반응형 환경미생물학실험 | Gram staining 미생물은 세균, 바이러스, 곰팡이, 원생동물, 효모 등의 여러 가지 형태로 나뉘어진다. 환경미생물을 간단히 확인하는 방법으로는 현미경 관찰이 우선적으로 이야기되는데 세균은 너무 작아서 관찰하기가 어렵다. 따라서 염색을 함으로써 미생물을 염색하여 세포와 배경간의 충분한 대조를 주어 현미경 관찰을 보다 쉽게 할 수 있다. 이러한 염색법의 종류에는 여러 가지가 있다. 단염색(simple stain), Gram stain, 항산성염색(Acid fast staining), 아포염색(Spore staining) 등이 그 종류이다. 그 중 우리는 이번 실험에서 Gram staining으로 E.coli와 bacillus를 염색하고 광학현미경을 통하여 관찰할 것이다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) Take a few .. Biology/미생물학 2022. 7. 25. 미생물학실험 | 그람 염색 및 미생물 동정 TIP 그람염색에 의한 세균 감별염색방법과 염색의 원리를 익히고, 미생물의 그람양성 및 그람음성을 판별해 본다. 1884년 덴마크 의사 한스 크리스티안 그람이 고안한 특수 염색법의 하나로 세균의 세포벽의 구조 차이를 이용하여 분류하는 기초적 세균염색법의 일종이다. 세균의 염색 특징(양성 혹은 음성)에 의하여 세균의 분류 및 동정에 이용되는 염색법이라고 할 수 있으며, 염색한뒤 세포벽 구조의 차이에 의해 보라색으로 염색되는 세균을 그람양성균, 붉은색으로 염색되는 세균을 그람음성균이라고 분류 한다. 실험 방법 1. 실험 과정 1) 슬라이드글라스에 균명을 기입하고, 뒷면 중앙부에 펜으로 직경 5～10mm의 원을 그린다. 2) 슬라이드글라스 중앙부 원위에 증류수를 소량 떨어뜨린다. 3) 고체배지에서 18～24 .. Biology/미생물학 2022. 7. 23. 미생물학실험 | 단 염색 (Simple staining)과 그람 염색 (Gram Stain) TIP 단염색은 한 종류의 염료(dye)를 사용하여 세균의 형태, 배열, 크기 등을 신속히 관찰하는데 목적이 있고, 그람 염색은 그람 염색법에 의해 세균감별염색술 식을 익히고 세균그람염색성에 따른 분류와 그람 염색의 원리를 익힌다. 미생물은 크기가 매우 작고, 분포밀도가 작아 육안으로 관찰 및 연구하기 어려운 생물이다. 따라서 이를 관찰하기 위해서는 미생물을 배양해서 분포밀도를 늘리거나, 현미경을 통해서 미생물을 확대하여 관찰이 가능하다. 이 실험에서는 현미경을 통해 미생물을 관찰할 것이다. 현미경을 통해 미생물을 관찰할 때 염색을 해야 하는 이유는 명시야 현미경의 제한요소 중 하나인 불충분한 대비차를 염색을 통하여 세포의 대비를 증가시켜 명시야 현미경으로도 쉽게 관찰할 수 있게 된다. 즉, 염색을 하지.. Biology/미생물학 2022. 7. 21. 미생물실험 | Colony Isolation TIP 손에서 나온 여러 균 중에서 한 종류의 균만을 분리하여 획선평판법으로 배양한다. 배양배지가 준비되어 모든 생명체가 없어지도록 멸균하면, 여기에 생명체를 접종하여 성장을 지원하는 생장조건 하에서 배양할 수가 있다. 실험실 상황에서 보통은 순수배양으로 액체 또는 고체 배지에 접종한다. 액체 배양 배지는 대개 1～2%의 한천(agar)으로 고형화된다. 