되는 DNA 표적서열의 양을 측정하는 실험방법이다. PCR은 중합효소연쇄반응으로, DNA의 표적서열을 선택적.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 2. 14.

• 

  미생물실험 | 순수 분리 및 배양 미생물에 대한 연구 시, 미생물의 생태적, 생화학적, 분자생물학적 등 다양한 생물학적 특징을 밝혀야 하며 이를 위해 목표하는 미생물을 순수 분리하고 배양할 필요가 있다. 다른 종류의 생명체가 섞여 있지 않은 단일 종의 미생물의 배양을 순수 배양이라 하며, 적절한 환경에서 다른 미생물의 노출 및 오염 없이 배양해야 한다. 미생물의 배양은 미생물의 먹이가 되는 배지(media)를 이용하며, 배지의 상태에 따라 액체 배지와 고체 배지로 나눈다. 본 실험에서는 Luria Bertani media (이하 LB 배지)를 이용하여 실험하였으며, LB배지는 균 배양액의 생장에 필요한 질소, 탄소, 비타민, 및 무기염류 등을 제공한다. 실험에서는 배지에 균 배양액을 streak plate method(획선 평판법)와 s.. Biology/미생물학 2020. 9. 23.

• 

  일반생물학실험 | LB배지 만들기 및 Colony dilution TIP Acid phosphatase 이용한 효소반응을 통해 Michaelis-Menten equation, Lineweaver-Burk를 이해할 수 있다. 배지의 종류 자연계에 존재하는 세균은 필요한 영양분을 균체 주위 환경에서 흡수하지만, 임상 검체에서 병원균을 분리하거나 연구목적으로 실험실내에서 목적하는 세균을 증식시키고자 할 때에는 그 세균이 증식가능한 배지를 만들어 적당한 환경에서 배양하여야 한다. 세균 영양은 기본적으로는 동일하지만 종류에 따라서는 다른 영양성분을 요구하는 경우가 있다. 매우 간단한 배지 즉 질적으로나 양적으로 성분이 확실한 합성배지에서 증식할 수 있는 것부터 육즙, 펩톤 등 복잡한 성분이 포함된 완전배지, 복합배지, 영양강화배지가 아니면 증식할 수 없는 것도 있다. 배지는 그.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 4. 5.

• 

  미생물실험 | 토양균 streaking TIP 채취한 토양균의 sample을 알맞은 배지에 스며들게 접종하여 배양하는 방법을 익히고 single colony를 얻어 본다. 토양균 지표나 지하에서 생활하는 세균 및 균류의 총칭한다. 토양 중의 유기물을 분해, 질산화 작용, 탈질 작용 등 물질 순환에 큰 역할을 한다. 토양에 존재하는 미생물은 크게 세균류, 방사선균류, 균류, 조류, 원생동물로 나누어 지는데, 그 중 세균은 나머지 4가지를 합한 것보다 더 많은 부분을 차지하고 있기 때문에 매우 중요하다. Streaking (도말) plate에 굳힌 배지 위에 균 액을 스며들게 접종하여 배양시키는 방법이다. 그 목적은 single colony를 얻는데 있다. streaking 은 보통 병원성 미생물 실험할 때, 분리 배양한 병원성 의심균을 확인시험.. Biology/미생물학 2020. 4. 1.

• 

  미생물실험 | 토양균 Streaking TIP 토양에 존재하는 미생물을 추출하여 배양하여 그 과정을 숙지하고 미생물의 존재를 거시적으로 확인한다. 멸균 미생물 관련 실험을 하는데 앞서 멸균의 개념은 매우 중요하다. 주위에는 다양한 미생물들이 존재하고 있으며, 이것들이 배지에 오염되어 자라게 된다면 실험하고자 하는 미생물에 의한 결과를 얻을 수 없다. 멸균이란 어떤 물체에 있는 모든 생명체가 제거되었거나 죽은 상태를 뜻한다. 멸균이라는 말은 살균이랑 다소 차이가 있다. 살균이란 미생물의 번식능력만을 소실하는 것이기 때문이다. 멸균의 종류에는 크게 4가지가 있다고 할 수 있다. 열, 투과, 전자기파, 화학약품이다. streaking & spreading 1. Streaking : 세균의 순수배양을 하기 위한 분리방법의 하나로 고체배지상에서 세균이.. Biology/미생물학 2020. 3. 31.

