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  일반생물학실험 | 단백질의 정량 및 정성 분석 TIP 정성분석(뷰렛방법)을 통해 단백질의 포함 유무를 분석하고 정량분석(BCA법)을 통해 단백질의 양을 측정한다. 단백질 모든 단백질은 널리 존재하는 20가지 종류의 아미노산이 특징적인 선상의 서열로 공유결합된 것이다. 이러한 각 아미노산은 각각의 특유의 화학적인 성질을 나타내는 곁사슬을 가지고 있으며 이 20가지 종류의 전구체 분자로 된 집단은 단백질 구조의 언어로 쓰이는 알파벳과 같다고 볼 수 있다. 단백질은 몇 개의 아미노산 잔기로 이루어진 비교적 간단한 펩타이드에서 분자량이 수백만이나 되는 거대한 중합체(polymer)까지 존재한다. 아미노산은 R기의 극성과 전하(pH7에서)에 따라 5가지 종류로 분류할 수 있다. 비극성, 지방족 R기 알라닌, 발린, 류신, 아이소류신, 글라이신, 메싸이오닌, .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 7. 8.

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  일반생물학실험 | 흡광도를 이용한 BSA의 단백질 정량 및 미지 농도의 BSA 용액 농도 추정 TIP 본 보고서에서는 Beer-Lambert Law를 이용해 서로 다른 농도의 Bovine Serum Albumin(BSA) 용액을 만들어 흡광도계로 흡광도를 측정하고 선형 회귀곡선을 그려 미지 농도의 BSA용액의 농도 추정을 목표로 한다. 생명체에 있어서 모든 종류의 고분자 물질은 생명체에 필수적인 기능을 담당하지만 단백질처럼 광범위한 범위의 기능을 담당하는 물질은 좀처럼 찾아보기 힘들다. 생물학에서 단백질은 떼려야 뗄 수 없는 분야이다. 생물학의 중추를 이루는 효소, 면역체계, 항상성, 수용체 등등은 모두 단백질로 구성되어 있다. 이러한 단백질을 정량하는 방법으로 여러 가지 많은 방법들이 사용되고 있는데 그 중의 하나가 바로 Beer–Lambert Law를 이용한 방법이다. Beer-Lambert .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 6. 18.

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  일반생물학실험 | 소변 검사 TIP 소변 검사를 통해 탄수화물과 단백질의 정성을 분석해 본다. 실험 방법 1. 탄수화물의 분석방법 : 기본적으로 비색 측정 방법을 이용한다. 페놀. 황산 실험 : 페놀과 황산 수용액을 이용, 탄수화물을 분해하면 푸르푸랄 또는 푸르푸랄 유도체가 만들어지고 푸르푸랄이 페놀과 반응. 화합물을 만들면 이를 480㎚의 흡광도로 측정. Furfural + Anthrone → 착색물질 (청록색) Fehling 실험 : 당의 환원력에 기초한 비색측정법으로 알칼리 존재하에서 당의 산화가 이루어지는 동안 Cu++이 Cu+으로 환원되는 것에 기초 단당류에 타르타르산 용액과 알칼리 구리용액을 섞어 가열하고 식힌 뒤 460㎚에서 흡광도를 측정. CuSO4 + 2OH- ↔ Cu(OH)2 ··· 맑은 청록색 2Cu(OH)2 →.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 6. 3.

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  일반생물학실험 | 영양소의 검출 TIP 1. 기본적인 영양소 검출 방법으로 포도당, 녹말, 단백질, 지방을 검출한다. 2. 음식물에 들어 있는 영양소의 종류를 실험을 통해 확인할 수 있다. 3. 영양소의 소화 과정을 확인할 수 있다. 각 영양소 검출법 요약 1) 포도당을 비롯하여 탄수화물은 세포의 에너지원과 구성 성분으로 쓰인다. 단당류, 이당류, 다당류로 분류되고 단당류와 이당류 중에는 알데히드기와 케톤기의 존재에 따라 환원당과 비환원당으로 나뉜다. 또한 당에는 탄소수에 따라 3탄당에서부터 7탄당까지 존재한다. 베네딕트 용액은 시약 속에 있는 CuSO4 의 Cu2+가 알데히드기와 결합하여 CuO2가 생성된다. 이 침전물이 적갈색이며 이 화학적 특성을 이용하여 환원당의 존재를 확인할 수 있다. 2) 요오드 반응의 청남색은 화합물의 생성.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 4. 19.