고체 배지는 세포를 고정하여 집락(colonies)이라 불리는 육안으로 보이는 분리된 덩어리로 자라게 한다. 미생물 집락은 미생물 종류, 배양 조건, 영양 공급, 생리저인 변수에 따라서 모양과 크기가 다양하다. 어떤 세균은 전체 집락의 색깔을 나타내는 색소를 생성한다. 집락은 미생물학자가 배양의 구성과 순도를 추정하도록 해준다. 배양접시에 두 종류 이상의.. Biology/미생물학 2022. 2. 20. 산업미생물학실험 | 하수처리 미생물을 이용한 수질정화 하수는 일반적으로 오수와 우수로 구성된다. 오수는 가정에서 발생되는 생활하수, 공장이나 사업장에서의 폐수, 지하수 등이 섞여 있는 물이며, 우수는 빗물이 도로 등의 배수로를 통하여 모여진 물을 말한다. 일반적인 하수처리 과정은 하수의 고형물질들을 제거한 뒤, 미생물을 이용하여 유기물을 분해하여 제거하는 과정을 거친다. 유기물의 측정기준은 BOD(biochemical oxygen demand)와 COD(Chemical Oxygen Demand)가 있는데, BOD는 미생물에 의해 이화될 수 있는 유기물만 포함하며, COD는 망간법과 크롬법을 통해 분해된 유기물을 측정한다. 위의 처리 과정을 거친 후에도 오염물질이 일부 남아있으며, 남아있는 무기성 이온, 영양염류 등은 하천, 호소, 해역에서 부영양화와 적조현.. Biology/미생물학 2021. 11. 4. 미생물실험 | 균 배양 미생물은 현미경과 같은 기구를 통해서만 볼 수 있는 작은 생물이지만 인간과 동물, 그리고 환경에 꼭 필요한 존재이다. 항암제․농약․에너지 생산 등 활용이 안 되는 분야가 없으며, 단 하루 만에도 수백만 마리의 자손을 번식시키는 이 미물중의 미물이 세계를 주름잡고 있다. 이러한 미생물의 놀라움을 직접 관찰해보기 위해서 지금도 우리 주위에서 끊임없이 번식하고 있는 미생물을 직접 배양해 볼 것이다. 그리고 배양을 하기 위해서 배지를 만드는 것도 이번 실험의 목적이다. 도말 자연상태에서는 여러 종류의 생물종이 섞여 자라는데, 이러한 경우 한 종의 미생물을 연구하기 힘들다. 따라서 종의 특성을 연구할 때는 단일세포에서 자라난 세포 집단인 순수배양체(pure culture)가 필요한데, 이를 얻는 방법이 도말이다... Biology/미생물학 2021. 2. 2. 미생물실험 | 환경에 따른 미생물의 생장 및 조절 TIP 세균생장에 대한 온도의 효과를 설명하고, 미생물 생장에서 pH의 효과를 알아볼 수 있다. 우리는 인위적으로 미생물을 죽게 하거나 번식을 억제함으로써 미생물의 생육을 조절하여 식품의 저장기간을 늘리거나 식품의 부패를 방지할 수 있다. 미생물의 생육에 영향을 미치는 요인은 온도, 수분활성도, pH, 산화환원전위, 산소, 영양소 등이 있다. 이러한 요소들 중, 중요도가 높은 것은 온도, 수분활성도, pH이다. 이들은 각각 따로 영향을 미치는 것이 아니라 서로 밀접한 관련을 갖고 복합적으로 미생물의 생육에 영향을 미친다. 미생물은 자연환경에서 한 종류만 자라지 않고 다양한 미생물집단으로 자라면서 서로서로 생육에 영향을 미치기 때문이다. 이와 같이 본 실험에서는 온도와 pH가 생물 생장에 미치는 영양에 대.. Biology/미생물학 2020. 12. 9. 미생물실험 | 효모 관찰 TIP 효모를 관찰함으로써 효모의 외형적 특징을 살펴보고 그들의 생활사와 생물학적 특징을 알아보도록 한다. 