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  일반생물학실험 | 당질의 검정 TIP 당질의 물성적인 특성을 이해하고, 이를 기반으로 당질을 분석하는 원리를 배운다. 당질의 환원작용 1. Benedict 시약 1개 이상의 유리상태(공유결합에 참여하지 않은 상태)의 알데히드나 케톤 잔기를 가진 탄수화물을 환원당이라 한다. 베네딕트 시약은 환원성을 가진 탄수화물에만 선택적으로 작용하여 알칼리 상태에서 2가의 구리염을 환원시켜 적갈색의 산화 제1동(1가)의 침전물을 형성한다. 따라서 당질의 환원기를 확인할 수 있다. 구리이온이 환원되어 침전되며 적색을 띄는데, 이때는 당질에 환원당이 포함되어 있는 것이다. 즉, 베네딕트 용액과 반응 하는 물질이 당이면 색깔이 바뀌고 당이 아닌 물질은 색깔이 바뀌지 않는다. 2. barfoed 시약 Cu이온이 있는데, 이것이 환원된다. 이때 단당류와 이당.. Biology/일반 | 세포 생물학 2019. 11. 23.

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  생명과학실험 | Simple tandem repeat를 이용한 인간유전형 분석 개인은 동일한 형태인 상동염색체라 하는 chromosome을 1쌍씩 가지고 있다. 여기서 같은 function을 갖는 유전자는 한 위치에 일정하게 존재하는데 이것을 locus라고 한다. 상동염색체는 한 쌍의 유전자이기 때문에, 개인의 형질을 결정하는 locus는 각 한 개씩 두 개가 있다. 이 두 개의 locus에 있는 유전자를 합쳐서 allele라 한다. 이 allele는 개인마다 서로 차이를 가지므로 이러한 차이를 집단크기로 분석하여 allelic variation을 조사할 수 있다. Allelic variation을 간단하게 조사하는 데에는 STR(simple tandem repeat)을 이용하는 방법이 있다. STR은 DNA에서 2개 이상의 nucleotides나 simple sequences가 .. Biology/생명 과학 | 공학 2019. 11. 22.

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  생화학개론 | 미생물 에너지 원의 DNA Polymerase TIP 1. Promoter 2. 미생물의 물질대사 DNA의 복제에는 DNA polymerase(Dpase)가 관여한다. 오늘날 세종류(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ)의 Dpase가 알려져 있다. Dpase Ⅰ은 아마 1100개의 아미노산으로 된 기본의 polypeptide로 되었고, 1956년에 Kornberg에 의하여 발견되었다. Kornberg의 DNA polymerase(오늘날의 DNA polymerase Ⅰ)는 DNA를 주형에 DNA를 합성하여 만들어진 DNA의 조성이나 nucleotide 배열은 주형 DNA의 그것과 유사하다. 이 효소는 대장균당 약 1만 분자가 존재하고 있을 것으로 생각한다. 네 종류의 dXTP를기질로 하여 primer DNA, 주형(template) DNA, Mg2+ (또는 M2+)존재하에서 .. Biology/생화학 2019. 11. 21.

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  분자생물학개론 | The Polymerase Chain Reaction(PCR) TIP 1. The polymerase chain reaction in outline 2. PCR in more detail 3. Applications of PCR DNA의 원하는 부분을 복제·증폭시키는 분자생물학적인 기술이다. 이 기술은 사람의 게놈과 같은 매우 복잡하며 양이 지극히 미량인 DNA 용액에서 연구자가 원하는 특정 DNA 단편만을 선택적으로 증폭시킬 수 있다. 또한 증폭에 필요한 시간이 2시간 정도로 짧으며, 실험 과정이 단순하고, 전자동 기계로 증폭할 수 있기 때문에, PCR과 여기서 파생한 여러가지 기술은 분자생물학, 의료, 범죄 수사, 생물의 분류 등 DNA를 취급하는 작업 전반에서 지극히 중요한 역할을 담당하고 있다. 1970년대에 gene cloning기술의 개발은 이전에 불가능.. Biology/분자생물학 2019. 11. 21.