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  일반생물학실험 | Macromolecules – Protein Quantification(Ver. 1) 거대 분자는 단량체가 모여 중합체가 되어 이루어진다. 생물체에서 거대 분자는 단백질, 핵산, 지질 사슬, 탄수화물 등이 있다. 본 실험은 단백질에 대한 것이다. 아미노산이 모여 펩타이드 결합을 통해 폴리펩타이드를 형성하고 폴리펩타이드가 입체 구조를 이루면 단백질이 된다. 단백질은 1차, 2차, 3차, 4차 구조로 나눌 수 있다. 1차 구조는 단백질에서의 아미노산 배열 순서를 의미한다. 이 구조에 의해 형성된 단백질 분자가 그 구성 아미노산의 분자 구조로 인해 일정한 각도로 꼬이고 구부러져서 특정한 형태를 가지게 되는데, 이것을 단백질의 2차 구조라고 한다. 2차 구조는 알파 나선 구조와 베타 구조로 나눌 수 있으며 규칙성이 없이 꼬여 있는 구조도 존재한다. 2차 구조를 가진 단백질은 3차원적으로 꼬이고 .. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 3. 18.

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  일반생물학실험 | 생체 거대분자의 특성과 기능 분석(방선균배지) TIP 1. 미생물이 생산하는 단백질과 탄수화물 분해효소에 대해 알아본다. 2. 미생물 효소에 의한 활성이 온도와 pH에 따라 영향을 받음을 확인한다. 효소는 생물체에서 합성되어 생체 화학반응에 관여하여 반응을 촉진하는 생체 촉매를 말한다. 촉매란 자기 자신은 반응에 의해 소모되거나 변성되지 않고, 매우 적은 양으로 화학 반응의 속도에 영향을 미치는 물질을 효소의 촉매라고 한다. 화학반응을 촉매 시키기 위하여 사용하는 촉매는 모두 무기질인데 비하여 생물체 내의 반응을 촉진시키는 촉매인 효소는 모두 단백질이다. 효소의 구성은 주성분인 단백질이 있다. 효소는 입체적인 구조를 가지고 있어서 효소의 작용을 받는 물질인 기질과 특이하게 결합하는 활성 부위를 가진다. 단백질로만 구성된 효소의 예로는 펩신, 아밀라아.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 2. 28.

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  일반생물학실험 | 지질 아미노산 및 단백질의 정성실험 TIP 1. 크로마토그래피 과정을 상세히 관찰한다. 2. 단백질의 변성과 변성요인에 대해 알아본다. 3. 단백질을 태울 때 냄새와 생성되는 물질에 대해 상세히 관찰한다. 단백질은 생명체에 다량 함유되어 있는 구성성분으로 효소, 에너지원으로 작용하는 등 중요한 역할을 한다. 단백질은 20 종류의 아미노산이 펩티드결합(peptide bond)으로 생성된 중합체로서 구조를 이루어 생체 내에서 가능을 유지한다. 종이 크로마토그래피에 의해 아미노산을 분리하고 닌히드린 반응에 의해 확인하며, 단백질의 정성실험을 실시한다. 실험 방법 1. 아미노산 정성실험 1) 전개병을 준비하고, Whatman No.1 여과지를 전개병에 맞추어 준비하여 아미노산 점적할 곳을 연필로 표시한다. 2) 표시선 위에 아미노산 용액(Pro+.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 1. 25.

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  일반생물학실험 | 단백질과 DNA의 정량 TIP 1. 단백질을 구성하는 아미노산의 구조와 특성을 이해하고 아미노산의 특성을 이용한 몇 가지 단백질 정량 방법을 이해한다 2. 대표적인 단백질 정량방법인 Bradford assay와 Lowry method를 이용하여 단백질을 정량 한다 3. DNA의 구조 및 DNA를 구성하는 네 가지 염기의 구조와 특성을 이해하고 DNA의 정량 방법과 순도결정 방법을 실험한다. Bradford Assay 1. 원 리 ① Coomassie Brilliant Blue G-250 (CBBG) 가 arg, trp, tyr, his, phe에 결합시 흡광도의 변화를 측정한다 ② dye는 6개의 phenyl groups 과 2개의 sulfonic acid groups을 통해서 단백질과 결합한다. hydrophobic (Try.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 1. 4.

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  일반생물학실험 | 침의 소화작용 TIP 온도의 변화에 따라 침속의 amylase에 의해 녹말(starch)이 분해되는 현상을 관찰하고, 효소를 알아본다. 효소의 개념 및 작용 효소는 일종의 촉매이지만 일반적으로 무기촉매와 상당히 다른 성질을 가지고 있다. 효소는 동물, 식물 그리고 미생물체에서 생산되는 단백질과 같은 고분자의 물질과 특수한 화학구조를 가진 작은 분자가 서로 결합한 일종의 복합체이다. 즉 단백질로 된 교질담체와 비단백질로 된 보결군이라는 활성기가 모여서 된 것이다. 효소(holoengyme) = 아포효소(apoenzyme) + 보결군(prosthetic group) 엿기름 등으로 밥을 삭이면 식혜가 되고 콩은 미생물의 작용으로 된장, 간장이 되고 동물체내에서 식물이 간단한 물질로 분해되고 이것이 다시 복잡한 물질로 합성되.. Biology/일반 | 세포 생물학 2021. 1. 1.