• 

  미생물학실험 | 항생제감수성 - 디스크확산법 실험 방법 1. Antibiotic Susceptibility Testing 1) 백금이로 배양된 배지의 콜로니를 채취한다. 2) 0.5McFarland 시약의 탁도와 같게 볼텍스로 콜로니를 풀어준다. 3) Mueller-Hinton agar 배지 표면에 면봉으로 균액을 고르게 접종한다. 4) 접종한 plate 위에 항균제 디스크를 놓는다. 5) 균액에 접종된 배지를 35℃에 하루 동안 배양한다. [Biology/미생물학] - 미생물실험 | 항생제 감수성 - Antibiotic Susceptibility Testing [일반생물학실험]항생제 감수성 검사 화학 교육 블로그 educhemup.blogspot.com [미생물학실험]항생제감수성 - 디스크확산법 레포트 1. 실험 기구 및 시약 1.1. 실험 재료.. Biology/미생물학 2020. 2. 16.

• 

  식품공학실험 | 우리 주변 미생물 및 공중낙하균 측정 TIP 1. 우리 주변에서 쉽게 접하는 환경에 얼마나 많은 미생물이 존재하고 있는지와 어떤 종류의 미생물이 있는지를 확인한다. 2. 낙하균(공기중에 부유하고 있는 미생물)의 종류와 수를 측정하여 작업장의 오염도를 측정한다. 낙하세균, 부하세균 측정방법 1. 낙하세균 측정방법(Air Culture) ① 목적으로 한 측정 장소에서 오염된 부유미생물을 평판 배지 위에 자연 낙하시켜 측정 ② 무균적으로 제조한 Agar plate medium을 일정시간 개방하고 낙하된 미생물을 배양 하여 발육, 증식된 집락수를 측정하고 단위시간당의 생균수로서 산출하는 방법. ③ 장점 ㉠ 시간과 장소의 제한을 받지 않고 간편하고 편리함. ㉡ 특정한 장비를 필요치 않음. ④ 단점 ㉠ 주위 공기중의 전 미생물을 검출하지 못함. 2. .. Engineering/식품 영양 | 공학 2020. 2. 11.

• 

  미생물학실험 | 미생물 배양 및 관찰 배지(medium) 미생물을 배양하고 옮기거나 저장하는 데 사용되는 고체 또는 액체 물질 1. 사용목적에 의한 분류 ① 일반배지 : 대량증식용 배지 ② 선택배지(selective medium) : 특정 균종의 성장을 도모하고 다른 미생물의 성장을 억제함으로서 원하는 균종만 선택적으로 배양하기 위하여 사용하는 배지 ③ 분별배지(differential medium) : 배지에 특수한 생화학적 지시약을 넣어줌으로서 한 종의 미생물을 다른 종과 구별할 수 있게 하는 배지 2. 배지형태(상태)에 의한 분류 ① 고체(고형)배지(solid medium) : 액체배지에 한천(agar) 등의 고형화 물질이 일정량 포함된 것, 미생물의 분리 및 보존을 위해 사용됨(일반적으로 한천(agar)을 1.5～2.0% 정도 넣어서 .. Biology/미생물학 2020. 2. 11.

• 

  미생물실험 | Viable cell count - Serial dillution method 실험 방법 1. 실험 과정 1) 균의 오염을 막기위해서 무균실에서 실험진행 2) tube에 펜으로 labeling을 해준다. 10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 3) 준비된 tube (total volume:1㎖) 에서 균을 100㎕만큼 Pipetting 해준다음 900㎕의 H20가 들어있는 tube에 넣어서 total volume을 1㎖로 맞춰준다. (∴10-1희석) 4) 10-1 희석된 튜브에서 같은 방식으로 100㎕만큼 Pipetting 해준다음 각각의 tube에 넣어서 5) 10-2, 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 순서로 희석시켜준다. 6) 10-5 만큼 희석한 것을 100㎕만큼 Pipetting 해준다음 평판배지에 올려놓는다. 7) 준비된 삼각유리봉을 알코올.. Biology/미생물학 2020. 1. 4.