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  미생물실험 | 공중 낙하균 TIP 1. 대기 중에 존재하는 균의 종류와 위생 상태를 점검할 수 있으며 그 수치를 측정함으로서 미생물의 분포를 알 수 있다. 2. 청정도 테스트의 한 방법인 공중 낙하균 검사는 공중미생물의 종류와 수를 검사하는 것은 식품위생상의 의의가 있다. 공중 낙하균 일정면적의 한천평판배지를 일정시간 어느 환경속에 방치하고 공기 중에 떠다니고 있는 미생물이 낙하하는 균을 말한다. 배지위에 발육하는 균은 생균 또는 먼지 등에 포함된 생균. 곰팡이, 효모류의 포자, 세균의 아포, 구균류 등이 있다. 이 방법은 측정이 용이하고 저렴한 이점이 있지만 단위용적 당 공기 중 세균농도의 평가는 할 수 없다. 공중 낙하균 방법 1) 한천배지를 지정장소에서 일정시간동안 뚜껑을 열고 공중낙하균을 부착시킨다. 2) 37℃의 인큐베이.. Biology/미생물학 2019. 11. 20.

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  일반생물학실험 | 환경에 따른 Amylase 활성도 TIP Amylase가 어떤 온도와, 어떤 pH에서 활성도가 가장 높은지 안다. Enzyme 생명체 내부의 화학 반응을 매개하는 Protein 촉매이다. Enzyme은 Temperament와 결합하여 Enzymesubstrate complex(효소-기질 복합체)를 형성함으로써 반응의 활성화 에너지를 낮추는 촉매 역할을 한다. 각 종류의 eb의 이름은 대개 '-ㅔ이스(-ase)'로 끝난다. Enzyme은 Temperament에 대한 특이성을 가지고 있으며, 일반적으로 상온에서 체온 정도의 온도와 중성 pH에서 잘 작동한다. 하지만 특이한 생명체의 Enzyme들은 극한 조건(예: 섭씨 72도, pH 2의 강한 산성 상태 등)에서도 작동할 수 있다. Enzyme은 촉매하는 반응의 종류와 반응하는 Tempera.. Biology/일반 | 세포 생물학 2019. 11. 19.

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  생명과학실험 | RNA interference 기법을 이용한 유전자 발현 억제 TIP 1. 유전자의 기능을 연구하기 위한 가장 효과적인 방법인 유전자를 유전체(genome)로부터 제거한 뒤 관찰하는 것을 가능하게 하기 위해서 small interfering RNA를 이용하여 유전자의 발현을 억제시키는 방법을 배워본다. 2. 본 실험에서는 cell을 눈으로 볼 수 있도록 H2AX 단백질에 GFP 형광 단백질을 넣어주어 형광 단백질의 %를 이용하여 쉽게 관찰할 수 있도록 한다. RNA interference RNA가 이중나선 형태를 지니고 있을 때 나타나는 현상으로 이중나선 RNA가 mRNA를 분해하여 특정 유전자를 발현되지 못하게 하는 것을 의미한다. 즉, central dogma 를 일으키지 못하게 하는 것이다. 이중가닥 RNA는 다이서(Dicer)라는 단백질에 의해 인식되어 작은.. Biology/생명 과학 | 공학 2019. 11. 18.

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  분자유전학실험 | CTAB을 이용한 DNA 추출 TIP 1. genomic DNA 추출 과정을 분자 유전학적으로 접근하여 이론으로 배운 DNA에 대해 직접 실험함으로서 기초적이지만 아주 중요한 이론을 확립한다. 2. DNA를 얻고자 CTAB buffer를 이용하여 개개인 혈액의 정제된 genomic DNA를 추출 할 수 있다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 시료 100㎕를 2㎖튜브에 넣고 CTAB buffer 800㎕, Proteinase K를 30㎕ 넣고 균질하게 섞이도록 vortex로 혼합, 65℃ 항온수조에서 30~60분간 항온처리하며 3~4회 혼합 2) phenol : chloroform : isoamyl-alcohol (25:24:1) 용액 800㎕를 넣고 실온에서 5분간 흔들어 준 후 10분간 12000rpm으로 원심분리 3) 새로운 1... Biology/유전학 2019. 11. 18.

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  생화학개론 | 유전자 발현의 조절 TIP 유전자 발현의 조절 1. 유전자의 선별적 발현 원핵생물의 유전자 발현 조절 1. 세균의 오페론 2. 원핵생물에 존재하는 오페론 3. 전사 조절 물질 4. 전사조절 단백질들의 활성 조절 5. 테리오파지 람다의 유전자 발현 조절 6. 번역 단계에서의 유전자 발현 조절 진핵생물의 유전자 발현 조절 1. 진핵생물의 전사개시는 박테리아와 네 가지 면에서 다르다. 2. RNA 중합효소와 보편전사인자 3. 유전자 조절단백질의 결합부위 4. 뉴클레오솜에 응축된 프로모터 5. 진핵생물의 유전자는 단백질 조합에 의해 조절된다. 6. 하나의 단백질이 서로 다른 여러 유전자의 발현을 조절한다. 7. 조합조절에 의해 서로 다른 세포유형이 형성될 수 있다. 8. 유전자발현의 양상은 딸세포에 전달된다 9. 진핵생물의 세포분.. Biology/생화학 2019. 11. 18.