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  생화학실험 | 아미노산의 정성분석과 단백질의 정량 분석 아미노산 (Amino acid) 단백질을 염산과 함께 가열하면 여러 가지 아미노산의 혼합물질이 얻어진다. 이러한 아미노산의 혼합물에서 각각의 아미노산을 분리하는 방법은 Emil Fischer에 의해서 개발되었고, 현재는 최소한 25종이 분리되었다. 결국 단백질은 이러한 아미노산으로 구성되어 있다. 아미노산은 화학적으로 정확하게 표현한다면 아미노알칸산(amino alkanoic acid)이며, 분자구조에 아미노기(-NH2)와 카르복실기(-COOH)를 갖고 있으며, 카르복실기에 대해서 α위치에 아미노기가 결합된 것을 α아미노산(α-amino acid), β위치인 경우는 β아미노산(β-amino acid), γ위치의 경우는 γ아미노산(γ-amino acid)라고 한다. 한편, 단백질을 가수분해하여 생성되는 아.. Biology/생화학 2020. 12. 13.

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  식품분석학실험 | 첨가물에 따른 gluten 형성과정 밀가루는 일상생활에서 흔히 볼 수 있는 음식재료이다. 밀가루는 다목적용부터 cake만드는 용, baking용 까지 다양한 목적으로 나누어지며, 또한 우리가 흔히 보는 밀가루 말고도 다양한 성분을 가지고 있는 여러 개의 밀가루가 존재한다. 밀가루의 종류에 따라 성분에 있어서의 단백질의 양과 탄수화물의 양 그리고 밀의 종류 등 다양한 부분에서 차이가 난다. 이때 gluten이라 불리는 성분은 불용성 단백질로 형성되어진 물질인데, gluten은 gliadin과 glutenin으로 구성되어져 있다. 또한 gluten은 baked product의 질감에 중요한 영향을 끼치는 물질이다. 위 실험에서는 어떠한 첨가물을 추가할 때 gluten이 잘 형성 되는지 알아보기 위해, 밀가루에 다양한 첨가물을 넣고 gluten.. Engineering/식품 영양 | 공학 2020. 12. 9.

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  일반화학실험 | 머리카락에 포함된 질소 검출 TIP 강한 염기인 수산화칼슘 수용액을 이용해서 머리카락 속의 단백질인 케라틴을 분해하고, 질소를 검출한다. 강한 염기인수산화칼륨 수용액을 이용해서 머리카락 속의 단백질인 케라틴을 분해하고, 질소를 검출한다. 모든 단백질은 그 보다 작은 단위체인 아미노산으로 이루어진 고분자 화합물이다. 그리고 모든 아미노산은 질소를 포함하고 있다. 케라틴은 또한 황을 포함하고 있는데, 이것 때문에 이러한 단백질을 태울 때 강한 냄새가 난다. 우리는 케라틴을 강한 염기로 처리하여 파괴할 수 있으며, 케라틴이 파괴되면 질소가 암모니아로 유리되는데 그 독특한 냄새로 우리는 유리된 암모니아를 확인할 수 있다. 또는 리트머스를 이용하여 더 확실하게 확인할 수 있다. 어떠한 반응 조건 또는 물질이 단백질을 분해하는데, 이러한 요소.. Chemistry/일반화학 2020. 11. 9.

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  분자생물학개론 | Edman degradation TIP 1. Edman Sequencing의 개요 2. 왜 Edman Sequencing 이 분석과정에 필요한가? 3. Edman degradation 실험 과정 4. Edman Protein Sequencing의 분석에서의 장점 5. Edman Protein Sequencing 의 분석에서의 단점 6. Edman Sequencing에 단백질 분자량에 따른 필요한 단백질 양 7. N-terminal Blocking에 영향을 주는 아미노산 8. PVDF membrane blotting시 - MeOH의 적정 농도 9. Sequencing 분석 결과가 나오지 않을 때, 고려해야할 몇가지 사항 펩타이드나 단백질의 N-말단 아미노산을 결정하는 방법으로 N-말단을 페닐 아이소사이아네이트(C6H5N=C=S)로서 처리.. Biology/분자생물학 2020. 10. 21.