효모의 특성과 이용, 그리고 발효(fermentation) 효모의 세포벽은 주로 글루칸과 만난에 의하여 구성되며, 그 밖에 지질·단백질과 소량의 키틴질을 함유한다. 세포 내에는 핵·미토콘드리아·액포·글리코젠 과립을 가지며, 발효뿐만 아니라 호흡도 잘한다. 효모 자체는 값싼 지방·단백질원으로 사료에 사용된다. 비타민 B군을 풍부하게 함유하고, 또 비타민 D를 함유하는 것도 있으며, 의약품 공업에도 사용되고 있다 이 실험에서도 알 수 있듯이 막걸리와 맥주발효에도 효모가 사용된다. 또한 효모는 가장 간단한 형태의 진핵생물로 인간의 세포와 세포주기가 매우 유사하다. 이러한 유사점을 바탕으로 진핵생물의 DN.. Biology/미생물학 2020. 10. 9. 미생물실험 | 세균의 생장 곡선 미생물의 생장은 세포의 수나 생물량의 증가를 말한다. 단세포 생물체에서 생장은 통상 수적인 증가를 의미한다. 일부 세균은 생장이 왕성한 기간동안에는 세대기간이 20분 이내로 빠르게 생장할 수 있다. 이론적으로 이상적인 환경에서 매 20분 동안 두 배로 증가하는 단세포는 48시간동안 무게에서 2144배로 증가하게 된다. 세균의 생장곡선은 4가지 특징적인 단계로 나눈다. 유도기(lag phase)는 세포가 세로운 환경에 적응하는 시기이다. 대수생장기(logarithmic phase 또는 exponential phase)는 일정 속도로 빠르게 증식하는 기간이다. 정지기(stationary phase)는 생장이 멈추는 기간이며, 사멸기(death phase)는 생균수가 감소되는 시기이다. 전형적인 세균의 생장곡.. Biology/미생물학 2020. 10. 2. 미생물실험 | 세균의 생장곡선 (Growth Curve) TIP 1. 미생물의 성장과 분열과정을 이해한다. 2. 미생물의 성장은 4단계를(Lag phase, Exponential phase, Stationary phase, Death phase.) 거친다. 미생물의 생육곡선(growth curve) 미생물을 배양할 때 배양시간과 생균수의 대수(log) 사이의 관계를 나타내는 곡선으로 S자를 그리며 유도기(적응기)와 대수기(로그대수기), 정지기, 사멸기로 나누어진다. 1. 유도기(lag phase, induction phase) ① 균을 새로운 배지에 접종하여 배양할 때 배지에 적응하는 시기 ② 세포가 새로운 환경에서 증식하는데 필요한 각종 효소단백질을 생합성하는 시기 2. 증식기(대수기), 로그대수기(logarithmic phase, exponential ph.. Biology/미생물학 2020. 9. 27. 미생물실험 | 순수 분리 및 배양 미생물에 대한 연구 시, 미생물의 생태적, 생화학적, 분자생물학적 등 다양한 생물학적 특징을 밝혀야 하며 이를 위해 목표하는 미생물을 순수 분리하고 배양할 필요가 있다. 다른 종류의 생명체가 섞여 있지 않은 단일 종의 미생물의 배양을 순수 배양이라 하며, 적절한 환경에서 다른 미생물의 노출 및 오염 없이 배양해야 한다. 미생물의 배양은 미생물의 먹이가 되는 배지(media)를 이용하며, 배지의 상태에 따라 액체 배지와 고체 배지로 나눈다. 본 실험에서는 Luria Bertani media (이하 LB 배지)를 이용하여 실험하였으며, LB배지는 균 배양액의 생장에 필요한 질소, 탄소, 비타민, 및 무기염류 등을 제공한다. 