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  일반생물학실험 | 발효 - Fermentation TIP 1. 유기물을 에너지원으로 이용하여 성장하는 생물들은 산소호흡, 무산소호흡, 발효의 세 가지 대사방법을 통해 생명활동에 필요한 에너지를 만든다. 2. 본 실험에서는 흔히 식품에서 관찰되는 효모를 이용한 알코올 발효와 유산균에 의한 젖산발효 현상을 관찰한다. 발효 일부 발효생물에서는 해당과정의 최종생성물(피루브산)이 NADH로부터 전자와 수소를 받아들이고 다른 것은 피루브산이 NADH를 산화하기 전에 중간 산물로 전환된다. 어떤 경우나 NAD+는 해당 과정에서 재사용을 위해 피루브산을 젖산으로 환원하는 반응과 연결되어 해당과정이 계속 되는데 사용된다. 이 발효의 최종산물은 미생물에 따라서 다르다. 아세톤, 초산, 부탄올 등이 만들어지기도 한다. 1. 알코올 발효(Alcohol Fermentation.. Biology/일반 | 세포 생물학 2019. 11. 16.

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  분자생물학개론 | How to Obtain a Clone of a Specific Gene TIP 1. The Problem of Selection 2. Direct Selection 3. Identification of a Clone from a Gene Library 4. Methods for clone identification 1. The Problem of Selection 가장 간단한 생물체인 E. coli 조차도 수천개의 유전자를 가지고 있으며, 따라서 전체 세포의 DNA가 제한 효소로 처리되면 원하는 유전자를 가진 단편뿐만 아니라 다른 유전자를 가진 또 다른 많은 단편들이 생기게 될 것이다. Ligation 반응동안 개개의 단편을 선별할 수 없으며 서로 다른 DNA조각을 가진 수많은 재조합 DNA분자들이 생성될 것이다. 그 결과 형질전환과 plating한 후에 다양한 재조합 cl.. Biology/분자생물학 2019. 11. 16.

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  미생물실험 | Mini-Prep (Hybrid-Q Plasmid Rapid prep Kit) Mini Prep DNA-isolation에 있는 원리 중 하나로 Plasmid DNA분리에 사용되는 방법이며 많은 후보를 빠른 시간 내에 분석하는 방법이다. Prep은 Prepartion의 약자.DNA를 소량으로 추출한다는 의미. 주로 이용되는 Alkylation lysis(denaturation)법과 boiling method, Iithium method법이 있다. DNA와 plasmid의 고유 형태구조 원리에 의한 분리 방법으로써 세포내에 DNA는 일반적인 double-helix의 형태를 가지는 반면 plasmid는 supercoiled형태를 가짐으로써 pH변화에 따라서도 plasmid의 형태와 구조가 크게 변하지 않아 순수한 plasmid만을 추출하는 구조적 기본원리에 의한 방법이다. 실험 방법 .. Biology/미생물학 2019. 11. 16.

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  면역학실험 | Rabbit의 면역체계를 이용한 항원-항체 반응 - Rabbit 체내의 Salmonella 균에 대한 항원-항체 반응 외계로부터 오는 암석, 자외선 등은 지구를 항상 위협한다. 대기층은 지구의 크기에 비하면 보이지 않을 정도로 얇지만 유일하며 강력한 방어기제이다. 인간(동물)의 몸도 외부의 자극으로부터의 방어기제를 지니며 항원-항체 반응은 가장 강력한 방어수단중하나이다. 대기가 거의 없는 달이 운석과 같은 외부공격에 쉽게 황폐화되는 것처럼 면역이 약해져 항원-항체 반응이 일어나지 않으면 개체는 더 이상 유지될 수 없다. 이 반응을 관찰하기가 쉽지 않으므로 ELISA를 method로 채택 하였다. 항원의 유입에 따른 항체의 생성을 관찰하기 위해서 Rabbit의 몸에 Salmonella 균을 항원으로서 투입하고 매주 혈청을 뽑아 따로 보관하였다. 실험 방법 1. 혈청확보 rabbit의 귀에서 1㎖의 혈액을 뽑는다. 혈액을 .. Biology/면역학 2019. 11. 14.