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  일반화학실험 | MALDI-TOF 펩타이드 질량 분석 TIP 본 실험에서는 주어진 단백질을 트립신으로 가수분해하고 얻어진 펩타이드들의 질량을 측정하여 단백질 lysozyme, bovine serum albumin(BSA), ovalbumin 3가지 중에서 어느 것인지 알아내는 실험을 통하여 펩타이드 질량으로부터 단백질을 동정하는 방법, 그리고 단백질이나 펩타이드 분자량 측정에 사용되는 MALDI-TOF MS 방법의 원리와 기기 사용법을 배운다. 프로테오믹스 우리가 생명을 유지하고 대물림을 하기 위해 꼭 해야 하는 일을 몇 가지만 든다고 하면 먹은 음식의 소화, 산소의 운송, ATP의 생산, DNA의 복제, 근육세포의 생산, 세포막을 통한 물질의 이동, 활성산소의 분해 등 우선 순위를 가리기 힘든 중요한 일이 한 두 가지가 아니다. 그 중 많은 부분이 체온에.. Chemistry/일반화학 2020. 10. 13.

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  일반생물학실험 | 생물학적 분자의 검정 TIP 생명체의 중요한 고분자 물질인 단백질, 탄수화물, 지질의 구조와 기능을 이해하고 발색 반응에 의한 생물학적 분자의 검정법에 대해 알아본다. 탄수화물의 검정 녹말, 셀룰로오스, 포도당등과 간이 일반적으로 탄소․수소․산소의 세 원소로 이루어져 있는 화합물이다. 생물체의 구성성분이거나 에너지원으로 사용되는 등 생물체에 꼭 필요한 화합물이다. 탄수화물은 C, H, O로 구성되어있다. 단당류(monosaccharide)는 3～7개의 C를 함유하고 있으며 더 복잡한 탄수화물을 만드는 기본 단위가 된다. 두 개의 단당류가 결합하여 이당류(disaccharide)를 형성하며 많은 수의 단당류가 결합하여 다당류(polysaccharide)를 형성한다. 포도당과 같은 6탄당은 생명체의 기초적인 에너지원이 되며 식물.. Biology/일반 | 세포 생물학 2020. 7. 3.

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  생화학실험 | Western Blotting - SDS-Page TIP 1. 단백질을 크기별로 분리하는 기술로 항원-항체 반응을 이용하여 전체 단백질에서 특정 단백질만을 Detection 할 수 있다. 2. 본 Western Blotting은 뉴런으로 분화하기 전인 Neuroblastoma(Ne,신경모세포)를 사용해 신경모세포가 암이 되게 유발하는 단백질을 찾을 수 있다. Gel electrophoresis에 대한 세부적인 이론이 복잡하고 현재로서는 불완전할지라도, 그 기본적인 개념은 쉽게 이해될 수 있다. 간단히 말해서 전기영동 분석은 전하를 띤 입자들이 외부에서 공급된 전기장의 영향을 받아서 반대 부호를 가진 전극 쪽으로 이동하는 데서 기인한다. 입자들의 움직임은 주위의 molecular sieve로서 역할을 하는 gel matrix와의 상호작용에 의해 지연된다... Biology/생화학 2020. 5. 28.

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  물리화학실험 | Crystallization of protein - 단백질의 결정화 TIP Precipitant(polyethylene glycol=PEG), Salt(Sodium acetate, Potassium acetate, Ammonium acetate), Buffer(Tris buffer), 3차 DW를 각각 다른 비율로 조성하여 solution을 만든 뒤, crystallization을(결정화) 진행하여 본다. Protein Crystallization 높은 농도의 염이 녹아있는 용액 내에는 물을 차지하기 위한 ion과 protein molecule들의 경쟁이 있다. 경쟁의 치열한 정도는 protein의 표면 극성에 따라 결정지어 진다. 이것은 pH의 주요한 작용 때문이며, 단백질은 solvated 상태를 유지하기 위해 물과 반드시 결합하려고 하지만 ion과의 경쟁으로부터 물.. Chemistry/물리화학 2020. 5. 22.

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  분자생물학실험 | Western blotting Western blot은 여러 단백질의 혼합물로부터 어떤 특정단백질을 찾아내는 기법으로서 찾고자 하는 단백질에 대한 항체를 사용하여 항원-항체 반응을 일으킴으로써 특정단백질의 존재여부를 밝혀낸다. 특정 단백질을 찾기 위해서 먼저 gel electrophoresis를 이용하여 크기별로 분리해낸다. 단백질을 순수하게 크기별로 분리해 내기 위해서는 단백질의 단위 질량당 charge와 3차원 folding 구조를 모두 같게 해줘야 한다. 이런 이유로, 단백질은 SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electro phoresis)를 수행한다. 이는, SDS를 detergent로서 이용하여 단백질을 모두 단위 질량당 같은 정도의 negative charge를 띠.. Biology/분자생물학 2020. 4. 24.