실험에서는 배지에 균 배양액을 streak plate method(획선 평판법)와 s.. Biology/미생물학 2020. 9. 23. 미생물실험 | 환경오염의 원인인 황화합물 제거를 위한 미생물(T.1082) 배양 최근 환경문제가 대두되고 있는 가운데 오염물질을 처리하는 기술개발에 대한 연구 필요성이 중대해 지고 있다. 악취는 특성상 저 농도에서도 불쾌감이 발생되는 특성을 가지고 있어 지역 주민들의 피해가 급증하고 있으며 세균번식으로 인한 대기오염 등의 환경오염 문제도 생겨나고 있다. 본 실험은 대기오염의 원인이 되고 있는 황화합물 악취가스를 제거하고자 분리한 황화합물 분해균주의 배양특성 하여 오염물질의 정화를 통해 환경 문제를 해결 하는 것에 목적을 두고 있다. 악취 제거와 오염세균 번식을 방지하기 위하여 사용할 수 있는 방법은 화학적, 물리적, 생물학적 3가지 방법이 있다. 환경오염의 원인이 되고 있는 황화합물 분해, 제거를 위해 물리적, 화학적, 생물학적 방법 중 미생물을 이용하여 오염원을 분해하는 생물학적 .. Biology/미생물학 2020. 9. 3. 미생물실험 | 세균의 형태와 염색 TIP GRAM염색을 이용하여 E.coli, Helicobacter pylori, Staphylococus aureus, Heamophylus influenza, Bacilluse subtlus를 슬라이드글라스에 염색하고 결과물을 현미경으로 관찰하는 실험을 실시하였다. 이 실험을 통하여 각 균주별 형태를 정확히 알고있는지 여부를 알아보고자 하였다. Simple staining(단순염색) 세포를 염색하기 위하어 한가지 생물학적 염료를 이용하는 염색방법이다. 미생물학에서 사용되는 생물학적 염료는 발색단을 포함하는 약 유기산의 염이다. 만약 발색단이 양전하를 띄게 되면 그것은 염기성 염료이고, methylene blue, crystal violet, 그리고 safranin과 같은 염기성 염료들은 일반적으로 세.. Biology/미생물학 2020. 7. 13. 미생물실험 | 세균의 형태 및 크기 측정 TIP 크기의 단위, 세균의 형태와 종류의 다양함, 미생물의 크기와 모양, 그리고 프레파라트를 만드는 법에 대하여 배우고, 육안으로 관찰이 불가능한 세균의 크기를 현미경으로 측정하는 방법을 실험을 통하여 배운다. 세균과 고세균 세균이란 미세한 단세포(單細胞)생물. 넓은 의미의 세균은 원핵균류를 가리키지만 좁은 의미로는 원핵균류 중에서 마이코플라즈마류·점액세균류·스피로헤타류·방 선균류를 제외한 것을 가리킨다. 보통 세균이라고 하면 좁은 의미의 세균류를 가리키는 것이 대부분이다. 그리고, 세균(Bacteria)의 형태는 구형, 타원형, 막대형, 나선형, 사상형 등 매우 다양하며 그에 따라 구균, 간균, 나선균, 사상형세균 등으로 구분하여 부른다. 최근에는 이러한 일반적인 세균과 고세균을 나누어 보는 경향이 .. Biology/미생물학 2020. 7. 10. 미생물실험 | 균주 보관법 동결건조법 조작이 저온에서 이루어지므로 열에 약한 물질의 건조법으로 유용하다. 이 방법은 미생물, 의학, 약학방면에서 수분이 많을 때는 불안정하고 또한 열에 극히 민감한 재료(세균, 바이러스, 혈장, 혈청)등을 이 방법에 의해 –10 ～ -30℃의 저온에서 건조시켜 보관하면 상온에서 장기간 보존할 수 있고 물에 대한 용해성이 뛰어난 제품을 얻을 수 있다. 