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  생명과학실험 | Immunoprecipitation Immunoprecippitation(면역침강법) 특정 단백질의 존재를 확인하기 위해 그 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 사용하여 결합 시키는 방법이다. 이때 보통은 antigen-antibody 만을 넣어 특이적 결합을 시킨다 하여도 그걸 눈으로 확인할 방법이 없으니 그것을 위해 무거운 bead를 넣어 침전물이 발생하게 만든다. 이런 Immunoprecippitation의 방법에는 Individual protein immunoprecipitation (IP), Protein complex immunoprecipitation (Co-IP), Chromatin immunoprecipitation (ChIP), RNA immunoprecipitation (RIP) 등의 방법이 있으나 Chromatin i.. Biology/생명 과학 | 공학 2019. 11. 14.

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  생화학개론 | Introduction to DNA - 모든 살아 있는 세포에서 볼 수 있고 유전형질을 전달하는 복잡한 유기화학적 분자구조 TIP 1. DNA의 물리적 특성 2. DNA의 구조 3. 유전물질로서의 DNA 4. DNA 복제 5. 유전정보의 매개체로서의 DNA： 유전암호의 전사 및 번역 6. DNA의 RNA로의 전사 7. 단백질 합성(유전암호의 번역) 8. 중심원리 9. 유전암호의 번역 10. 유전암호의 돌연변이 11. 돌연변이의 종류 12. DNA 회복 13. 유전자의 조절 DNA(deoxyribonucleic acid). 눈에 보이지도 않는 이 작은 물질은 만물의 영장인 인간을 비롯하여 매우 하등한 박테리아에 이르기까지 생물의 생장과 진화에 엄청난 영향을 끼치는 유전에 있어서의 key이다. 2차 대전 직후 전 세계의 많은 생리학, 결정학, 화학자들의 관심은 DNA의 구조를 밝히는 데 집중되었다. 그 때까지만 하더라도 이들은 .. Biology/생화학 2019. 11. 14.

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  미생물실험 | 식품의 생균수 측정 TIP 본 실험은 우유 속에 살아 있는 세균의 전체 수를 정량적으로 산출해 보며 생균수 측정법, 총균수 측정법, 페트리필름 사용법에 대해 알아보자 생균수 측정법 생균수(viable cell count)는 대상으로 하는 식품 중의 총 세균수라는 뜻은 아니며 일정한 조성의 배지에서 일정 온도로 유지하여 일정 시간 후에 한천 평판 위에 형성된 호기성균의 colony 수를 나타낸 것이다. 생균수 측정에 가장 많이 사용되는 방법은 시료를 적당히 희석하여 한천배지에서 배양한 다음 colony를 형성하는 균의 수를 측정 하는 평판계수법(plate count)이다. 생균수 측정에 의하여 얻어진 균의 수는 집락 형성 단위(cfu/㎖ 또는 cfu/g)로 표시하는데 이것은 각각의 colony는 한 개의 단일 세포에서 유래되.. Biology/미생물학 2019. 11. 12.

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  일반생물학실험 | Barr Body 관찰 TIP 표본제작과 현미경 관찰을 통하여 Barr body를 확인한다. Barr body(바소체) 간기 시기에 진하게 염색되는 이질염색질 덩어리로 불활성화된 X염색체이다. 포유류에서 수컷은 하나의 X염색체를 가진데 비해, 암컷은 두 개의 X염색체를 갖고 있어 X염색체 위에 있는 유전자가 모두 활성화되었을 때 암컷은 수컷보다 2배나 많은 양의 유전자 산물을 합성하게 된다. 따라서 유전자량 보정(dosage compensation)을 통하여 암컷의 X염색체 하나를 응축시켜서 불활성화시킴으로써 평형을 유지한다. X chromosome inactivation 남성은 X 염색체에 존재하는 모든 유전자를 하나씩만 가지고도 모든 기능이 정상이다. 이것은 X 염색체에 유전자들은 오직 1개씩만 필요하고, 더 많은 경우는 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2019. 11. 12.

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  분자생물학개론 | Cloning Vectors for Organisms Other than E. coli TIP 1. Vectors for Yeast and Other Fungi 2. Cloning Vectors for Higher Plants 3. Cloning Vectors for Animal Cells 대부분의 cloning 실험은 숙주로서 E. coli 와 함께 수행되며, 매우 다양한 cloning vector 들이 이 생물체에 대해 유용하다. Cloning 실험의 목적이 유전자 구조와 기능 같은 분자생물학적인 기본적 특징을 연구할 때 특히 그렇다. 그러나 어떤 경우에는 gene cloning 실험을 위해 다른 숙주를 이용하는 것이 바람직할 수도 있다. 이것은 그 목적이 유전자 연구가 아니라 중요한 대사산물(ex, hormone)의 합성을 조절하거나 향상시키고, 또는 생물체의 특징을 변화시키는(ex,.. Biology/분자생물학 2019. 11. 12.