• 

  미생물실험 | 자연계에 분포하는 미생물의 분리와 순수배양(one colony의 분리) - Screening and Streaking 실험 방법 1. 자연계에 분포하는 미생물의 분리(Screening) ① 실험에 이용할 소지품 등을 미리 준비해 놓은 다음, 여러방법을 이용하여 자연계에 분포하는 미생물을 채취한다. 빈플레이트에 증류수와 함께 담아 흔들어주는 방법과 면종을 이용해 닦는 방법과, 스포이드를 이용해 소지품을 들고 물로 흘러준다던지 배지에 직접 묻혀내는 방법 등이 있다. ② 배지가 담긴 플레이트에 살살 찍어(증류수를 이용하지 않아도 되는 경우) 배지에 미생물 이묻어날 수 있게 하거나, 증류수를 이용했을 경우 스포이드를 이용하여 배지가 담긴 플레이트에 2∼3방울 정도 떨어뜨려서 골고루 퍼지도록 하여 준비한다. 2. 순수배양 - one colony의 분리(Streaking) ① 먼저 백금이를 시너레이터에 넣어 살균한다. ② 살균된 .. Biology/미생물학 2019. 12. 27.

• 

  미생물학실험 | 평판배양법을 이용한 구강미생물 배양 배지란 미생물이나 동식물의 조직을 배양하기 위하여 배양체가 필요로 하는 영양물질을 주성분으로 하는 것을 말한다. 기체상으로 얻어지는 것을 제외한 생존, 발육에 불가결한 물을 비롯하여 영양물질로서 탄소원, 질소원, 무기염류, 발육인자 등이 포함되어있다. 배지는 물리적 상태에 따라 고체배지와 액체배지로 구분한다. 고체배지는 액체배지에 한천, 젤라틴, 실리카겔 등 젤을 형성하는 물질을 첨가하여 제조한다. 고체배지는 목적에 따라 평판배지, 사면배지, 고층배지로 구분 할 수 있다. 본 실험에서는 평판배지를 이용하였으며 한천(agar)을 이용하여 고체의 형태로 만들었다. 한천(agar)은 홍조류에서 추출한 복합 다당류로 100℃에서 녹으므로 배양 시 고체 상태를 유지 할 수 있다. 일단 녹으면 45∼50℃까지 액체.. Biology/미생물학 2019. 12. 24.

• 

  일반생물학실험 | 미생물 배양과 관찰 TIP 1. 미생물 배양은 미생물연구의 첫 단계로 매우 중요하다. 미생물은 반드시 각 미생물에게 적절한 환경에서 반복적으로 배양 될 수 있어야 한다. 2. 직접 배지를 만들고 미생물을 배양하고 관찰해 봄으로써 미생물 배양의 기본원리를 안다. 미생물 (Microorganism) 미생물은 주로 단세포 또는 균사로 되어 있고 생물로서의 최소단위이며, 크기가 너무 작아 현미경을 사용해 관찰해야하는 생물이나 병원체이다.즉, 단어의 뜻이 암시하듯이 보통의 경우 사람의 눈으로 존재가 확인되지 않는 작은 생명체로 크기는 지름이 1㎜ 이하의 작은 존재로 나노메타나 마이크로메타 단위로 표기한다. 대부분의 고등생물은 서식지가 매우 제한적이지만 미생물은 지구상의 모든 곳에서 서식한다. 조류, 세균류, 원생동물류, 사상균류, .. Biology/일반 | 세포 생물학 2019. 11. 9.

• 

  미생물학실험 | 생균수 측정 실험(MPN법) TIP 대장균을 이용한 생균수의 측정법과 정의를 알아본다. MPN법(Most Probably Number) 시료에 있는 균수를 최적합수법에 의해 산출하기 위해서이다. 최적합수, Most Probably Number란 통계학적으로 가장 확실한 수치를 말하며 옛날부터 공식적으로 사용하고있는 확률론적 추계방법이다. MPN법은 연속 희석한 일련의 시료를 액체배지가 든 여러 개의 시험관에 접종하고 배양하여 자라는 시험관의 수를 세어 통계학적인 방법으로 시료 속의 미생물 밀도를 결정하는 방법으로써 다중시험관 발효법이라고도 한다. 이 방법에서는 최소한 시료를 3단계까지 연속 희석하는데, 10㎖, 1.0㎖, 0.1㎖, 0.01㎖ 과 같이 순차적으로 10배마다 희석해 각 5개씩 시험관을 가진다. 이렇게 복수 배양한 시험.. Biology/미생물학 2019. 11. 9.