또 식품공업에서 육류, 어류, 야채, 과즙 등을 건조시킬 때 이 방법으로 건조시키면 향, 맛이 남고 천연품에 가까운 인스턴트 음식을 얻을 수 있다. 동결보존시 이용하는 동결보존제는 세포 동결시 세포손상을 막아주는 역할을 하며 이 보존제를 동결배지에 넣어준다. 동결보호제는 세포외액에 얼음결정이 생성될 때 발생하는 삼투압 스트레스로 인한 세포손상을 막아주고.. Biology/미생물학 2020. 4. 19. 미생물학실험 | 선상도말배양법 & 평판계수법 선상도말 배양법(streak plate culture) 1. 실험 방법 1) 백금이를 알코올 램프의 불꽃으로 멸균한 뒤 식힌다 2) 균이 들어있는 시험관 마개를 뽑고 불꽃으로 시험관 입구 주위를 살짝 멸균한 후 균액을 한 백금이 떠낸다 3) 평반배지 표면에 선상도말 한다. 4) 사용이 끝난 백금이를 불꽃으로 멸균한다. 5) 선상도말한 평판배지를 37℃에서 18시간 배양한다. 평판계수법 1. 실험 방법 1) 계수하고자 하는 세균의 샘플을 준비한다 2) 알코올 램프를 켠다 3) 테스트 튜브에 1부터 5까지 nameing을 한다 4) 세균액 0.1㎖를 식염수 0.9㎖이 들어있는 1번 테스트 튜브에 넣고 뚜껑을 닫아 잘 섞어준다, 두 개의 농도가 다른 세균 표본을 사용하여 비교한다. 5) 1번 튜브에서 0.1㎖.. Biology/미생물학 2020. 4. 10. 미생물실험 | 낙하균수 측정 방법 TIP 공기 중에서 일정 시간 내에 일정면적의 한천 평판배지 상에 낙하하여 발육하는 총수를 계수 한다. 실내외를 불문하고 목적으로 한 측정 장소에서 오염된 부유미생물을 평판배지 위에 자연 낙하시켜 측정하는 방법으로 일정 면적의 한천배지 또는 금속편 등을 일정 시간 정치시켜서 그 위에 낙하는 미생물 입자를 포집 / 배양하여 형성된 세균집락을 측정하는 원리이다. 낙하법의 특징은 배지만 있으면 되고 장치나 동력원 이 필요 없고 간편하다 실험 방법 1. 실험 과정 1) 한천평판 3장을 시험장소에 놓고 동시에 뚜껑을 열어 5분간 노출 시킨 후 뚜껑을 닫는다. 2) 평판을 거꾸로 뒤집어 36±1℃에서 24 ~ 48 시간 배양한다. 3) 균수 산출의 도말집락 배양법에 따라 산출한다. 4) 얻어진 평판 당 집락 수를 .. Biology/미생물학 2020. 4. 6. 미생물실험 | 토양균 streaking TIP 채취한 토양균의 sample을 알맞은 배지에 스며들게 접종하여 배양하는 방법을 익히고 single colony를 얻어 본다. 토양균 지표나 지하에서 생활하는 세균 및 균류의 총칭한다. 토양 중의 유기물을 분해, 질산화 작용, 탈질 작용 등 물질 순환에 큰 역할을 한다. 토양에 존재하는 미생물은 크게 세균류, 방사선균류, 균류, 조류, 원생동물로 나누어 지는데, 그 중 세균은 나머지 4가지를 합한 것보다 더 많은 부분을 차지하고 있기 때문에 매우 중요하다. Streaking (도말) plate에 굳힌 배지 위에 균 액을 스며들게 접종하여 배양시키는 방법이다. 그 목적은 single colony를 얻는데 있다. streaking 은 보통 병원성 미생물 실험할 때, 분리 배양한 병원성 의심균을 확인시험.. Biology/미생물학 2020. 4. 1. 이전 1 2 3 4 5 다음 반응형
